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dna的凝胶电泳

电泳仪,电泳槽,紫外透射反射仪,移 液枪。 2. 试剂 实验15提取的DNA样品, TAE(三羟甲基氨基甲烷(Tris base)、 乙酸(acetic acid)和乙二胺四乙酸 (EDTA)组成的缓冲液),琼脂糖, loading buffer,maker(对照)。
四.实验步骤
6、电泳 安装好电极导线,点样孔一端接负极,另一端接 正极,打开电源,调电压至120V,电泳30min。 7、观察 取出凝胶,放在紫外灯下照相记录 电泳图谱。 五.实验结果与分析 对图谱拍照并分析。
实验16 DNA的电泳分析
一、实验目的 二、实验原理
学习和掌握琼脂糖电泳法鉴定DNA的原理和方法。 琼脂糖凝胶电泳是用于分离、鉴定和提纯DNA片段的标准 方法。琼脂糖是从琼脂中提取的一种多糖,具亲水性,但 不带电荷,是一种很好的电泳支持物。DNA在碱性条件下 带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。分子量越小跑 得越快,从而可以分离出分子量大小不同的DNA和RNA (RNA分子量较小,比DNA跑得快且呈弥散形)。本实验用 琼脂糖凝胶电泳分离DNA,其主要内容包括制胶,加样, 电泳,染色及拍照。
3、灌胶 待琼脂糖凝胶溶液冷却到60℃(手可接触),加入染料 (30mlTAE 加入1μ l染液),混匀。轻轻倒入电泳槽水平板 上。 4、插入梳子 5、加样 待琼脂糖凝胶干后 加入对照样品5μ l maker 将DNA样品与loading buffer按4:1混匀后(DNA 8μ l+loading buffer 2μ l),用微量移液器将混合液全部 加到点样孔中,记录样品的点样次序。 注意:点样时不要将样品点到点样孔之外(飘样),不 要将胶戳漏(漏样)。
1、安装电泳槽 将有机玻璃的电泳凝胶床洗净,晾干, 插入玻璃板将开口封好,放在水平的工 作台上。 2、琼脂糖凝胶的制备(一块凝胶) 将0.3g琼脂糖溶解于30ml缓冲液(TAE)中。 置微波炉(1min)或沸水浴中加热至完全溶化(不要加热至沸 腾),取出摇匀。 用移液枪取1ml热的琼脂糖凝胶将玻璃板的下缝堵住。
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