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动物细胞培养130913PPT课件
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
(2)适宜的温度和PH值
36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4
保证细胞顺利的 生长增殖
(3)必要的气体条件
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
维持培养液的PH
CO2 培养箱-模拟人体环境
• 维持二 氧化碳 水平(510%)
• 湿度
• 温度 (37℃)
大面积皮肤烧 伤或烫伤?
(三)动物细胞培养
1、概念: 从动物机体中取出相关组织,将它分散成单 个细胞,然后在适宜的培养基中,让这些细胞生 长和繁殖。
2、原理: 细胞增殖 (有丝分裂)
3、过程:
Q2 选什么组织?
动物胚胎或幼龄动物的组织、器 官,它们的细胞分化程度低,增 殖能力强,分裂旺盛,容易培养。
变化,带有癌变的特点,可能在培养条件下无限 制的传代下去,这种传代细胞称为细胞系。
写在最后
经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量 Study Constantly, And You Will Know Everything. The More
You Know, The More Powerful You Will Be
(1)大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、 干扰素、单克隆抗体)
资料1:
干扰素是动物细胞分泌产生的蛋白质,具有抗病毒 等多种生物学活性。 β干扰素是人的成纤维细胞产 生的,一个成纤维细胞产生的β干扰素量非常低。 现要获得大量的β干扰素。如何解决?
(2)培养的动物细胞可以用于检测有毒物质, 判断某种物质的毒性
信息2:
2005年4月,美国一家非官方癌症研究中心发布信 息说,“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三 氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。如何 检验该药物的毒性?
①材料准备----液体试剂
a.浓度为0.99%的“三氯生”试剂;
b.细胞培养液:b细胞培养液:水、无机 盐、 葡萄糖 、微量元素、 氨基酸、促生长因子、
结束语
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
讲师:XXXXXX XX年XX月XX日
血清等,为了防止细胞培养过程中细菌的污染, 可向培养液中加入适量的 。 抗生素 c. 胰蛋白酶 .
③制备细胞培养液:取两个培养瓶,分别标号
为1、2,加入等量培养液,1号培养瓶中的培养液加
入0.99%三氯生,2号培养瓶中不加三氯生
⑥预期结果及结论:
a. 若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分数相当,
则说明
白色念珠菌感染
(4)无菌、无毒 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
贴壁生长:大多数组织细胞不适应悬浮生长, 必须在固定的表面生长和分裂。
接触抑制
细胞在贴壁生长过程中, 当细胞间相互接触时,细 胞生长和分裂停止,最后 形成单层细胞。
辨析
1.培养中的人正常B细胞能够无限地增殖。 × 2.人的成熟红细胞经过培养能形成大量细胞。 ×
Q3.为什么要对取出的动物组织进行处理,使细胞 分散成单个细胞?
分散的单个细胞容易摄取所需的营养,排出代谢废物; 而用大块组织培养时,内部细胞的营养供应和代谢废物 的排出都较困难。
Q4.如何分散细胞?
弹性蛋白 弹性蛋白
消化酶 胃蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶
体液
最适pH 1.5--2.5
8 7 7.2--7.4
3.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程属于原代培
养。
×
4.通常在细胞培养基中加入适量血清,其原因是补充合成 培养基中缺少的营养物质。
√
加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
细胞增殖
去掉组织
液
间蛋白
无限传代
细胞系
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
细胞株
4、应用
胰蛋白酶
Q5胰蛋白酶会不会把细胞消化掉吗? 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外,长时 间的作用也会消化细胞膜蛋白,对细胞有损伤作 用,因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
2.过程
取动物器官 和组织
幼龄动物
剪碎组织
胰蛋白酶处理
单个细胞
原代培养
Q6培养细胞应该模拟内环境的哪些方面呢?
(1)全部的营养物质
接触抑制:细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分 裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细 胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再 增加。
失去接触抑制
50代以后
接触抑制
细胞株: 从原代培养细胞群中筛选出进行传代培
养的细胞,能传到40-50代,其遗传物质没有 发生变化。
细胞系: 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
0.99%三氯生对人体无害 .
b. 若1号培养瓶中变异细胞的百分数大于2号瓶
则说明 0.99%三氯生对人体有害
.
c. 若1号培养瓶中变异细胞的百分数小于2号瓶
则说明 0.99%三氯生可能抑制人体细胞癌变.
4、应用
(3)用于生理、病理、药理等方面的研究, 为治疗和预防疾病提供理论依据
动物细胞生长特性