临床科研设计和方法
从一篇SCI文章中透视其科研设计
熊清芳
立题
题目：简明、具体、新颖、醒目、能高度概括 整个研究内容。 题目的内容反映出研究因素、研究对象及试验效 应这三个主要环节及它们之间的联系。 Role of the Coinhibitory Receptor Cytotoxic T Lymphocyte Antigen-4 on Apoptosis-Prone CD8 T Cells in Persistent Hepatitis B Virus Infection
胰岛素的发现
班廷是加拿大的一位外科医生。童年时他的一 位朋友因患糖尿病而死去，使他对糖尿病有很 深的感受，以后一直试图找到医治糖尿病的方 法。１９２０年，他偶然在一本外科杂志上看 到一篇文章，报导结扎胰导管可以使分泌胰酶 的细胞萎缩，而胰岛细胞却不受影响。这篇文 章给了班廷很大启发，他在笔记本上写道： “结扎狗的胰导管。等候６到８个星期使胰腺 萎缩。然后切下胰腺进行抽提。” ，大胆尝 试后。１９２２年，胰岛素在临床上应用。班 廷由于这一贡献获得了诺贝尔奖金。
医学科研的程序
基本步骤有 5个阶段 1. 科研选题 2. 科研设计 3. 实施方法 4. 统计分析 5. 总结归纳
1.科研选题
选题是确定所要探索的题目，是科研 的起点，也是关系到科研成败和成 果大小的关键性问题 .
基本程序
提出问题
文献评估
假设形成
立项
选题Leabharlann 题意来自： （1）直觉引起的预想 —“一闪念” （2）既往的实际经验 （3）从书籍、文献或别人的经验中获 得启示
选题
1、选题要小，开掘要深；不要题目 很大，内容却很单薄。
2、“选题新、方法新、资料新” 3、“新题新做”和“小题大做”
选题应遵循的原则
1 、创新性原则 2 、科学性原则 3 、可行性原则 4 、效益性原则 5 、需要性原则
文献检索
围绕以下5个问题： （1） 有助于认识本课题意义的文献 （2） 有关本课题的既往研究工作 （3） 本课题研究的现状 （4） 可供借鉴的方法 （5） 关于本课题的不同见解与争论，特别 是与自己假设相反的见解及工作。
CTLA-4 还可促进T细胞分泌TGF-β，下调T细胞的 反应性和细胞因子的分泌，抑制 IL-2R 基因表 达，减少细胞分泌 IL-2 ，介导不依赖 Fas途径的 T细胞凋亡，从而在 T细胞应答过程中起负性调 节作用。
CD8 T与CHB关系
CD8 T cells 有清除HBV的作用；在 CHB患者中显著下降。 （背景） CHB治疗以抑制病毒为主，并有费 用高、耐药、毒性等缺点。 因此以 减少T耐受，从而达到持久的抗病 毒的免疫治疗是非常重要的。（ 背 景）
HBV特异性T细胞与协同抑制信号关系
We postulate that in this setting,virus-specific T cells are driven towards apoptosis by persistent high-dose antigen with insufficient costimulatory signals, outweighed by an excess of coinhibitory signals.
肝脏T细胞凋亡与Bim关系
We hypothesize that the proapoptotic defects in these hepatotropic viral infections are imposed by the tolerogenic liver environment they target. This is line with recent data showing that the premature death of T cells primed in the liver is Bim-dependent.
HBV特异性T细胞与PD-1关系
One such coinhibitory signal is mediated through the PD-1 pathway, which has been shown to be critical for engendering intrahepatic tolerance and to contribute to the failure of the T-cell response in CHB. Blockade of the PD-1 pathway only results in a partial recovery of some HBV CD8 specificities in a proportion of patients with CHB, implicating a role for additional mediators.
CTLA一4作用模式图
CTLA一4 在非T淋巴细胞如NK细胞、巨噬细 胞、肝细胞及脑细胞上几乎不表达
CTLA一4作用模式图
CD28与B7分子结合，可以使 IL-2mRNA 增加，促 进T细胞活化和增殖，上调免疫反应。
CTLA-4 与B7结合后抑制 T细胞的增殖与活化，使 细胞周期停滞在 G0／G1期，不向S期发展。
Bim研究基础和CHB关系
We have identified Bim mediated apoptosis as a key mechanism resulting in the depletion of HBV-specific CD8 T cell responses in CHB. Interruption of this pathway reconstituted multispecific CD8 T-cell responses against HBV, confirming its functional relevance. （前 期工作） Virus-specific CD8 T cells have also been shown to be highly prone to apoptosis in patients with HCV infection. （相关研究）