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第6章 动物实验与血清学试验
1. 2.
3. 4. 5.
麻醉之前应禁食,准确称量动物体重,作为计算麻醉剂用 量的依据。 应注意不同麻醉药对动物的作用是不同的,如戊巴比妥钠、 硫贲妥钠等能抑制心肌收缩力,使肌肉松弛,而氯胺酮则 相反。 大动物犬、猴、羊等麻醉前半小时应注射麻醉前给药如阿 托品和苯巴比妥钠。 静脉注射麻醉药是必须缓慢,边注射边观察动物。 在麻醉过程中密切观察动物的反应,动物在麻醉期间体温 下降,应注意保温。
家兔的抓取
犬抓取注意点
不要轻易使用长柄铁钳,钳伤造 成的伤害会使它对你更加恐惧, 影响以后实验的进行。 抓取后用绳子将嘴绑住。
狗嘴的捆绑方法
二、实验动物的麻醉方 法
实验动物的麻醉方法
对实验动物进行麻醉的目的是:消除实验过程中引起的痛 苦和不适,确保实验动物的安全和动物实验的顺利进行, 是动物实验伦理的一个重要方面。 应结合实验目的、实验动物种类、日龄及健康状况等因素 进行综合考虑,决定选用的麻醉剂和麻醉方法。 麻醉方法有全身麻醉和局部麻醉两种。在实验动物的麻醉 中绝大多数采用全身麻醉。
大鼠
1.5-5.0 1.0-8.0
应
用
大批动物集中处死采血,速度快 大批动物集中采血,若一次少量采,可反 复几次
尾静脉切割采血法
0.01-0.05
0.1-0.5
用于用血量少的检验, 如血常规,能长时期反复多次采血
眼眶后静脉采血法
0.02-0.1
0.2-1.0
能反复多次采血
腋窝动静脉采血法
心脏采血法 腹主动脉采血法
4、犬的采血方法
后肢外侧小隐静脉采血 前肢背侧皮下头静脉采 血 颈静脉采血 股动脉采血
前肢静脉采血 后肢小隐静脉采血
实验动物血液的采集方法
各种实验动物活体安全采血量和致死采血量
动物种类 小鼠 大鼠 豚鼠 兔 犬 猴 最大安全采血量 (ml) 0.3 2 5 10 50 15 最小致死采血量 (ml) 0.5 5 10 40 300 60
2~4小时。 对呼吸和神 经影响小, 1000~1500(ip) 但可降低血 压 30~40(ip) 2~4小时。 注射后作用 迅速,一般 最常用,肌 松不够完全。 约半小时。
45~50(ip)
40~50(ip)
40~50(ip) 20~25(iv) 30~40(iv)
实验动物的麻醉方法
实验动物麻醉应注意的事项
空气栓塞法 优点:方法简单、迅速, 缺点:动物死于急性循环衰竭,各脏器凝血十分明显。 急性失血法 先行麻醉,再分离颈动脉或股动脉,将一根较粗的塑料管插入动脉内放 血。动物在3~5min内即可死亡。 优点:动物十分安静,对脏器无损伤,对活杀采集病理切片标本是一种 比较好的方法。 化学药物致死法 通过注射一定量的化学药物而使动物迅速致死。 例如: 10%氯化钾溶液:静脉注射,用量为犬20~30ml/只,兔5~10ml/只
一、动物的抓取
动物的抓取
小白鼠的捉持
捉拿时可先用右手抓住并提起鼠尾,置于实验台或鼠笼上, 并稍向后拉;用左手的拇指和食指抓住小鼠两耳后颈背部的 皮肤,将鼠置于左手心中,拉直后肢,以无名指及小指按住 鼠尾或小鼠的左后肢即可。
小鼠抓取方法
动物的抓取
大白鼠的捉持
大白鼠的捉拿时,可戴上手套。实验者可用右手捉住鼠尾, 放在实验台或鼠笼上,并稍向后拉;左手掌面向鼠背,食指 和中指压住鼠的头顶,拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入, 将鼠的两前肢卡住;或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。
第六章 动物实验与血清学试验
Hale Waihona Puke 主要内容12实验动物的抓取方法
实验动物的麻醉方法
3 实验动物血液的采集方法 4 实验动物各种体液的采集方法 5
实验动物的处死方法
进行实验操作前必须注意的事情
1. 实验动物作为人类的替难者进行各种生物医学研究。试
验中要从动物福利和动物实验伦理学考虑,减少一些不 必要的动物实验,如若不得不做的动物实验,要尽可能 将动物的痛苦、压迫和不适降到最低。 2. 动物实验的实践性非常强,不能仅靠书本理论知识,需 要通过反复实践加以掌握,以保证实验的顺利进行和减 少动物承受的痛苦
