荧光抗体染色的幽门螺杆 菌
细菌形态学检查
直接镜检 ▲电子显微镜检查：实验室研究，临床罕用。
肺炎链球菌 及其荚膜 （透射）电镜
透射电镜
黏附于巨噬 细胞表面的 钩端螺旋体 （扫描）电镜
细菌形态学检查
染色镜检：常用革兰染色法（Gram staining），结核标 本常用抗酸染色法（acid-fast staining）。
疫苗种类：目前使用的有全菌死疫苗、减毒活疫苗 、基因 工ห้องสมุดไป่ตู้疫苗、类毒素疫苗。
人工被动免疫：主要是抗毒素 (外毒素中和抗体)。免疫力 出现快但维持时间短。抗毒素是动物血清，使用前做皮试 防止发生过敏反应。
抗生素治疗：青霉素类、头孢菌素类、大环内酯类、喹诺 酮类、四环素类等。细菌对抗生素可产生耐药性，临床使 用抗生素时应遵守如下原则：①选择敏感抗生素；②剂量 和疗程合适；③长期使用时交替用药；④联合用药。
直接抗体检测：凝集试验、沉淀试验等。 标记抗体检测：如荧光素、HRP等酶、胶体金、化学发光
物标记抗体检测，常用方法为免疫荧光法、免疫酶法（如 夹心ELISA）、免疫层析法、化学发光免疫法等。 免疫学检测方法不能获得活菌。
分子生物学检测方法：PCR和RT-PCR
多聚酶链式反应 (polymerase chain reaction，PCR)：提取 细菌标本总DNA或RNA为模板，采用16 S RNA基因等特 异性引物及PCR或RT-PCR扩增细菌DNA或RNA，反应产 物用溴乙锭染色的琼脂糖凝胶电泳观察，目前多采用封闭 式实时荧光定量PCR或RT-PCR检测。
标本必须新鲜，采集后尽早送检。除脑膜炎球菌等少数不 耐寒细菌需保温外，多数细菌标本均需冷藏送检。
检测特异性抗体时尽量采取急性期与恢复期双份血清。第 一份尽可能在发病后立即采取，第二份在发病后1～3周采 取。血清标本4℃或-20℃保存，试验前血清标本56℃水浴 30分钟灭活补体。
细菌感染实验室诊断的基本流程
A：均匀浑浊生长；B：表 面生长；C：沉淀生长
菌落
培养基的用途与药物敏感试验
液体培养基：增菌。 固体培养基：纯化，增菌。 半固体培养基：保种，动力检测。
药物敏感试验 选择敏感抗生素。常用纸片扩
散法、二倍液体或平皿 稀释法。
无动力
有动力
免疫学方法：检测细菌及其抗原
根据抗原和抗体特异性结合的原理，利用已知抗体检测未 知细菌及其抗原。
双份血清：第二份血清标本(多为恢复期)中抗体效价较第 一份血清(多为急性期) 升高4倍及以上有诊断价值。
单份血清：根据该病效价判断标准进行判定。 IgM出现早、消失快，常用于血清学早期诊断。 常用方法：直接或间接凝集试验、ELISA、中和试验等。
细菌感染的防治原则
人工主动免疫：接种疫苗，是预防传染病常用方法，免疫 力出现慢但维持时间长。
PCR或RT-PCR优点与缺点：优点是快速、简便、敏感、 特异，缺点是不能获得活菌。
核酸杂交和芯片常用于实验室研究，临床罕用。
血清学检查与诊断
病原菌感染可刺激机体产生特异性血清抗体，抗体水平可 随感染过程逐渐升高。用已知细菌抗原检测血清中特异抗 体及其效价，称为血清学检查(serological examination)， 可作为某些感染性疾病诊断或辅助诊断方法。
按物理状态分为：液体、固体(1.5-2.0%琼脂)、半固体(0.50.8%琼脂)培养基。
细菌在培养基中的生长情况
液体培养基：均匀混浊生长、表面生长、沉淀生长。
固体培养基：菌落、菌苔。采用分离划线接种法将细菌临 床标本接种于固体培养基上，经过培养后出现肉眼可见、 单个细菌分裂繁殖形成的细菌集落称为菌落(colony) 。
本章要点
细菌感染临床标本的采集与送检注意事项。 血清学检查或诊断原理及双份血清检测结果判断标准。 人工主动免疫和被动免疫差异及其主要生物制品。
G+ 葡萄球菌
G¯杆菌
抗酸阳性分枝杆菌
细菌分离培养
培养基(culture medium)：专供微生物生长繁殖使用的混合 营养物人工制品，按营养组成和用途可分为： ▲基础培养基(basic medium)：细菌所需基本营养成分。 ▲营养培养基(enrichment medium)：加血液、血清。 ▲选择培养基(selective medium)：加胆盐等选择剂。 ▲鉴别培养基(differential medium)：如双糖铁培养基。 ▲厌氧培养基(anaerobic medium)：加还原剂。
医学细菌学 Medical Bacteriology
第4章 细菌感染实验室诊断与防治原则
目录
1 病原学诊断 2 血清学诊断 3 细菌感染的防治原则
细菌感染标本的采集
采集标本时应注意无菌操作，尽量避免杂菌污染。
根据病程、细菌体内分布及排出途径的不同采集标本 。
使用抗生素之前采集标本。采集标本时不用消毒剂，必要 时可用生理盐水冲洗，擦干后取材。
细菌形态学检查
细菌形态学检查：直接镜检和染色镜检。 直接镜检
▲普通光学显微镜：分辨率为0.25 μm。一般细菌都大 于0.25 μm。用于少数特殊细菌标本检测。
脑脊液标本中性粒细 胞内脑膜炎奈瑟菌
暗视野显微 镜下螺旋体
细菌形态学检查
直接镜检 ▲荧光显微镜检查：荧光标记抗体染色后在荧光显微镜 下观察，若出现有发荧光的菌体就是待检的细菌，尤其适 用于有较多杂菌的标本。