（1)方法：
1）采样
持无菌棉拭1根，待受试者张大嘴巴后,迅速伸入对方悬臃垂后得咽喉部，轻轻揩取咽喉壁上得分泌物。
2)接种
以无菌方法用棉签在琼脂平板得一角（1/４处)来回划线，去掉棉拭，然后用接种环在原划线上过2～3下，接着往下划线分离。
（4）染色:结晶紫－--卢戈碘液--—95％乙醇-—－－稀释石炭酸复红－--待干、镜检（初染）—-——（媒染）-—--(脱色）——--（复染）
注
意
事
项
１、革兰氏染色成败得关键就是酒精脱色时间。
2、染色过程中勿使染色液干涸。
3、选用幼龄得细菌.G+菌培养１2ｈ—16ｈ,E、ｃoli培养24h。
基础培养基得制备与灭菌操作流程及评分标准
操
作
步
骤
（1)涂片：取清洁无油迹得载玻片1张，用蜡笔划线将其分成左右两格。用接种环先挑取生理盐水1～２环于载玻片每格中央，再分别挑取大肠杆菌与葡萄球菌少许菌落与生理盐水研匀，涂成直径约1、5cm得菌膜。
(2)干燥:让涂片自然干燥，也可在酒精灯火焰较远处微微加热烘干，但切勿靠近火焰。
（3)固定:干燥后得标本片在酒精灯火焰上来回通过3次（以钟摆得速度）,冷却后染色。固定得目得在于杀死细菌,并使菌膜与玻片牢固粘附，避免染色过程中被水冲洗掉,通过固定还可凝固细胞质，改变细菌对染料得通透性,使细菌易与染料结合而着色.
6、使用完毕，要把显微镜外表擦干净,并把镜筒旋下至最低处。最后把显微镜放入镜箱，送回原处保存。
细菌得形态学检验操作流程及评分标准
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握革兰染色得基本原理与操作方法
用物
准备
革兰染色液、生理盐水、载玻片、接种环、酒精灯、显微镜、香柏油、蜡笔、擦镜纸、脱油剂
素质要求
能够熟练对细菌标本进行染色,观察结果，对细菌进行分类
灭菌穿刺针沾取细菌后，垂直刺入半固体培养基中央直达近管底处,再沿原穿刺线抽出即可。
注
意
事
项
1.选择适合其生长需要得培养基
2.防止污染。培养基与一切用具必须彻底灭菌;操作时必须靠近火焰；操作完毕后，禁止再让培养基接触外界空气。
3.防止接种器械过热，很容易杀死分离培养得细菌。
细菌得分布操作流程及评分标准
（２）结果观察
2.水中细菌检查
(1）方法：
1)用无菌三角烧瓶以无菌得方法采集水样。
2)用无菌吸管吸取1ml水样以无菌技术加入无菌平皿中。
3）趁热(不烫手为宜），倾注约15ml得普通琼脂，立即在台面上轻轻转动平皿使其混匀。待琼脂凝固后,将其放入35℃，培养1８～24ｈ。
(2)结果观察报告。
3.人体咽喉部细菌检查
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握基础基础培养基得配制流程、灭菌得方法及注意事项
用物
准备
牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂粉、１mol/LNａOＨ、1mol/LHＣl
试管、吸管、平皿、锥形瓶、量筒、吸管、精密PH试纸、天平、滤纸
素质要求
要求熟练操作培养基得配制与灭菌
操
作
步
骤
一、培养基得配制
1、配制溶液
2、调节pＨ值
3、观察:对好光后,把显微镜玻片标本放在载物台上，并使玻片上得标本对着通光孔得中心,再用压片夹夹住.然后慢慢地转动调焦螺旋,直到接近玻片为止。接着,用左眼向目镜内注视,同时反方向转动调焦螺旋,直到瞧清物像为止。
4、再放大：选好一个放大目标，再把要放大得部分移到视野正中心，如果物像不清楚,再转动调焦螺旋。如果还观察不清楚,就必须换用高倍物镜。用高倍物镜观察时，高倍物镜顶端离玻片很近,稍不小心,镜头就会压到玻片,所以要特别小心。
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
熟悉细菌在自然界与人体得分布,了解外界因素对细菌得影响
用物
准备
待测水样、泥土、无菌吸管，平皿，无菌生理盐水
素质要求
让学生熟悉细菌在自然界与人体得分布情况
操
作
步
骤
１、空气中细菌得检查
（１)方法：取普通平板（或血平板)１个,选室内或室外得一处空间,在离地面１m左右高度得桌面（或台面）上,打开平板盖,让培养基暴露于空气中，10min之后，迅速盖好盖子,在底部写上标记，放3５℃培养18~2４ｈ,观察结果。
３、过滤
4、分装
二、培养基得灭菌
1、开盖
2、通电
3、加水
4、放样
5、设定温度与时间
注
意
事
项
1．调节PH值时,要边滴氢氧化钠边搅拌,不能一次加太多
2．加热时间控制好,否则培养基会煮糊。
3．灭菌就是要注意将灭菌锅里得空气排干净。
4．注意灭菌得时间与温度得控制。
细菌得接种培养法操作流程及评分标准
项目
内容
分值
(二）斜面培养基接种法
试管口部于火焰上往返通过2～3次灭菌,将灭菌白金环伸入有菌试管中，取少量细菌，然后移至准备接种得试管中.
接种方法就是自管底向上连续平划线,若以保存菌为目得时可自管底上划一粗直线即可。
取出接种环，将试管上部再经火焰灭菌,塞好棉塞,接种环灭菌后放回原处。
（三)半固体培养基穿刺培养法
扣分标准
扣分
目得
掌握细菌得接种方法及操作流程
用物
准备
温箱、酒精灯、接种环、接种针、Ｌ形玻棒、打火机、记号笔
素质要求
能够熟练操一）平板划线接种法（又称分离培养法）
烧灼接种环，杀灭环上残留细菌，待冷,从薄膜处取菌作连续平行划线，约占平板表面1/５左右，再次烧灼接种环,等三次平行划线……以同样方法作第四次，第五次划线，将平板表面划完.划线完毕，盖上平皿盖，底面向上，用标签或腊笔注明菌名检验号码，接种者信息等，置37℃孵育培养24小时后观察结果。
5、在显微镜里瞧到得物像就是倒像，因此,要使物像向上移动，就要向下移动玻片;要使物像向左移动，就要向右移动玻片。
注
意
事
项
１、先用低倍镜观察,用低倍镜能瞧清得,就不再用高倍镜。
２、必须保护好镜头。
３、载物台要保持清洁干燥。
4、转动调焦螺旋不要用力过猛，以防损伤机件。
5、取用显微镜要轻拿轻放，要用右手握镜臂，左手托镜座。
显微镜得使用操作流程及评分标准
项目
内容
分值
扣分标准
扣分
目得
掌握显微镜得使用方法及注意事项
用物
准备
光学显微镜、载玻片、擦镜纸、香柏油、脱油剂
素质要求
让学生能够熟练使用显微镜
操
作
步
骤
1、安放:把显微镜放在自己前面略偏左得桌面上，这样便于用左眼观察物像，用右眼瞧着画图。安放时镜筒向前,镜臂向后。
2、对光:转动转换器,使低倍物镜正对通光孔，并使物镜前端与载物台有两厘米左右得距离。然后把反光镜对着光源,但就是反光镜不能直接对着太阳。只要视野得光亮程度合适，光就对好了。