第3章消毒灭菌与病原微生物
高压蒸汽灭菌器
第3章消毒灭菌与病原微生物
湿热灭菌效果为何优于干热灭菌？
原因： ①湿热中细菌菌体蛋白质较易凝固变性 ②湿热的穿透力比干热大 ③湿热的蒸气有潜热效应存在。
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（二）辐射杀菌法
1、紫外线 2、电离辐射：β、γ射线等 3、微波
第3章消毒灭菌与病原微生物
低温可使细菌的新陈代谢减慢，故常用作保存 细菌菌种。
为避免解冻时对细菌的损伤，可在低温状态 下真空抽去水分，此方法称为冷冻真空干燥法。 该法是目前保存菌种的最好方法。
第3章消毒灭菌与病原微生物
二、 化学消毒灭菌法
许多化学药物能影响细菌的化学组成、物理 结构和生理活动，从而发挥防腐、消毒甚至杀菌 作用。这些化学药物称为化学消毒剂。一般对人 体组织有害，只能外用或用于环境的消毒。
除去尘埃和一切污秽以减少微生物数 量的过程。
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无 菌 (asepsis)
不存在任何活菌、多是灭菌的结果。
**无菌操作 (antisepsis technique)
防止细菌进入人体或其他物品的操 作技术。
第3章消毒灭菌与病原微生物
Sec.2 消毒灭菌的方法
物理消毒灭菌法 化学消毒灭菌法
紫外线杀菌试验
37℃ 24h
紫外灯下50cm处照射30min
照射后培养结果观察
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紫外线
波 长 240~300nm的紫外线具有杀菌作用，其 中以265~266nm最强。 ***杀菌机制 主要作用于DNA，形成二聚体，干 扰DNA的复制与转录，导致细菌的变异或死亡。 特 点 紫外线穿透力较弱，一般只用于手术室等 的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。 紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用。
–低效消毒剂 可杀灭多数繁殖体，不能杀灭芽胞、结核分枝杆菌 及某些抵抗力强的真菌和病毒。 季铵盐类消毒剂 –新洁尔灭:表面活性剂,清洁作用。 –皮肤粘膜,地面。 氯已定 –洗必泰:皮肤粘膜,地面。 高锰酸钾 –氧化杀菌作用皮肤粘膜,餐具,水果,蔬菜消毒第3章消毒灭菌与病原微生物来自Sec.3 消毒灭菌的运用
第3章消毒灭菌与病原微生物
高效消毒剂
–杀灭所有微生物包括芽孢。 –适用于不耐受热力灭菌、进入人体内部的物品
含氯消毒剂: –次氯酸钠,漂白粉等。 –水中产氯,次氯酸,新生态氧,杀菌。 –饮用水,皮肤,地面,排泄物,污水。
过氧化物消毒剂:过氧化氢,过氧乙酸，二氧 化氯。 醛类消毒剂:戊二醛,甲醛。 环氧乙烷:高效杀菌,易燃,有毒性。
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***化学消毒剂的杀菌机制
①促进菌体蛋白质变性或凝固 如酚类、醇类、重金属盐类、酸碱类、醛类等 ②干扰细菌的酶系统和代谢 破坏蛋白与核酸的基团，如某些氧化重金属盐类 与细菌蛋白的-SH基结合； ③损伤细菌的细胞膜 如酚类、表面活性剂、脂溶剂等能降低细菌胞膜 和病毒包膜的表面张力并增加其通透性。
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–中效消毒剂
不能杀灭芽胞，能杀灭繁殖体、真菌和大多数病毒 内窥镜,喉镜,阴道窥器，麻醉器材,皮肤粘膜消毒。
含碘消毒剂: –碘酊,碘伏:
沉淀蛋白,氧化杀菌,皮肤、体温计。 醇类消毒剂: –乙醇:70-75%,皮肤粘膜消毒。 –异丙醇:作用强,毒性强,器材体温计。
第3章消毒灭菌与病原微生物
第3章消毒灭菌与病原微生物
（三）滤过除菌法
器 具： 滤菌器
用 途： 不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生
素以及空气等的除菌。
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薄膜滤菌器：硝基纤维素膜
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层流室
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（四）干燥和低温抑菌法
有些细菌的繁殖体在空气中干燥时会很快死亡, 干燥法常用于保存食物。
杀灭物体或环境中的病原微生物。但不 一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。
用以消毒的药品称为消毒剂。
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防 腐 (antisepsis)
体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。 用以防腐的药品称为防腐剂。
同一化学药品在高浓度为消毒剂，低浓度时常 为防腐剂。
清 洁（cleaning)
以1～10 μm波长的热效应最强。 ……
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2. 湿热灭菌法
100℃煮沸5min 巴氏消毒法：71.7 ℃/15～30sec；
61.1～62.8 ℃/30min 流动蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 ***高压蒸汽灭菌法：在103.4kPa
（1.05kg/cm2）温度可达121.3ºC，15~20min， 可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。
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消毒灭菌的运用
1、医疗器械物品
2、室内空气 3、手、皮肤、粘膜 4、病人的排泄物与分泌物 5、病人污染的物品 6、饮水 7、环境
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一 医疗器械物品的消毒灭菌
–高危器械物品 注射器,手术器械,注射液体,导 管进入无菌组织物品。灭菌使用。
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一、 物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法：干热、湿热。 （二）辐射杀菌法 （三）滤过除菌法 （四）干燥和低温抑菌法
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1. 干热灭菌法
焚烧 用于废弃物品或动物尸体等 烧灼 用于接种环、试管口等的灭菌。 干烤 171℃/1h或160 ℃/2h。 红外线 0.77～1000 μm 波长的电磁波，
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2. 电离辐射
（包括高速电子、β射线和γ射线） 具有较高的能量和穿透力，对微生物有致死作用。 常用于大量一次性医用塑料制品的消毒；亦可用于
食品、药品和生物制品的消毒或灭菌。
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3. 微 波 波长为1~1000mm的电磁波
可穿透玻璃、陶瓷和薄塑料等物质，但不能穿透 金属表面。 主要用于食品、非金属器械、检验室用品、无菌 室和病室中食品用具、药杯及其他用品的消毒。
第3章
消毒灭菌与病原微生物 实验室生物安全
第3章消毒灭菌与病原微生物
Sec.1 消毒灭菌的常用术语
第3章消毒灭菌与病原微生物
***灭 菌 (sterilization)
杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀 灭细菌芽胞、病毒、霉菌在内的全部病原微 生物和非病原微生物。
***消 毒 (disinfection)