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实验二 革兰氏染色及真菌结构讲义教材
六、问题与讨论
要得到正确的革兰氏染色结果必须注意 哪些操作?哪一步是关键?Why?
本次实验课结束
请确保油镜头擦拭干净! 下周再见!
铵结晶紫染液,染1分钟,倾去 染液,流水冲洗至无紫色。
3. 媒染:先用新配的路哥氏碘液冲 去残水,而后用其覆盖涂面1分 钟,后水洗。
4. 脱色:除去残水后,滴加95%酒 精进行脱色约15-20秒,后立即 用流水冲洗。
5. 复染:滴加番红染色液,染3-5 分钟,水洗后用吸水纸吸干。
6. 镜检:一、实验目的
学习细菌的革兰氏染色原理和方法
了解霉菌、酵母菌的特点并观察其形态特征
二、实验原理
单染色法:只能观察微生物的大小、形状、 和细胞排列状况,但不能鉴别微生物以及 它的特殊构造等。
复染色法:用两种或两种以上染色液进行 染色,有协助鉴别微生物的作用,故也称 鉴别染色法。常用的有: 革兰氏染色法、荚膜染色法、芽孢染色法、 鞭毛染色法等。
(一) 革兰氏染色
丹麦C.Gram创立,用于细菌分类学研究 细菌细胞壁的结构
(二) 了解霉菌、酵母菌的特点 并观察其形态特征
三、实验材料
大肠杆菌、枯草芽孢杆菌(24h培养物) 革兰氏染色液一套 真核微生物标片
四、实验步骤
革兰氏(Gram)染色法
1. 涂片 2. 初染:在做好的涂面上滴加草酸
注意事项
1.革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色 过度,革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性 菌;如脱色时间过短,革兰氏阴性菌也会被 染成革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂 片厚薄及乙醇用量多少等因素的影响,难以 严格规定。
2.染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后, 应吸去玻片上的残水,以免染色液被稀释 而影响染色效果。
1.单轮生青霉群;2.对称二轮 生青霉群;3.多轮生青霉群;4. 不对称生青霉群
观察黑曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着
生情况(着重辨认分生孢子梗、足细胞 和分生孢子):
五、实验结果
记录所观察到的二种菌革兰氏染色结果 的差别,并判断是阳性还是阴性
观看根霉菌、青霉菌、曲霉菌与酵母菌 的示范片
绘图、写实验报告
3.选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h, E.coli培养24h。若菌龄太老,由于菌体死 亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。
观察酵母菌形态和无 性繁殖:
用高倍镜观察啤酒酵母的 形态和出芽繁殖。
观察黑根霉菌丝情况和子囊孢子情
况(着重辨认孢子囊、包囊梗、假 根):
观察青霉菌丝和分 生孢子着生情况: