（３） 作用：㊀ 携带外源 ＤＮＡ 片段进入受体细胞㊀ ㊂
其他：㊀ λ 噬菌体的衍生物㊀ ㊁动植物病毒
上随染色体 ＤＮＡ 进行同步复制㊂ １． 获取目的基因
（４） 特点：可在细胞中进行自我复制或整合到染色体 ＤＮＡ
二㊁基因工程的操作程序
{
识别序列中心轴线处切开ң㊀ 平末端㊀
调控作用的因子㊂
（１） 目的基因：主要指㊀ 编码蛋白质ＮＡ 反转录㊀ 合成 （２） 方法 í ï合成 通过㊀ ＤＮＡ 合成仪㊀ 用化学方法人工合成 ï利用 ＰＣＲ 技术扩增 î
㊀ ㊀ 一 ㊁ＰＣＲ 技术
考点 ２㊀ ＰＣＲ 技术及基因工程的应用
１． 原理：ＤＮＡ 双链复制㊂ ２．ＰＣＲ 反应过程
说明 当体 系 温 度 上 升到 ９０ ħ 以上 解聚为单链
பைடு நூலகம்
聚合酶链式反应
１． 动物基因工程与植物基因工程的应用实例
二㊁基因工程的应用与蛋白质工程
琼脂糖凝胶电泳技术㊂
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反 转 录㊁ 基因工程
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过程
图解
产量； 用于改善畜产品品质； 用转基因动物生产药物； 用转基因 动物作器官移植的㊀ 供体㊀ 等㊂ ２． 基因诊断与基因治疗 （２） 基因治疗 和抗逆转基因植物；利用转基因改良植物的㊀ 品质㊀ ㊂ 来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体㊂ 发挥功能，从而达到治疗疾病的目的㊂ （２） 植物基因工程： 培育抗虫转基因植物㊁ 抗病转基因植物 （１） 基因诊断：又称为 ＤＮＡ 诊断， 是采用 ㊀ 基因检测 ㊀ 的方法 ①概念： 把 ㊀ 正常基因 ㊀ 导入病人体内， 使该基因的表达产物 ②成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入取自患者的淋巴细胞中，
获取目的基因 ң 构建表达载 体ң导入受体细胞 ң 得到转 基因生物 ң 目的基因检测与 鉴定
与终止子的调控， 所以目的基因应插入启动子与终止子之间的 部位㊂ ４． 启动子ʂ起始密码子，终止子ʂ终止密码子 （１） 启动子在 ＤＮＡ 分子中，而起始密码子在 ｍＲＮＡ 中㊂ （２） 终止子在 ＤＮＡ 分子中，而终止密码子在 ｍＲＮＡ 中㊂ ㊀ 据图所示，有关工具酶功能的叙述不正确的是
体外 基因治疗
延伸
链 由 ５ᶄ 端 向 ３ᶄ
ң 体外完成 ㊀ 基因转移 ㊀ ，再 输回患者体内
从病人体内获得某种细胞，在
㊀ ㊀ ３．ＰＣＲ 技术操作的一般过程 （１） 配制 ＰＣＲ 反应体系
１０ˑ 扩增缓冲液 引物（ 终浓度） 模板 ＤＮＡ
２＋
③类型
体内
基因治疗 转移基因
ң
直接向人体 ㊀ 组织细胞 ㊀ 中
可使用能切出相同末端的不同限制酶） ， 目的是产生相同的黏性 末端或平末端㊂ 不起作用，具有自身保护的特点㊂
１－１㊀ 下列物质或过程不影响磷酸二酯键数目变化的是
如果仅将基因用限制酶从 ＤＮＡ 片段中切割下来，没有经过对
㊀ ㊀ Ａ． 限制性核酸内切酶可以切断 ａ 处 Ｂ．ＤＮＡ 聚合酶可以连接 ａ 处 Ｃ． 解旋酶可以使 ｂ 处解开 思路导引㊀ Ｄ．ＤＮＡ 连接酶可以连接 ｃ 处
思 路 分析题图，确定字母所代表的含义 接酶及解旋酶的作用位置
据蛋白质的氨基酸序列先合成 ｍＲＮＡ， 再合成目的基因㊂ 如果 合成时 ｍＲＮＡ 或氨基酸序列没有经过改造，则为基因工程； 如果 ｍＲＮＡ 或氨基酸序列经过了改造㊁ｍＲＮＡ 或氨基酸序列是根据 蛋白质预期的功能人工设计的，则为蛋白质工程㊂ ③根据合成的蛋白质种类 如果合成的蛋白质是天然蛋白质， 则是基因工程； 如果合成
专题 ２６㊀ 基因工程
㊀１
第十一单元 ㊀ 现代生物科技专题
专题 ２６㊀ 基因工程
对应学生用书起始页码 Ｐ２８４
考点 １㊀ 基因工程的工具与操作程序
㊀ ㊀ 一 ㊁基因工程的工具 １． 限制酶 （１） 存在：主要是㊀ 原核生物㊀ 中㊂
㊀ ㊀ （２） 种类
{
最常用：㊀ 质粒㊀
一条链中特定部位的两个核苷酸之间的㊀ 磷酸二酯键㊀ 断开㊂ （３） 的类型
比较法分析基因工程的相关概念
