低温诱导染色体加倍.1
卡诺氏固定液的配制:取无水酒精和冰醋酸,按 体积比3:1的比例混合:该溶液最好现配现用。 盐酸酒精解离液的配制:取无水酒精和盐酸,按 体积比1:1的比例混合。该溶液最好现配现用。 质量浓度为10mg/mL的龙胆紫溶液的配制:将 100mL的体积分数为45%的醋酸溶液煮沸,加入 1g龙胆紫后,搅匀再煮5min,待冷却后过滤,备 用
探究低温诱导染色体加倍
方案设计:421宿舍
背景知识
利用一些诱发因素可以人工诱导植物 产生多倍体,包括物理因素,如温度剧 变,射线处理,嫁接和切断等,还有化 学因素,如植物碱,植物生长激素,秋 水仙素。由于一些化学诱导物质有剧毒, 且价格昂贵,比如:秋水仙素,所以我 们今天将探究低温对染色体数目的变化 的影响 。
四)制作装片及观察
取固定好的根尖,进行解离、漂洗、 染色和制片4个步骤,具体操作方法与实验 “观察植物细胞的有丝分裂”相同 先用低倍镜寻找染色体形态较好的分 裂相,再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和 反光镜,使物像清晰,仔细观察,辨认哪 些细胞发生染色体数目变化,找出处于细 胞分裂中期的细胞,进行染色体计数
实验方案设计
问题:了解了诱导染色体加倍 的原理,大家互相讨论一下, 我们应该制定一个怎样合理的 实验方案来探究它呢?那么选 择怎样的实验材料和试剂?又 如何来实行你的方案呢?
思考
选怎样的材料进行该实验? 对材料要进行怎样的处理?
洋葱:实验课前的3—5d,把 洋葱放在盛满水的广口瓶上,让它 的底部接触瓶内的水面。 蒜:实验课前的3—5d,取蒜 瓣剥去其外围干燥的膜质鳞片叶, 放在盛有少量水的培养皿中培养。 蚕豆:把50颗干燥的蚕豆种子 浸在清水中一昼夜,使它们吸胀萌 动,放在盛有少量水的培养皿中培 养。
注意:盐酸有刺激性和腐蚀性,应小心使用,避免与皮肤和眼 睛接触。
一)根尖的培养
方法1:实验课前的3—5d,把洋葱放 在盛满水的广口瓶上,让它的底部接 触瓶内的水面。 方法2:实验课前的3—5d,取蒜瓣剥 去其外围干燥的膜质鳞片叶,放在盛 有少量水的培养皿中培养。 方法3:把50颗干燥的蚕豆种子浸在 清水中一昼夜,使它们吸胀萌动,放 在盛有少量水的培养皿中培养。
本节课要掌握主要内容
实验目的 实验原理(方案设计依据) 实验选材以及准备 实验操作以及注意事项 实验结果的处理
1.学习低温诱导植物染色体数目变化的 原理及方法;
2.学会固定液.解离液等试剂的配制;
3.养成与他人合作、共享并能够欣赏别 人的观点和创意的习惯
低温和秋水仙素一样,处 理植物分生组织细胞,能够 抑制纺锤体的形成,导致分 裂后期染色体不能移向两极, 细胞加大而不分裂,着丝点 分裂后的染色体仍在一个细 胞中,故细胞中的染色体数 目加倍。如果用低温处理根 尖,则在根尖分生区内可以 检测到大量染色体加倍的细 胞,如:处理植物幼苗的芽, 则可以得到染色体加倍的植 株。
设计自己的实验记录表格:
1.体积分数为15%的盐酸溶液在本实验中 起什么作用?体积分数为95%又起什么 作用? 2. 秋水仙素与低温诱导染色体数目加倍, 这两种方法在原理上有什么相似性? 3.有人认为通过上述实验可以得出“低 温能诱导植物细胞染色体数目发生变化” 这一结论,你同意吗?为装置连同材料分成3份:一份 放入冰箱内4℃低温下培养, 第二份放入冰箱内—4℃低温下 培养,最后一份仍留在25℃下 培养。共处理36h。
三)固定根尖
剪取以上3种处理的根尖,每个根 尖为0.5—1cm,分别放人卡诺氏固定 液中固定30min,然后用体积分数95% 酒精洗两次,用体积分数70%酒精保 存于低温处,贴好标签。