化学药品资料项目编号：3.1-21盐酸帕洛诺司琼注射液申报临床技术资料特殊安全性试验资料及文献资料研究机构:研究机构地址:研究机构电话:研究机构主要研究者姓名(签名):试验者姓名:试验起止日期:从年月至年月原始资料保存地点:联系人姓名、电话:×××制药股份有限公司目录21-1摘要21-2全身过敏性试验21-3血管刺激性试验21-4溶血试验21-5豚鼠皮肤过敏性试验21-6单次给药的血管刺激性试验21-7家兔皮肤刺激性试验21-8体外人血溶血性试验21-9光毒性试验21-10结论21-11参考文献21-1摘要豚鼠隔日每只腹腔注射盐酸帕洛诺司琼注射液（3μg/ml和15μg/ml,分别相当于30μg/kg和150μg/kg）1ml/100g，共5次。
分别于末次给药后第12天前肢静脉注射盐酸帕洛诺司琼注射液（15μg /ml、50μg/ml）2ml进行攻击，结果均未出现任何过敏反应症状，反应级数0级，表明盐酸帕洛诺司琼注射液全身过敏性试验合格。
浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液无溶血作用，检查结果符合注射用安全性要求。
家兔耳缘静脉缓慢注射浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液5ml，连续三天，耳部组织外观无异常，病理组织检查无组织变性或坏死等刺激反应。
皮肤过敏试验表明通过豚鼠皮肤给予10mg/kg RS-25258-007（帕洛诺司琼的自由基）的制剂不会引起豚鼠过敏。
家兔右耳静脉单次注射帕洛诺司琼 10mg/kg，在接触药物10、30和60分钟后处死动物作大体检查，帕洛诺司琼或溶剂在任何注射静脉均未引起大体或显微变化。
家兔经皮24小时接触含RS-25258-007（自由基）的制剂，结果给予5或10mg/ml RS-25258-007制剂后，给药部位未观察到任何变化。
3只家兔中的1只在接触20mg/ml RS-25258-007的24和48小时出现轻微的红斑。
因此，20mg/ml浓度的RS-25259-007对家兔皮肤有轻至中度刺激。
采用10mg/ml的帕洛诺司琼制剂进行体外人全血相容性和血浆相容性试验。
帕洛诺司琼对从全血中制备的悬浮物未引起明显的溶血或肉眼可见的变化，表明10mg/ml的帕洛诺司琼制剂在体外与人血是相容的。
体外光细胞毒性和光染色体畸变试验及包括一个预初的单剂量光刺激性试验的光敏性研究未显示出任何潜在的对光安全性方面的担忧。
21-2 盐酸帕洛诺司琼注射液全身过敏性试验[摘要]豚鼠隔日每只腹腔注射盐酸帕洛诺司琼注射液（3μg/ml和15μg/ml，分别相当于30μg/kg和150μg/kg）1ml/100g，共5次。
分别于末次给药后第12天前肢静脉注射盐酸帕洛诺司琼注射液（15μg /ml、50μg/ml）2ml进行攻击，结果均未出现任何过敏反应症状，反应级数0级，表明盐酸帕洛诺司琼注射液全身过敏性试验合格。
[试验目的]观察盐酸帕洛诺司琼注射液有无过敏反应。
21-2-1试验材料21-2-1-1药物及试剂盐酸帕洛诺司琼注射液：由×××制药股份有限公司研制，批号：20040403，规格：5ml:0.25mg(以盐酸帕洛诺司琼计)。
将盐酸帕洛诺司琼注射液制剂转移至洁净玻璃瓶内，再用生理盐水稀释至所需浓度使用。
卵白蛋白：华美生物工程公司分装，批号：BP0123。
注射用生理盐水：西南药业股份有限公司生产，批号：66040193。
21-2-1-2动物：普通级健康豚鼠，雌雄不拘，体重200-300g，共32只；由四川省医学科学研究实验动物研究所提供，许可证号：SCXK（川）2003-02。
饲养于普通级动物房，实验动物使用许可证号：SCXK（渝）20040003。
21-2-2试验方法21-2-2-1剂量设置阴性对照组：注射用生理盐水。
阳性对照组：卵白蛋白，致敏浓度为5%；激发浓度为5%。
盐酸帕洛诺司琼注射液低剂量组：致敏浓度为3μg/ml；激发浓度为15μg/ml。
盐酸帕洛诺司琼注射液高剂量组：致敏浓度为15μg/ml；激发浓度为50μg/ml。
21-2-2-2试验分组将豚鼠均分为4组，每组8只，雌雄不拘，1组为阴性对照组，2组为阳性对照组，3、4组为盐酸帕洛诺司琼注射液组。
21-2-2-3给药途径致敏：腹腔注射给药。
激发：前肢静脉注射给药。
21-2-2-4试验步骤致敏：腹腔注射给药，隔日一次，共5次（阳性对照组为末3次给药），受试物高低剂量组按体重给药：1ml/100g，最大不超过4ml，阳性/阴性对照组：1.0ml/只。
激发：末次致敏后第12日一次激发，前肢静脉内快速给药，给药容积1ml/只。
激发后按表1观察豚鼠的过敏反应症状，并按表2分级，判定其过敏试验是否合格。
表1过敏反应症状表2 全身致敏性评价标准反应级数达2级以上（包括2级）时，该供试品可认为过敏试验不合格。
21-2-3试验结果阴性对照组及盐酸帕洛诺司琼注射液组的豚鼠在末次致敏后12天攻击时未出现过敏反应症状，注射5%卵白蛋白阳性对照组8只豚鼠均出现竖毛、喷嚏、咳嗽、呼吸困难、颤抖、痉挛、休克死亡等明显过敏反应症状。
结果见表3。
表3 盐酸帕洛诺司琼注射液豚鼠过敏反应级数6续表3 盐酸帕洛诺司琼注射液豚鼠过敏反应级数721-2-4试验结论豚鼠隔日每只腹腔注射盐酸帕洛诺司琼注射液（3μg/ml和15μg/ml，分别相当于30μg/kg和150μg/kg）1ml/100g，共5次，末次致敏后第14天前肢静脉注射注射1ml盐酸帕洛诺司琼注射液（15μg/ml、50μg/ml），豚鼠过敏反应级数为0级，与注射用生理盐水的阴性对照组相同，注射卵蛋白的阳性对照组反应级数为4级。
