不同稀释度的选择及报告方法

首先选择平均菌落数在30～300之间者进行计算，若只有 一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则将该菌落数乘
以稀释倍数报告之。

若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则 视二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均 效。若大于或等于2则报告其中稀释度较小的菌落总数。
总大肠菌群

定义：一群在36℃条件下培养24～48小时能发酵乳糖、 产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。
养箱内培养48 h，进行菌落计数。即为1mL水样中的菌落
总数。
水源水

以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样，注入盛有9 mL 灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液。

•吸取1:10的稀释液1 mL注入盛有9 mL灭菌生理盐水的试
管中，混匀成1：100稀释液。按同法依次稀释成1：1
000，1：10 000稀释液筹备用。如此递增稀释一次，必 须更换一支1 mL灭菌吸管。
2013年公共场所卫生监测 微生物指标
生活饮用水 《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750) 宾馆微生物指标 《公共场所卫生标准检验方法》（GB/T 18204-2000） 游泳池水微生物指标 《公共场所卫生标准检验方法》（GB/T 18204-2000） 集中空调系统微生物指标 《公共场所集中空调通风系统卫生规范》（WS 394-2012）
水样保存方法

黑暗处，4℃，4h内检测。

如有游离余氯应在采样瓶消毒前每125ml加
0.1mg硫代硫酸钠溶液(10%)。
菌落总数检测方法

1.平皿计数法 本法适用于生活饮用水及其水源水中菌落总数的 测定。
菌落总数

指在一定条件培养后(如培基成分、培养温度和时
间、pH、需氧性质等)，1mL水样中所含菌落的总

公共场所生活饮用水微生物检验
指标： 菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、 大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫、隐孢子虫

生活饮用水中微生物指标


名称 菌落总数
单位 CFU/mL
限值 100
总大肠菌群 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出 耐热大肠菌群 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出 大肠埃希氏菌 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出

如果所有平板上都菌落密布，不要用“多不可计”报告， 而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个平板1cm2中
的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数，乘以皿底
面积63.6 ，再乘其稀释倍数作报告。

菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告，大 于100时，采用两位有效数字，在两位有效数字后面的数 值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可 用10的指数来表示（见表1“00，则应按稀释度最 高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应以按稀释度最 低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

•若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则应以
最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。

•若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告 之。
可用实验室盛装过浓溶液的瓶作采样瓶。通常我
们使用500ml的高压灭菌的细口瓶采样。

2.容器及瓶塞、瓶盖应能经受灭菌的温度。



3.容器洗涤：将容器用自来水和洗涤剂洗 涤，并用自来水彻底冲洗后，用10%盐酸溶 液浸泡过夜，然后依次用自来水，蒸馏水洗 净。 4. 容器灭菌：分干热和高压蒸气灭菌两种。 干热灭菌要求160℃下维持2 h；高压蒸气灭 菌要求121℃下维持15 min，高压蒸汽灭菌 后的容器如不立即使用，应于60℃将瓶内冷 凝水烘干。灭菌后的容器应在2周内使用。
数。
检验步骤

生活饮用水 •以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1 mL充分混匀的水样，
注入灭菌平皿中，倾注约15 mL已融化并冷却到45℃左右
的营养琼脂培养基，立即旋摇平皿，使水样与培养基充分 混匀。每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只 倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

•待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36±℃培

贾第鞭毛虫 隐孢子虫
个/10 L 个/10 L
<1 <1
水样的采集和保存

采样的原则: 1. 采集的水样，必须具有代表性，能真实 反映水质状况。 2.在实验室检测之前水样中微生物数量应保持不 变。
采样容器

1.采样容器应采用洁净、无色、无毒的硬质玻璃 （又称硼硅玻璃）。样品瓶必须专瓶专用，切不

用灭菌吸管取未稀释的水样和2个～3个适宜稀释度的水样 1 mL，分别注入灭菌平皿内。

以下操作同生活饮用水的检验步骤。
菌落计数及报告方法

菌落计数方法：先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放 大5 倍～10 倍的放大镜检查，以防遗漏。

•两个平板若其中一个平皿有较大片状菌落生长时，应以
无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片 状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均 匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再 求该稀释度的平均菌落数。

水样采集

单独采样。 同一水源、同一时间采集几类检测指标的水样时，应先采 集供微生物学指标检测的水样。

采样时应直接采集，不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶，并
避免手指和其他物品对瓶口的沾污。

末梢水采集：采样前用酒精灯灼烧对水管口进行消毒，放 水约5分钟后采集水样约玻璃瓶的80%。容积整个过程要 快，稳。不要让水流过大，以免溅出，管口不要与瓶口接 触，收集完应马上将瓶塞旋紧。
公共场所卫生监测微 生物检验技术
公共场所卫生技术服务机构承担的工作 •（一）空气、微小气候（湿度、温度、风速）、采光、照明
、噪声等室内环境的卫生检验、检测与评价； •（二）顾客用品用具的卫生检验、检测与评价； •（三）游泳场（馆）和公共浴室水质卫生检验、检测与评价 ； •（四）公共场所饮用水（包括：自备水、直饮水、二次供水 ）卫生检验、检测与评价； •（五）集中空调通风系统的卫生检验、检测与评价。