液质联用各系统的操作注意事项 质谱系统的维护
一、质谱的系统结构示意图
质谱系统各部件介绍
离子化 传输 12..离毛子细毛C源管V细aopl管ti：la：l电agre产压y离压毛生F子细ra管g导m出入e口nt电通or 道，，并将将离产子C生源e碰onll撞e的i产sr能gio离y生n 子的在离电子场电的压子倍作EM增进V用电入下质进谱入，毛同细管 时隔离外部的常压与质谱内部的高真空
二、定量方法的开发
逻辑顺序：
MS2 Scan
1.全扫描scan,确认 得到化合物离子质量 数
MS2 SIM
2.选择离子模式，优 化毛细管出口电压 (fragmentor),保证 母离子的传输效率
Product Ion Scan
3.子离子扫描，使用 优化好的 fragmentor,选择定 量离子，优化碰撞能 量，优化子离子的响 应
3.离子光学组件：包括skimmer 1，八级杆以及Len 1和Len 2,进一
步除去溶剂和中性分子，高效的离子传输组件，聚焦随机运动
的离子进入四级杆。
4.四级杆MS1和MS2：质量过滤器，优化离子传输和质谱分辨 率，可以选择让某些质荷比的离子一次通过或者所有离子全 通过。
5.碰撞池：高压碰撞池，优化裂解，六级杆设计有助于捕获碎
动 相
过膜处理
1
2 缓冲盐的使用
•LC/MS中不能使用磷酸盐、 硼酸盐、硫酸盐、三氟乙 酸、三乙胺，易残留，会 形成强离子对，产生离子
抑制，降低灵敏度
•溶剂的截止波长：乙腈 /190nm,甲醇/210nm, 水/190nm.一般分析时样 品检测波长应至少大于所 用溶剂的截止波长20nm 以上，否则背景较高。
四、故障排除
信号低
质量准确度差
雾化器出口是小 液滴而不喷雾
无液流
1.检查溶液化学性质，确 定样品溶剂是合适的
2.保证用新样品，并且正 确存储样品
3.检查雾化器条件
4.清洁毛细管入口
5.检查毛细管有无损坏和 污染
1.重新校正质量轴
2.确定调谐用离子，估计 样品离子的质量范围并显 示强稳定的信号
1.确保雾化气压设定 足够高以利液相色谱 流动相气化
2.清洗电喷雾雾化室 将仪器设置为standby,待离子源温度冷却后，用50%异
丙醇-水溶液浸湿无尘布，擦拭弧形电极和喷雾挡盖以 及周围。（切禁直接对着毛细管末端冲洗，压力会增 大，造成涡轮泵负载急剧增加，容易损坏涡轮泵）
四、质谱系统的日常维护及故障排除
3.打开气镇阀 必须每周逆时针拧开气镇阀到底，维持20-30min，把油 气分离器内多余的泵油放回泵内，然后顺时拧紧，关闭 气镇阀。关机前务必确认气镇阀处于关闭状态，否则泵 油可能因此回流到质谱的真空腔内，损坏仪器
过程：混合样品通过液相色谱系统进样，由色谱柱分离，从色谱 仪流出的被分离组分依次通过接口进入MS仪的离子源处被离子 化，然后离子被聚焦于质量分析器中，根据质荷比而分离，分离 后的离子信号转变为电信号，传送至数据处理系统，对样品进行 定性定量分析。
主要内容
质谱系统的结构介绍（ESI、库伦爆炸） 定量方法的开发
片离子
6.检测器：包括高能打拿级和电子倍增器，增强信号，高增益
ESI离子源的原理
ESI将溶液中的离子转变为气相离子三大步骤：
211...反在直喷吹角雾干喷毛燥细雾管系离尖统子端，产源生加设带速计电喷雾，滴雾大的大溶减剂少挥了发未，离减子少化溶的剂中簇性和液流滴动进
特 点
相2入.通的质过附谱溶加剂中蒸离，发子降和，雾低滴在噪分s音裂ta使，n带d保b电证y雾状滴毛态变细小时管，，这和仍一离过维子程持反光一复路进定更行的，干干直净至燥，生气成抗温很污小 度的3染.由带和很电流小雾量带滴电，雾避滴免产生空气气相吸离子入质谱真空系统，极大的减少了污染
正
负
适用于碱性样品，可用乙酸或
离
正离子
甲酸对样品甲乙酸化。样品中
子 模
模式
含有仲氨或叔氨时可优先考虑 使用正离子模式（如磺胺类、
式
喹诺酮类物质）
选
择
的
适合于酸性样品，可用氨水对
一
样品进行碱化，样品中含有较
般
负离子
多的强负电性基团，如含氯、
原
模式
含溴和多个羟基时可尝试使用
则
负离子模式（如氯霉素）
：
四、质谱系统的日常维护及故障排除 维护周期
MRM
4多重反应监测MRM 定量，使用已优化好 的fragmentor,优化 每个子离子的碰撞能
1.MS2 Scan 确定待测物的分子离子
2.MS2 SIM
优化待测物的fragmentor
3. Product Ion Scan
确定定性定量离子
4. MRM
优化子离子碰撞能
三、液质操作系统的注意事项
3
和键合相的坍塌。（特殊柱子除外，如T3柱， 因具有三相键合相，所以高耐水性，用于分
析丙酸、EDTA、三聚氰胺等）
三、液质操作系统的注意事项
紫外检测器 UV
检
测
质谱检测器 MS
器
的
选
择
二极管阵列 检测器DAD
示差检测器 D
荧光检测器 FLD
蒸发光散色 检测器ELSD
三、液质操作系统的注意事项
库伦爆炸
原理：带有被测物质离子的流动相在雾化针尖端发生雾化， 液滴表面富集带同种电荷的离子，内部带相反电荷聚集， 形成带电液滴细的喷雾，在电场的作用下，飞向毛细管。 加热的氮气干燥气体反向流动，带走液滴中的中性溶剂分 子，从而收缩液滴，直至排斥的静电力超过液滴表面张力， 引起库伦爆炸，过程不断重复，待分析物离子最终变成气 态进入毛细管。
四、质谱系统的日常维护及故障排除
1.冲洗雾化气组件
样品运行结束后，可以使用90%乙腈/10%水,把质谱 设置on,冲洗三分钟，可以有效除去雾化器以及质谱 切换阀内痕量的样品残留。
当雾化器较脏时，可取下雾化器，使用合适的，可 以充分溶解可能的样品残留的溶剂超声（雾化器尖 端不可接触到容器壁）
四、质谱系统的日常维护及故障排除
不能使用的溶
剂添加剂
3
4 溶剂截止波长
三、液质操作系统的注意事项
反
1
色谱柱根据键合相的不同可分为氨基柱、C8、 C18、C30柱等等
相
色
谱 柱
色谱柱使用完要冲洗，特别是使用缓冲盐分
2
析样品时，原则上用于冲洗的流动相中水的 比例应该等于或高于分析时所用流动相中水
的比例。
严禁用纯水冲洗柱子，易造成固定相的流失
•流动相以及样品必须过膜 （有机滤膜、水系膜）
•反相常用流动相为甲醇、 乙腈、水以及缓冲盐溶液。
流
•流动相应超声脱气 10~20min,否则压力易 波动（装有在线脱气机， 影响会小一些）
•流动相每两天至少更换
•注意：LC中常采用无机缓冲
盐，LC/MS中则应该使用挥 发性的缓冲盐，如甲酸铵、 乙酸铵；或挥发性酸碱甲酸、 乙酸、氨水等调节pH
2.检查雾化器中针头 的位置
3停止溶剂流动，卸 下雾化装置，检查雾 化器末端是否损坏
1.确保LC 在工作， 在正确的瓶中有足够 溶剂
2.检查LC 故障提示
3.检查阻塞情况
4.修理或更换任何阻 塞部件
5检查是否存在渗漏
6.保证MS
气流选择器设定在与 液相色谱仪联通的位 置
Q&A
LDD
高效液相色谱质谱联用（HPLC/MS）是指高效液 相色谱与质谱串联的技术，是将应用范围极广的 高效液相分离方法与灵敏、专属、能够提供分子 量和结构信息的质谱法结合起来的一种现代分析
技术。
HPLC-MS主要由HPLC仪、接口离子源（LC与MS连接装置）、 质量分析器、真空系统、计算机数据处理系统组成。