3 将制好的玻片放在显微镜的载物台上进行对焦观察； 4 将观察到的菌体形态结合作物种类、病斑形状、发
病位置等查询资料初步判断致病菌的种类。
徒手切片法
徒手切片法具体步骤
1 用刀片切取病健交界处的样品组织； 2 将切取的组织放入有水的培养皿中； 3 用镊子夹取较好的组织（病健交界组织、组织较薄）放在
滴上水的载玻片上，然后盖上盖玻片； 4 将制好的玻片放在显微镜的载物台上进行对焦观察； 5 将观察到的菌体形态结合作物种类、病斑形状、发病位
图3
制片方法
四种实用的临时制片法
针挑法
适用范围： 分离培养的 菌体；病斑 明显菌丝体 或其他孢子 器。图（4）
粘贴法
适用范围： 对于病斑表 生粉状物、 霉状物、锈 状物。图（5）
刮取法
适用范围： 对于病斑表 生粉状物、 颗粒状小点 或不容易做 切片的样品 等图（6）
徒手切片法
适用范围： 无明显病症 或者表生分 生孢子器之
置等查询资料初步判断致病菌的种类。
徒手切片法 徒手切片法步骤（花生黑斑病）
不产孢或无明显病症：
1 将带病的叶片或者其他组织放在25—58度保湿培养 1—2天，观察病部有没有病征。
2 如果没有病征，必须（分离培养—接种—再分离）。
总结
注意事项
①采样要典型，症状必须表现明显；
②时间要适宜，太早观察不到，太迟腐生菌干扰 或病原孢子飞散或释放；
对焦观察； 4 将观察到的菌体形态结合作物种类、病斑形状、发病位
置等查询资料初步判断致病菌的种类。
针挑法 针挑法步骤（香蕉枯萎病）
挑取
上片
观察
粘贴法
粘贴法步骤
1 用透明胶粘取植物组织表皮上的菌体、粉状物或者霉状 物等；
2 将粘下的菌体连同透明胶一起粘在载玻片上；
3 将制好的玻片放在显微镜的载物台上进行对焦观察；
常见真菌病害的诊断
ห้องสมุดไป่ตู้害诊断
传 染
1
性2
病3 害
种4
类5
真菌病害 细菌病害 病毒病害 线虫病害 寄生性种子植物病害
病害诊断
真菌病害的特点
1、田间观察：呈 分散状分布，由 点到面，由一个 发病中心向四周 扩展
2、病征鉴别： 真菌病害一般有 典型病征，如粉 状物、霉状物、 锈状物等
病害诊断
3、病原鉴定
录②相同。
症状识别
紫斑
轮斑 图2
角斑
实验室检测
实验室检测
1 明显病征的病害：田间发病情况+生物学 显微镜检测（病斑选择、制作方法） 。
2 不产孢或无明显病症：分离培养—接 种—分离。
3“顽固性真菌”：分子检测。
病斑选择
1 尽量选择发生 病嫩组织
2 尽量选择典型 的病斑
3 选择病健交界 处作为制片材 料（图3）
症状可不一样
症状可相同
显微镜的使用
4 将观察到的菌体形态结合作物种类、病斑形状、发病位 置等查询资料初步判断致病菌的种类。
粘贴法
粘贴法步骤（石榴煤烟病）
粘取
上片
观察
刮取法
刮取法步骤 1 用刀片刮取发病部位表面的粉状物或颗粒状小 点；
2 在载玻片中央滴入一滴水，把刮下的粉状物或颗粒 状小点放在有水的地方并震动刀片，然后盖上盖玻 片；
类。图（7）
针挑法
图4
粘贴法
粘贴法
图5
鸡蛋果锈病
黄瓜霜霉病
黄瓜白粉病
刮取法
图6
徒手切片法
花生褐斑病
炭疽病 图7
针挑法
针挑法步骤
1 挑取植物组织表皮上的菌丝或者培养皿中的菌丝； 2 在载玻片中央滴入一滴水，把挑取的菌体放在有水的载
玻片上并且将菌体分开； 3 盖上盖玻片，将制好的玻片放在显微镜的载物台上进行
③部位要完整；
④制片要正确，病部正背面、内外部、刮切兼顾， 要多取几个部位，多做几个切片观察；
⑤观察要仔细，注意光线的调节。
病害诊断注意事项
1、病害症状的复杂性
同一病原
不同病原
不同植物、或在 同一植物不同部位、 不同发育时期、不同 的环境条件。
不同植物、或在 同一植物不同部位、 不同发育时期、不同 的环境条件。
（1）常见病害诊断：症状鉴别（图2）—实验室检测—查阅 资料
（2）少见病害诊断：分离培养—接种—再分离 （柯赫氏证病律----Koch’s Rule)
①在病植物上常伴随有一种病原生物存在； ②该病原生物可在离体的或人工培养上分离纯化而得到纯
培养； ③将纯培养接种到相同品种的健株上，表现出相同症状的
病害； ④从接种发病的植物上再分离到纯培养，性状与原来的记