COOH
N H3C
N
N
O CH3
Ofloxacin
理化性质
◆ 酸碱两性 ◆易氧化性 ◆紫外吸收特性 ◆氟的特征反应
体内过程
◆口腹容易吸收，半衰期较短，达峰时间较快
◆在体内容易发生Ⅱ相代谢，与UDPGE结合 ◆体内分布广泛，血清蛋白结合率低，可进入各种组织
紫外分光光光度法
主
电化学分析
要
荧光分析
的 分
C=0.06125F-0.007793 (r=0.9998)
Recovery=98.79%
RSD=1.37%
高效液相色谱分析
◆该类化合物具有容易解离的-COOH和N，故此需
要例子对试剂作为流动相。RP-IP-HPLC
◆该类化合物具有较好的UV和荧光吸收特性，可以采
用UV和FD。
◆由于生物样本较为复杂，故往往需要一定的前处理
Time
A
B
0~20 min 70%~50% 30%~50% 20~25 min 50%~70% 50%~30%
血浆样品 CH3CN 10000 rpm
加入内标
上清液
LLE
Chromatogram Peak area and retention time
10000 rpm
Ofloxacin光学异构体的拆分
HPLC determination of enoxacin, ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin with photoinduced fluorimetric (PIF) detection and multiemission scanning: Application to urine and serum
High-performance liquid chromatographic determination of ciprofloxacin in plasma samples
氟喹诺酮类药物的分析
药学院药物分析教研室
【大纲要求】
1、掌握氟喹诺酮类代表药物的体内过程 2、熟悉氟喹诺酮类代表的体内分析方法
O
F
COOH
主
N
N
要
HN
CH3
代
表
Norfloxacin
药 物
O
F
COOH
N
N
HN
Ciprofloxacin
O
F
COOH
N
N
HN
F
CH3
CH3
Lomefloxacin
O
F
The simultaneous separation and determination of five quinolone antibotics using isocratic reversed-phase HPLC:
Application to stability studies on an ofloxacin tablet formulation
Recovery=97.6%, RSD=4.7%
利用化合物中的特殊
电
库仑滴定法 基团，在一定条件下产
化 电导滴定法 生具有还原性的峰电位，
学 分
电位滴定法 峰高与样品浓度成比例
析
永停滴定法 关系。
荧光分析
O
F
COOH
N HN
N CH3
Exciting wavelength: 276 nm Emission wavelength: 447 nm
取尿样1 ml，加氧氟沙星和内标各4μg，混 匀后过滤，取滤液20μl进样分析
方法学考察： 回收率（RecoveryS）＝99.9％、RecoveryR =101.6% 线性范围：0.6～500μg/ml、LOQ=0.6μg/ml
固相萃取离子对HPLC法测定依 诺沙星及其代谢物
色谱条件：Nucleosil C18 (125×4.6 mm) 流动相：乙腈－0.1 mol/l柠檬酸－20％氢氧化
色谱条件：Shimadzu ODS(150×6.3 mm, I.D.,10μm)
流动相：甲醇－CMPA(14: 86) 流速：1.0 ml/min
检测器：荧光检测 330/505 nm
CMPA的制备 L－苯丙氨酸 0.66g 无水硫酸铜 0.32g 溶于500 ml去离子水 用硫酸调节pH=3.5
手段。
◆可以采时测定血浆中的4种 氟喹诺酮类化合物
Column: Hypersil C18 (100 × 2 mm, I.D., 5μm) 流动相：CH3CN－磷酸盐缓冲液（10 mmol/l NaH2 PO4、10 mmol/l SDS、5 mmol/l 溴化四丁基铵，pH=
2.0）＝25 75 流速：0.5 ml/min
FD: 280/418 nm
血浆样品 HClO4
10000 rpm
加入内标
上清液进样
Chromatogram Peak area and retention time
IS
AFLX
ENX
NFLX
测定结果与方法学
RSD≤8.0% 日内和日间 Linear range: 0.1~5μg/ml、0.025~1μg/ml、0.025~5μg/ml LOQ: 100 ng/ml、10 ng/ml、20ng/ml
四丁基铵－高氯酸（140: 860: 6.5: 4.5) 流速：1.0 ml/min 检测波长：340 nm
血浆经过蛋白沉淀后直接进样分析 尿样经固相萃取后进行色谱分析
High-performance liquid chromatography assay for moxifloxacin: Pharmacokinetics in human plasma
高效液相色谱分析
析
核磁共振技术
方 法
液相色谱与质谱联用
高效毛细管电泳
△A法测定尿中的诺氟沙星
基本原理：利用NFLX在酸碱中的紫外吸收差值，其中以碱 性情况下的尿液维样品测定液，以酸性情况下的尿液为参 比，在285 nm处测定不同条件下的吸收度差值，进而计算 含量的一种方法。
△A=0.0447C+0.0808 (r=0.9971)
环丙沙星及其代谢物的HPLC分析检测
Chromatographic conditions: Spheri ODS (250 × 4.6 mm, I.D., 5μ m)
Guard column: Bondapak C18 Mobile-phase: 0.1 mol/l KH2PO4-CH3CN
Gradient elution mode