实验1-1 免疫血清制备及效价测定
实验目的和要求
1、学习抗血清的制备方法； 2、掌握抗血清的收集和保存方法； 3、掌握免疫血清效价的测定方法。
实验原理
制备免疫血清的基本方法是将抗原注入动物体内，由动物体内特异的B淋 巴细胞增殖分化成浆细胞产生抗体。由于抗原分子（完全抗原）具有多种抗原决 定簇，每一种抗原决定簇可以激活具有相应抗原决定簇受体的B淋巴细胞系产生 针对该决定簇的抗体，因此用抗原免疫动物获得的免疫血清一般为多克隆抗体 （polyclonal antibody）。
本次实验将采用溶血实验测定所获免疫血清的效价。
• 抗原的两种特性：免疫原性与抗原性
• 免疫原性的本质——异物性
• 与机体亲缘关系越远，组织结构的差异越 大，异物性越强。
实验材料
1. 40% SRBC 2. 18-22g的BALB/C系小白鼠 3. 无菌1ml 注射器 4. 抗凝剂（枸橼酸钠或肝素） 5. 新鲜豚鼠血清（作为补体用） 6. 小试管等
实验内容
1、免疫动物
初次免疫小鼠为腹腔注射40%绵羊红细胞 （SRBC）0.2ml，以后分别于第4天、第7天和第10 天时间，以相同免疫剂量、相同免疫途径加强免疫。
小鼠腹腔注射
1. 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器，配合4号针头。 2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的
尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。 这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损 伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器 官。 3. 尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮 下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后 在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头， 并轻微旋转针头，不要越轨。20 20年12 月12日 星期六 10时9 分59秒1 0:09:59 12 December 2020
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制备的免疫血清的质量（特异性、亲和力及效价高低）受多种因素的影响， 主要包括抗原的性质、免疫动物的种类及状态、免疫剂量、免疫途径及免疫方案 （免疫次数、间隔时间以及免疫佐剂的使用等等）。因此要获得高质量的免疫血 清需先通过预实验摸索确定最佳免疫方案。
测定免疫血清中抗体效价的方法很多，如凝集反应、沉淀反应、溶血反应、 ELISA分析等均可用于对抗体效价的测定。