续表 名称 ＤＮＡ 作用 在脱氧核苷 酸链上添加 单个脱氧核 苷酸㊀ 使碱基间氢 键断裂 碱基间氢键 磷酸二酯键 形 成 新 的 ＤＮＡ 分子 ＤＮＡ 复制 作用部位 作用结果 参与过程
参与过程
基因工程
������������������������������������������������������
聚合酶
解旋酶
形成脱氧核 苷酸链
连接酶
ＤＮＡ 复制
专题 ２６㊀ 基因工程
续表 名称 反转 录酶 作用 以 ＲＮＡ 为 模 板合成 ＤＮＡ 作用部位 磷酸二酯键 作用结果 形 成 新 的 ＤＮＡ 分子 参与过程
㊀３
接物，导入受体细胞后，可利用抗性基因的差异进行筛选㊂ 酸内切酶的作用是相反的，二者的关系可用下图表示：
（１） 原核生物的限制酶不切割自身 ＤＮＡ 的原因是： 原核生
常用方法 ㊀ 农杆菌转化法㊀ 受体细胞 体细胞㊁受精卵等
㊀ ㊀ ４． 目的基因的检测与鉴定
个限制酶切点；具有标记基因㊂
（１） 条件：能在受体细胞中复制并稳定保存； 具有一个至多
㊀２
５ 年高考 ３ 年模拟㊀ Ｂ 版（ 教师用书）
（３） ＰＣＲ 产物的检测
来源 特点 相 同 点
（３） 构建过程
只 缝合 ㊀ 黏性㊀ 末端
都 缝合 磷酸二酯键，如图：
㊀ ㊀ ３． 限制酶与 ＤＮＡ 连接酶的关系
３． 将目的基因导入受体细胞
植物细胞 动物细胞 ㊀ 显微注射法㊀ ㊀ 受精卵㊀ 微生物细胞 ㊀ 转化法㊀ 原核细胞
生物种类
物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰㊂ ４． 分子运输车 （２） ＤＮＡ 连接酶起作用时不需要模板㊂ 载体
明确限制酶㊁ＤＮＡ 聚合酶㊁ＤＮＡ 连
够识别双链 ＤＮＡ 分子的某种特定的核苷酸序列， 并且使每一条 ＤＮＡ 聚合酶可将游离的单个脱氧核苷酸加到正在合成的 ＤＮＡ 子链上，使之形成磷酸二酯键，Ｂ 项正确；ｂ 处表示氢键， 解旋酶 可以使氢键断开，Ｃ 项正确； ＤＮＡ 连接酶能将两个 ＤＮＡ 片段连 接起来，使它们之间形成磷酸二酯键， 而 ｃ 处为一个脱氧核苷酸 中的普通磷酸键，Ｄ 项错误㊂ 答案㊀ Ｄ
㊀ ㊀ （２） 二者的判断方法
①根据对基因的操作方法
编码蛋白序列进行修饰㊁加工，或仅对其调控序列进行加工，则属于 基因工程；如果将目的基因经过了一些实质性的改造，如对编码蛋 白序列进行了碱基对替换或增添或去除，则属于蛋白质工程㊂ ②根据目的基因的合成方式 基因工程和蛋白质工程都可以反转录合成目的基因， 或根
３． 目的基因的插入位点不是随意的㊂ 基因表达需要启动子
定向改造或 生 产 人 类 所 需 蛋白质 生产自然界没有的蛋白质
定向改造生物的遗传特性，以 获得人类所需的生物类型或生 物产品（ 基因的异体表达）
（㊀ ㊀ ）
生产自然界中已有的蛋白质
蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因 工程，因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质， 必须通 过基因修饰或基因合成实现
４ 种 ｄＮＴＰ 混合物（ 终浓度）
各 １００ ２５０ μｍｏｌ ／ Ｌ 各 ５ ２０ μｍｏｌ ／ Ｌ ０．１ ２ μｇ ５ １０ Ｕ １００ μＬ
１０ μＬ
３． 蛋白质工程
（１） 蛋白质工程的概念
ＴａｑＤＮＡ 聚合酶 Ｍｇ （ 终浓度） 补加双蒸水
１ ３ ｍｍｏｌ ／ Ｌ
基础 蛋白质分子的㊀ 结构规律㊀ 及其与 ㊀ ң ㊀ ㊀ ㊀ 生物功能㊀ 的关系 概 手段 ㊀ ㊀㊀ ㊀ ң ㊀ 基因修饰㊀ 或㊀ 基因合成㊀ 念 ㊀ ㊀ 目的 ㊀ ң 合成满足人类生产和生活需求的㊀ 蛋白质㊀
（２） 作用：㊀ 识别双链 ＤＮＡ 分子的某种特定核苷酸序列㊀ ，并使每 形成末端 识别序列中心轴线两侧切开ң㊀ 黏性末端㊀
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键，而不是两条链之间互补配对碱基之间的氢键， 它与限制性核
（５） ＤＮＡ 连接酶连接的是磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