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01油镜的使用和细菌的简单染色法


率。

镜口角(即入射角)。
普通光学显微镜Ⅲ
油镜使用的原理
油镜,即油浸接物镜。当光 线由反光镜通过玻片与镜头 之间的空气时,由于空气与 玻片的密度不同,使光线受 到曲折,发生散射,降低了 视野的照明度。若中间的介 质是一层油(其折射率与玻 片的相近),则几乎不发生 折射,增加了视野的进光量, 从而使物象更加清晰。
5.观察完毕,取下标本片,立即用擦镜纸顺一 个方向旋转擦拭镜头上的油。若油已干,应 先用二甲苯滴在擦镜纸上擦净镜头,再用另 一干净擦镜纸拭去镜头上沾有的二甲苯;
6.显微镜擦净后,降低物镜并将其转成八字形, 集光器下降,光圈关上,关闭电源,罩上显 微镜罩
油镜使用注意事项
油镜的识别:油镜头上都有标记;标有100×;镜头 前端有黑、白或红色的圆圈;刻有“III”或Oil等,其 入光孔径也较其他物镜小;
普通光学显微镜Ⅱ
显微镜的放大倍数和分辨率
1.放大倍数=接物镜放大倍数×接目 镜放大倍数
2. 显微镜的分辨率 是表示显微镜
辨析物体(两端)两点之间距离的
能力,可用公式表示为:
D=λ/2n·sin(α/2 )
式中D:物镜分辨出物体两点间的
最短距离。
:可见光的波长(平均0.55m)
n: 物镜和被检标本间介质的折射
常用作简单染色的染料有美蓝、结晶紫、石炭酸复红等。
实验材料
菌种 产气杆菌营养琼脂斜面培养物; 金黄色葡萄球菌营养琼脂斜面培养物
试剂 结晶紫染液、石炭酸复红染液、香柏油、二甲苯、无菌 水
仪器及其它 显微镜、酒精灯,载玻片,接种环,擦镜纸等。
实验流程
制备细菌染色装片
油镜观察
实验步骤
1、 用简单染色法制备细菌染色装片 涂片→干燥→固定→染色→水洗→干燥
油镜的使用方法
1.用油镜时,勿将镜臂弯曲倾斜,以免油滴或 菌液流淌外溢,影响观察造成污染。
2.用低倍镜对光,同时调节集光器和光圈以获 得最适亮度。染色标本油镜检查时,应将光 圈完全打开,集光器上升至载物台相平,使 光亮度很强。
3.标本片放在载物台上,用压片夹固定。
4.低倍镜找出标本的范围,然后在待检部位上 加一滴香柏油,转动镜头转换器,将油镜头置 于工作位置,从侧面观察并缓慢转动粗调节器, 使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻 片时停止转动,然后眼睛移至目镜,缓慢向上 移动粗调节器,待看到模糊物象时,再用细调 节器转动至物象完全清晰为止;
实验一 油镜的使用和细菌的简单染色方法
目的
1、了解油镜的基本原理,掌握油镜的使用方法 2、掌握细菌的简单染色方法及原理示意图
光线从标本玻片经空气 进入镜头时,由于介质 密度不同而发生折射现 象,因此进入物镜中的 光线很少,结果视野很 暗,物像不清晰。如在 玻片上加上折光率和玻 片(n=1.52)相近的香 柏油(n=1.515),就可 避免光线的分散,加强 视野的亮度,获得清晰 的物像
2 使用油镜观察细菌染色装片 低倍镜 高倍镜 油镜
实验结果
绘图
问题与思考 油镜的使用就注意哪些问题?
普通光学显微镜Ⅰ
显微镜的构造
1.光学部分:接目镜 、 接
物镜 、 照明装置(聚光镜、 虹彩光圈、 反光镜等). 它使 检视物放大,造成物象.
2.机械部分:镜座、镜臂、
镜筒、物镜转换器、载物台、 载物台转移器、粗调节器、细 调节器等部件.它起着支持 调 节 固定等作用.
油镜头使用后应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。注意 在擦拭时,要求顺一个方向旋转擦,不能两个方向来 回擦;
取送显微镜时,应右手持镜臂,左手托镜座,平端于 胸前。
不用时,将接物镜转开呈“八”字状,集光器下降, 罩上镜罩。对号归位。
原理
细菌简单染色法的原理
细菌的细胞小而透明,在普通的光学显微镜下不易识别,必须对 它们进行染色。利用单一染料对细菌进行染色,使经染色后的菌体与 背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。此法操 作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。
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