药物名称 漂白粉
红汞 过锰酸钾 甲醛 乳酸 氢氧化钾 肥皂
浓度(%) 0.2～2.5
2 0.1～0.2 0.2 0.5
2 2
生存时间 2分钟以内 7分钟 7～15分钟 20分钟以上 1分钟以内 3分钟 20分钟以上
主要化学药品对三型菌的影响
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化学药品名称
浓度 布鲁氏菌生存时间(分钟)
涂片染色检查多为单个排列，少见成对 短链排列。
布鲁氏菌可被碱性染料着色； 革兰染色阴性； 柯兹罗夫斯基提出用0.5%沙黄水溶液染
色，加热出现气泡，水洗后用0.5%孔雀 绿或1%美兰复染，布鲁氏菌呈红色，其 它细菌呈绿色和兰色。
布鲁氏菌：
革兰阴性， 长约0.6-1.5μm, 宽约0.3-0.6μm, 用柯氏染色染成红 色,无鞭毛、不形成 芽胞和荚膜。
1、形 态
布鲁氏菌是一组微小的球状、球杆状、短 杆状细菌；
宽约0.3—0.5微米、长0.6—1.5微米。电 镜下见到的羊种菌为明显的球杆状、牛种 菌和猪种菌为短杆状；
6种布鲁氏菌靠形态很难区分，一般来说， 羊种菌最小，牛种菌产次之，猪种菌较大；
布鲁氏菌没有鞭毛，不形成芽胞和夹膜。
2、染 色
（4） 细菌变异
布氏菌在各种理化因素作用下易发生变异; 即从光滑型（S）变为非光滑型——粗糙(R)
或粘液(M)状。 变异菌落常比光滑型稍长，表面有颗粒。
菌落颜色为灰白色或褐色，
（5） 抵抗力
布氏菌在合适条件下能生存很长时间，有 较高的抗灭活能力。
对湿热、紫外线和各种射线以及常用的消 毒剂、抗生素、化学药物比较敏感；
布鲁氏菌的发展史
年份
菌名
发现人
国家
宿主
1887 1897 1914羊种来自 牛种菌 猪种菌Bruce
马尔他
羊
Bang
丹麦
牛
Traun
美国
猪
1953
绵羊附睾种菌
Buadle
新西兰
公绵羊
1956 1966
沙漠森林鼠种菌 犬种菌
Stoennen Carmichael
美国 美国
沙漠森林野鼠 小猎犬
（一）病原学概述
3、培养特性
1.布鲁氏菌培养营养要求高：
需要各种氨基酸和各种金属离子，有的菌种需 要血清才能生长。
2.生长缓慢：一般需经4—6天，有的甚至21—30
天才能长出菌落。 3.生长所需温度：20—40℃，最适为37℃,超过 42℃则不生长。
4. C02: 绵羊附睾种菌和牛种菌的某些生物型菌需严格
的C02(5～10％)。
布鲁氏菌病原学、血清学诊断
疾病预防控制中心
主要内容：
1、布鲁氏菌病原学； 2、布鲁氏菌诊断标准； 3、布鲁氏菌血清学实验的几种方法。
（一）布氏菌概述
1887年英国医生布鲁氏首先从死于“马尔他热”的英 国士兵脾脏中分离出羊种布氏菌后，布鲁氏菌属 （Brucella)，包括6个种19个生物型。 羊种布氏菌（Br melitensis) 牛种布氏菌（Br abortus) 猪种布氏菌（Br suis) 沙漠森林野鼠种布氏菌（Br neotomae) 绵羊附睾种布氏菌（Br ovis) 犬种布氏菌（Br canis)
生存时间（天） 25—65 21—90 14—47 20—45 60—318 120 死亡 20—50
(1)对物理因子的抵抗力
物理因子对布氏菌的影响
物理因子 湿热56℃ 湿热63℃ 湿热80℃ 湿热90℃ 湿热100℃
生存时间 60分钟以上 60分钟以上 30分钟以上 10分钟以上 半分钟死亡
物理因子 干热80℃ 干热90℃ 干热100℃ 直射阳光 散射阳光
布鲁氏菌属（Brucella) 包括6个种19个生物型。
牛种布氏菌（Br abortus) ： 1、2、3、4、5、6、7、9型 羊种布氏菌（Br melitensis) ：1、2、3型 猪种布氏菌（Br suis) ： 1、2、3、4、5型 沙漠森林野鼠种布氏菌（Br neotomae) 绵羊附睾种布氏菌（Br ovis) 犬种布氏菌 （Br canis)
（二）布鲁氏菌分离培养
采用何种方法、 取何种材料、 何种培养基 实验室条件
布氏菌的分离培养
一、从可疑病人分离布氏菌 血培养： 30天未培养出菌，可定位阴性 。 骨髓培养：抽取骨髓（接种双相培养基） 尿培养： 其他病原材料培养:乳、脑脊液、关节液
和滑囊液分离布氏菌，参照血培养观察 结果，15天不长菌定为阴性
出菌材料有血液、关节液、滑囊液、骨髓、脑髓液、胸 液、淋巴结、乳汁、脓汁、胆汁、尿、阴道分泌物、等 20余种。
由于取材难易等原因，人多由血液、关节液、滑囊液、 骨髓出菌；羊多由流产羔、胎盘、死羔检出菌；牛多由 流产犊、乳汁检出菌；猪多由流产仔猪、胎盘出菌。
二、从牲畜材料中分离布氏菌
从牲畜流产羔检菌：

从胎衣检菌：

从阴道分泌物检菌：

尿液检菌：

乳汁检菌：

脓汁检菌：

血液培养：

脏器检菌：
我国出菌宿主及材料
我国从人、羊、牛、猪、犬、鹿、马、骆驼等家畜及黄 羊、岩羊、黄鼠、黄胸鼠等野生动物检出布氏菌。从牧 区水塘水和羊毛中也检出过布氏菌。
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(%) 羊型 牛型 猪型
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石碳酸
1
≤5 ≤3 ≤5
石碳酸
2
1
2
1
来苏儿
2
≤3 ≤1 ≤3
来苏儿
3
瞬间 瞬间 瞬间
漂白粉澄清液
0.2
1-2 瞬间 瞬间
漂白粉乳剂
2.5
1-2 瞬间 瞬间
肥皂水
2
≥20 ≥20 ≥20
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生存时间 60分钟以上 60分钟以上 7分钟以上 1～4小时 7～8天
(2)对化学因子的抵抗力
化学因子对布氏菌的影响
药物名称 新洁尔灭 石炭酸 来苏儿 来苏儿 氯亚明 氯亚明 升汞
浓度(%) 0.1 1～2 2 3 0.2 0.5 0.05
生存时间 30秒钟 1～5分钟 1～3分钟 1分钟以内 5～7分钟 3～5分钟 1分钟以内
对低温和干燥有较强的抵抗力，故可用冷 冻真空干燥法保存菌种。
布氏菌在自然条件下的生存能力
自然条件 水 尘 粪 畜舍墙棚 地面 衣服 皮毛 鲜牛乳
生存时间（天） 50—120 4—120 21—72 4—150 4—150 30—80 45—120 2—550
自然条件 奶油 奶酪 冻肉 腌肉 培养基 干燥胎膜 腐败脏器 人工胃液