表明盐酸帕洛诺司琼注射液过敏试验合格。
21-3 盐酸帕洛诺司琼注射液溶血性试验［摘要］浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液无溶血作用，检查结果符合注射用安全性要求。
［试验目的］检查浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液有无溶血和凝集等反应。
21-3-1试验材料21-3-1-1药物及试剂盐酸帕洛诺司琼注射液：由×××制药股份有限公司研制，批号：20040403，规格：5ml:0.25mg(以盐酸帕洛诺司琼计)。
生理盐水：西南药业股份有限公司生产，批号：66040193。
21-3-1-2动物普通级健康家兔，1只，体重2.2kg，雄性，由重庆中药研究院实验动物研究室提供，许可证号：SCXK（渝）20020004。
饲养于普通级动物房，实验动物使用许可证号：SCXK（渝）20040003。
21-3-1-3仪器电子恒温水浴箱：型号：DZKW-4，上海科析试验仪器厂；台式离心机：型号：LDZ4-0.8，北京医用离心机厂。
21-3-2试验方法21-3-2-1 2%兔血生理盐水混悬液的制备：取家兔心脏血10ml，置于装有玻璃珠的三角瓶中，摇动以去除纤维蛋白，加入生理盐水，移入离心管内，于离心机3000转/min离心10min。
丢弃上清液，再加生理盐水混匀离心，反复3-4次，直至上清液呈无色透明方可用于试验。
将所得兔红细胞按其体积用生理盐水稀释成2%的混悬液。
21-3-2-2取洁净试管7只，按1－7号进行编号，1－5号管为供试品管，6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管。
按表4所示依次加入2%红细胞悬液、0.9%氯化钠溶液或蒸馏水及受试药物，混匀后，立即置37℃±0.5℃的恒温箱中进行温育，开始每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，一般观察3小时。
21-3-3 试验结果见表4。
表4 盐酸帕洛诺司琼注射液的溶血反应注:结果中“+”表示溶血; “-”表示不溶血.结果表明盐酸帕洛诺司琼注射液两组（浓度为50μg/ml）在0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml管中，经37℃保温1、30、45min、1、2、3hr，均未出现溶血和凝集反应，上层液无色澄明，红细胞全部下沉。
而第7管加蒸馏水后不到1min即出现溶血，上层液呈澄明红色。
21-3-4 试验结论50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液在观察期间均未见上层液澄明红色，红细胞全部下沉，振摇后能很好分散，即无溶血和凝集现象。
故浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液符合注射用安全性检查要求。
21-4 盐酸帕洛诺司琼注射液血管刺激性试验[摘要]家兔耳缘静脉缓慢注射盐酸帕洛诺司琼注射液（浓度为50µg/ml）5ml，耳部组织外观无异常，病理组织检查无组织变性或坏死等刺激反应。
[试验目的]观察家兔耳缘静脉滴注浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液对血管有否产生刺激反应。
21-4-1试验材料21-4-1-1药物及试剂盐酸帕洛诺司琼注射液：×××制药股份有限公司研制，批号：20040403，规格：5ml:0.25mg(以盐酸帕洛诺司琼计)。
注射用生理盐水：西南药业股份有限公司生产，批号：66040193。
21-4-1-2试验动物普通级健康家兔，5只，雌雄兼有，体重2kg左右，由重庆中药研究院实验动物研究室提供，许可证号：SCXK（渝）20020004。
饲养于普通级动物房，实验动物使用许可证号：SCXK（渝）20040003。
21-4-2试验方法将家兔固定好后，于左边耳缘静脉以无菌操作方法缓慢滴注入盐酸帕洛诺司琼溶液(浓度为50µg/ml)5ml，右边耳缘静脉相应部位同法注入5ml的灭菌生理盐水作为对照，连续给药3天。
末次给药48小时后，将3只家兔放血处死，于距注射部位近心端2cm左右处取耳缘组织（3×3cm2），用10%甲醛液（福尔马林）固定，然后进行组织病理学检查。
剩下的2只动物根据受试物刺激性反应情况，继续观察14天后处死，根据末次给药48小时后处死家兔的病理组织学检查结果决定是否进行病理样本取材，以了解刺激性反应的可逆程度。
21-4-3试验结果家兔耳缘静脉滴注浓度为50µg/ml的盐酸帕洛诺司琼注射液5ml后，注射部位外观未见淤血和肿胀现象。
末次给药后48小时处死部分家兔的病理检查显示：静注盐酸帕洛诺司琼注射液与0.9%氯化钠注射液，耳部组织结构完整，无变性坏死及出血现象发生。
14天后对剩下的2只家兔直接处死，不作病理取材。
21-4-4试验结论家兔耳缘静脉滴注盐酸帕洛诺司琼注射液（浓度为50µg/ml）5ml，每日1次，连续3日，耳部组织外观无异常，病理组织检查无炎症、无组织变性或坏死等显著刺激反应。
21-5豚鼠皮肤过敏性试验[1]21-5-1方法：使用10只雌性豚鼠检查RS-25258-007（帕洛诺司琼的自由基）制剂引起皮肤过敏反应的可能性。