化学发光免疫分析所使用的标记物可分为三类: 1.发光免疫分析反应中直接参与发光反应的标记物; 2.以催化作用或能量传递参与发光反应的酶标记物; 3.以能量传递参与氧化反应的非酶标记物。
(一)直接参与发光反应的标记物这类标记物在化学结构上有产生发光的特殊基团,在发光免疫分析过程中直接参与发光反应,并没有本底发光。
最常用的标记物主要有吖啶酯类化合物。
吖啶酯类化合物发光是典型的瞬间发光,其化学发光分析时间很短,在加入氧化剂和pH纠正液后,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光,在1秒内光子散射达到高峰,整个过程在2秒内完成。
(二)以催化反应或能量传递参与发光的酶标记物在这类发光反应中,采用某些酶作为标记物。
这类标记物作为发光反应的催化剂或作为一种能量传递过程中的受体,其本身直接参与发光反应。
主要有两种酶: 1.辣根过氧化物酶(HRP) 2.碱性磷酸酶(ALP)(三)以能量传递参与氧化反应的非酶标记物这类标记物作为化学发光反应的催化剂或能量传递过程中的中间体(或受体),不直接参与化学发光反应。
最常用的有三联吡啶钌标记物。
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