大 鼠 抓 取 方 法
动物的抓取
豚鼠的捉拿、固定
豚鼠胆小易惊,抓取时必须稳、准、迅速。 先用手掌扣住鼠背,抓住其肩胛上方,将手张开,用手指环握颈部,另一只 手托住其臀部,即可轻轻提起、固定。
豚鼠抓取方法
动物的抓取
家兔的捉持
用一手抓住家兔颈背部皮肤,将兔 提起,另一手托其臀部,使兔呈 坐位姿势。
实验动物的麻醉方法
全身麻醉
吸入麻醉法:用挥 发性麻醉药。 常用麻醉药: 乙醚 氯仿
注射麻醉法:用非 挥发性麻醉药。 常用麻醉药: 戊巴比妥钠 硫喷妥钠 氯氨酮 乌拉坦
实验动物的麻醉方法
常用非挥发性麻醉药的剂量
药物及常 用的溶液 浓度 乌拉坦 (20~ 25%) 戊巴比妥 钠 ( 1~ 4%) 硫喷妥钠 (2~4%) 剂量(mg/kg) 小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 1000~1200(iv) 1000~1500 (ip) 1000~1500 (ip) 1000~1500 (ip) 麻醉持续时 间与特点
0.5-1.5
-
1.0-5.0
0.2-1.0 5.0-10.0
需处死动物,麻醉后采血
需处死动物,麻醉后采血
实验动物血液的采集方法
2、豚鼠采血方法
耳缘切口采血 背中足静脉采血 心脏采血 耳缘静脉采血 耳中央动脉采血 颈静脉采血 颈动脉采血 心脏采血
3、兔的采血方法
实验动物血液的采集方法
血清学试验
本质:抗原抗体在体外出现肉眼可见的特 异性反应 优点:特异性强、敏感性高、简便、快速 血清学试验包括:血清学鉴定和血清学诊 断
血清学鉴定
用含已知特异性抗体的免疫血清(诊断血 清)与分离培养出的未知纯种细菌或标本 中的抗原,进行血清学反应,以确定病原 菌的种或型。
直接凝集试验
四、动物各种体液的采集方法
动物各种体液的采集方法
1、尿液的采集方法
常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量 的水。 代谢笼法(适用于大、小鼠) 导尿法(常用于雄性兔、狗) 压迫膀胱法(适用于兔、狗等较大动物) 输尿管插管法 膀胱插管法 膀胱穿刺法 剖腹采尿法 反射排尿法
三、实验动物血液的采集方 法
实验动物血液的采集方法
1、大鼠、小鼠的采血 方法
尾部采血 眼眶后静脉丛采血 颈(股)静脉或颈(股)动脉 采血 摘眼球采血 断头采血 心脏采血
尾部采血
心脏采血
大小鼠不同采血方法的比较
采血量(ml) 采血方法 断头采血法 摘眼球采血法
小鼠
0.2-1.0 0.2-1.5
五、实验动物的处死方法
实验动物的处死方法
安死术的概念
“安死术”是指以人道的方法处死动物的过程。在处死动 物过程中减少动物的惊恐或焦虑,安静地、无痛苦地死亡。
实验动物的处死方法
1、大鼠小鼠处死方法
颈椎脱臼法 急性失血法 麻醉致死法 断头法 击打法
实验动物的处死方法
2、犬、兔、豚鼠处死方法
国际上对动物实验伦理有如下五项要求:
⑴动物居住空间应符合标准 ,注意日常的饲育管理 , 不使动物饥饿、缺 水和患病。 ⑵尽可能地采用代替法最少地使用和牺牲动物。 ⑶使用犬、猫和猴时,实验前应进行训练,尽可能地减少动物的恐惧 和不安。 ⑷实验结束和动物不可能恢复时,应采取安乐死。 ⑸要爱护试验动物和对由于实验死亡的动物应持有怜悯和感谢之情。
荚膜肿胀试验
血清学诊断
已知抗原检测血清中相应抗体 取患者急性期和恢复期双份血清,后者的 抗体效价比前者升高4倍或4倍以上才有诊 断意义。
THE END
谢谢大家!
动物各种体液的采集方法
2、消化液的采集
唾液(直接抽取法;制造腮腺瘘法) 胃液(直接收集胃液法;制备胃瘘法) 胰液和胆汁(通过对胰总管和胆总管的插管而获得)
3、脑脊液的采集
狗、兔脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法 大鼠脑脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法
4、其他体液的采集
胸水的采集 腹水的采集 骨髓的采集 精液的采集 阴道内液体的采集