试 验 中 选 用 了 ＦＦＡＰ、ＮＰＧＡ、ＳＥ － ３０、ＤＥＧＳ、ＤＢ－ ＷＡＸＥＴＲ 毛细柱及ＧＢ／ Ｔ ５００９．１２０－ ２００３ 中的 Ｐｏｒａｐａｋ ＱＳ 柱均不出峰 或峰 形 不好 ， 采 用 ５％ ＤＥＧＳ＋１％磷 酸 柱，各 组 分 完 全 分 开 ， 峰 形 较 对 称 。 结 果 见 图 １、图 ２ 标样和样品色谱图。
０．４
丁酸
０．２６９
０．２８３
０．２７７
０．２７２
０．２９０
０．２６１
０．２７５
１．１
３ 小结 本实验采用低温的水做溶剂， 目的是尽量避免
样 品 提 取 过 程 中 ＶＦＡ 的 挥 发 ， 水 做 溶 剂 使 样 品 提 取 比 较 完 全 。程 序 升 温 测 定 ， 各 组 分 分 离 效 果 较 好 ， 分 析 时 间 短 ， 精 密 度 、精 确 度 较 高 ， 适 用 大 批 量 样 品 的测定。
色谱 柱 ： ２ｍ×３ｍｍ 内 装 ５％聚 二 乙 二 醇 丁 二 酸 酯
林秋萍， 河南省农业科学院科学实验中心， 副研究员， ４５０００２， 河南省郑州市农业路 １ 号。
李瑾、冯书惠、王会锋、王铁良， 单位及通讯地址同第一作者。 收稿日期： ２００６－ ０５－ ０８
（ ＤＥＧＳ） ＋１％磷酸的不锈钢柱。 仪器条件： 柱温 １１０℃ ２℃／ｍｉｎ １２０℃， 进样器、检测
１ 对号入座。要正确按不同畜禽种类和不同生长、发育阶段选用不同比例的预混料品种 ， 能量饲料添加要准确， 搅拌 要均匀。
２ 更换预混料要循序渐进。突然更换预混料畜禽不适应， 影响采食和生长。使用中应逐渐增加新料用量， 减少旧料用 量， 大约一周时间过渡到完全使用新预混料。
３ 要按推荐配方配合饲料。有很多养殖户使用预混料常常凭自己的经验， 随便改变推荐配方， 造成各项营养指标不能 满足畜禽各期的生长需要。
电压（ ｍｖ） 乳酸
异戊酸 乙酸
丙酸 丁酸 戊酸
１１ １０ ９ ８ ７ ６ ５ ４ ３ ２ １
０
１２３ ４５６７８９
时间（ ｍｉｎ）
图 １ ＶＦＡ 和乳酸（ 乙醛） 标样色谱
乙酸
电压（ ｍｖ） 乳酸
丙酸 丁酸 戊酸
１１ １０ ９ ８ ７ ６ ５ ４ ３ ２ １
０ １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８９ 时间（ ｍｉｎ）
①２５％ 偏磷酸： 称取 ２５．０ｇ 偏磷酸加水至 １００ｍｌ。 ②１５％ 高碘酸： 称取 １．５ｇ 高碘酸加水至 １０ｍｌ。③标 样： 乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异戊酸、乳酸均为色谱纯。 根据需要配置成不同浓度的混合溶液。 １．２ 仪器
植物组织捣碎机； 气相色谱仪： 日本岛津 ＧＣ－ ９Ａ， 具有氢火焰离子化检测器（ ＦＩＤ） 。 １．３ 样品制备
检测技术
《饲料工业》·２００６ 年第 ２７ 卷第 １５ 期
挥发性脂肪酸和乳酸的测定方法研究
林秋萍 李 瑾 冯书惠 王会锋 王铁良
乙酸 、丙酸 、丁 酸、戊 酸 、异 戊 酸 等 广 泛 地 存 在 于 自然界中， 它们的共同特点是具有较强的挥发性， 生 物 学 上 一 般 称 之 为 挥 发 性 脂 肪 酸 （ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ， ＶＦＡ） 。ＶＦＡ 在动物科学和食品科学上具有十分 重要的意义， 其代谢和含量是这些研究领域中常遇到 的问题。因此， 一个好的测定方法是研究中十分必要 的。
３
４
５
６
平均值（ ｍｇ／ｍｌ） ＲＳＤ（ ％）
乳酸
１．７１
１．６６
１．７５
１．７９
１．８３
１．６２
１．７３
７．９
乙酸
０．３２８
０．３１６
０．３３１
０．３２８
０．３３２
０．３２１
０．３２６
０．７
丙酸
０．０６３ ４ ０．０７２ １ ０．０６７ ８ ０．０６４ ９ ０．０６５ １ ０．０６８ ２
０．０６６ ９
４ 预混料不宜直接使用， 不宜用开水冲或蒸煮， 以免破坏营养物质。 ５ 不要将预混料与其它品种的预混料混合使用， 以免影响效果。 ６ 贮放时间不宜过长， 时间一长， 预混料就会分解变质， 色味全变。一般有效期为夏季最多 ３ 个月， 其它季节不超过 ６ 个月。须贮放在通风、干燥、避光、阴凉处， 以免受潮变质， 造成损失。
参考文献
１ Ｅｒｏｗｉｎ Ｚ Ｓ． Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｒｕｍｅｎ Ｆｌｕｉｄ
ｂｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ．［Ｊ］．Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉ．，１９６１， ４４：１ ７６８
２ 陈庆今， 刘焕彬， 胡勇有．气相色谱测厌氧消化液挥发性脂肪酸的
挥 发 性 脂 肪 酸 的 测 定 方 法 有 比 色 法 、 滴 定 法 、色 谱法等。相比之下， 气相色谱法以快速、准确、简便， 能 分别测定各个组分而适用于多种样品（ 如： 青贮饲料、 瘤胃液、血液、饮料等） 。但是， 气相色谱法也受多种条 件的影响， 如色谱条件、样品的处理方法等。利用挥发 性脂肪酸和乳酸易溶于水的特点， 用水提取饲料中挥 发性脂肪酸， 用偏磷酸除去可溶性蛋白质， 用高碘酸 氧化乳酸为乙醛， 直接进样， 用外标法定量测定乳酸 和其它挥发性脂肪酸的含量。 １ 试验材料与方法 １．１ 酸 异戊酸
表 １ 本方法的检出限及线性关系
浓 度 范 围（ｍｇ／ｍｌ） ０．０８１￣２．１ ０．０８２￣２．１ ０．０８９ ～２．４ ０．０８２～２．１ ０．０８０￣２．０ ０．０８３￣２．１
相关系数（ ％） ０．９９５ ３ ０．９９９ ２ ０．９９９ ５ ０．９９９ ５ ０．９９９ ６ ０．９９８ ９
快速法研究［Ｊ］．中国沼气， ２００３， ２１（ ４） ： ３～５
３ ＧＢ／Ｔ ５００９．１２０－ ２００３［Ｓ］．食品中丙酸钠、丙酸钙的测定．北京： 中国标
准出版社， ２００４
（ 编辑： 崔成德， ｃｕｉｃｅｎｇｄｅ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ）
·信 息 采 撷·
使用预混料须知
预混料逐渐被广大农户所接受。但如何正确使用预混料， 已成为广大农户迫切需要了解的问题。下面提出使用预混料 六点须知， 供广大用户参考。
检出限（ ｎｇ） ４０ ４２ ５２ ４２ ４０ ４７
２．４ 回收率实验
取已知含量的同一青贮饲料样品提取液 ６ 份， 分 别加入一定量的混合标准溶液， 按 １．５ 的方法处理， 测 得的回收率在 ７８．２％～１０２％之间， 结果见表 ２。
项目
乳酸 乙酸 丙酸 丁酸 戊酸 异戊酸
表 ２ 回收率实验
本底值
器 ２００℃。 载 气 流 速 ２０ｍｌ／ｍｉｎ； 氢 气 流 速 ３０ｍｌ／ｍｉｎ； 空 气 流
速 ３００ｍｌ／ｍｉｎ。 １．５ 测定方法
用 微 量 注 射 器 依 次 吸 取 １５％高 碘 酸 １μｌ、 空 气 １μｌ 及上清液 ２μｌ， 直接注入 色 谱仪 ， 按 １．４ 的色 谱条 件进行 ＶＦＡ 和乳酸的分析， 以外标法计算。 ２ 结果与讨论 ２．１ 色谱柱的选择
称取剪碎的青贮饲料（ 或其它） 样品（ １０±０．００２） ｇ， 置于植物组织捣碎机中加入 ２℃的去离子水 ８０ｍｌ， 间 歇捣碎 ３ｍｉｎ， 过滤于 １００ｍｌ 容量瓶中定容至刻度， 摇 匀。取 ５ｍｌ 置于 １０ｍｌ 具塞离心管中， 分别加入 ２５％的 偏磷酸 １ｍｌ， 摇匀， 静止 ３０ｍｉｎ 后，离心 １０ｍｉｎ， 上清 液 供色谱测定用。 １．４ 色谱条件
图 ２ 样品色谱
３２
林秋萍等： 挥发性脂肪酸和乳酸的测定方法研究
检测技术
２．２ 温度的选择 温度条件决定着样品分离的好坏， 我们曾采用恒
温、各种不同的程序升温， 通过多方调试， 确认以上色 谱条件在使用中是较好的。 ２．３ 方法的检出限及线性关系
本方法的线性范围较宽， 从 ４０μｇ￣２．５ｍｇ 均呈直 线关系， 最小检出限 ４０ｎｇ 左右， 其结果见表 １。
（ ％） ７８．２￣９５．６ ９２．３￣９９．８ ９１．２￣９９．０ ８７．６￣９８．９ ７９．８￣９６．９ ９５．５￣１０２
２．５ 方法的重复性 取 ６ 份同一青贮饲料样品提取液， 按 １．５ 的方法
测得的变异系数在 ０．４％～７．９％之间， 具体结果见表 ３。
表 ３ 方法的重复性
项目
１
２
重复性次数
３３
（ ｍｇ／ｍｌ） １．７０９ ８ ０．３２７ ６ ０．０６３ ４ ０．２６９ ３
－ －
添加量
（ ｍｇ／ｍｌ） ０．４１１ ２ ０．４２２ ４ ０．４８７ ６ ０．４２１ ６ ０．４００ ０ ０．４０６ ０
平均测定值
（ ｍｇ／ｍｌ） ８６．９ ９６．０ ９５．１ ９３．２ ８８．４ ９８．８
回收率范围