总皂苷检测方法-总皂苷含量测定法(香草醛法):实验流程图2017.10
【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via Antioxidant Mechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16.
【简介】皂苷广泛存在于中药及其他植物中,而且化学结构大同小异的皂苷往往同时存在。
为了测定这些皂苷的总含量,便建立了总皂苷的检测方法。
总皂苷的检测多使用分光光度法,并以某种标准品绘制工作曲线,依该曲线所建立的回归方程,计算其含量。
【溶液配制】
1.香草醛-冰醋酸溶液(测试液)配制:精密称取25mg香草醛,加冰醋酸定容至5mL。
即制成5mg/mL
香草醛-冰醋酸测试液。
2.样品液配制:将待检测的样品用甲醇溶解,配成约5mg/mL的样品液。
具体浓度视样品的溶解度而定,
但是必须有精确的数据。
3.齐墩果酸标准品溶液配制:精密称取齐墩果酸1mg,加甲醇定容至5mL,配成0.2mg/mL齐墩果酸标
准品溶液。
(也可以使用其他的皂苷物质,如人参皂苷Rg3。
但必须是纯的化合物)
4. 高氯酸:分析纯试剂。
5. 冰醋酸:即纯的无水乙酸(分析纯)
【检测方法与实验流程图】
【标准曲线绘制】(齐墩果酸)
取上述齐墩果酸溶液x μL (x=0,40,80,120,160,200),依“实验流程图”,在70℃水浴15mim 后呈桃红色。
以第一份溶液(x=0)作为空白对照,测A540nm值。
以“产物混合物”时的齐墩果酸的质量,为横坐标,A540nm值为纵坐标,绘制标准曲线。
以此标准曲线计算,得线性回归方程。
【样品液的测定】
将上述“实验流程图”中的“齐墩果酸标准品溶液”换成样品液,进行实验,并测定其A540nm值。
将此A540nm代入线性回归方程,即可计算出其总皂苷的含量(以齐墩果酸计)。
【说明】
1.此法是以齐墩果酸为标准品测得总皂苷的含量。
所以,其结果应表示为,如:“某某提取物中含
有0.12mg/g的总皂苷(以齐墩果酸计)”。
这并不意味着该提取物中真的就含有齐墩果酸。
2.“实验流程图”中,在“彻底挥干溶剂”一步中,如果溶剂挥干不彻底,哪怕是有一点点,都
会干扰。
水也要彻底挥干。
1。