第30卷第4期2008年8月大连医科大学学报Journal of DalianM edicalU ni v ersityV o.l30N o.4A ug.2008 HPLC法测定硝苯地平片的含量*高岩1,裘一兰2,董莉2(1.大连市沙河口区医院; 2.大连市药品检验所,辽宁大连116021)摘要:[目的]建立高效液相色谱法(HPLC法)测定硝苯地平片中硝苯地平含量的方法,为开展血中药物浓度测定及临床合理用药提供依据。
[方法]以甲醇-水(3B2)为流动相,流速为1.0mL#m i n-1,检测波长235n m。
[结果]硝苯地平浓度在6.132~14.308L g#mL-1范围内线性关系良好。
相关系数r为0.9999,平均相对回收率为99.98%,日内RSD为0.70%;日间RSD为1.25%。
[结论]本法适用于硝苯地平片含量的测定。
关键词:硝苯地平片;高效液相色谱法;紫外分光光度法中图分类号:R91文献标识码:A文章编号:1671-7295(2008)04-0346-02De t er m i n ation of cont ent of N ifedi p ine i n tablets by HPLCGAO Yan1,Q I U Y i-lan2,DONG L i2(Dalian Shahekou D istrictH os p ital;2.Institute for Drug C ontrol in Dalian P refecture,Dalian116021, Ch i n a)Ab stract:[O bjective]T o establish a H PLC m ethod f o r the dete r m ina ti on of t he conten t of N ifed i pi ne in the tablets. [M ethods]F or the detec ti on,the m obil e phase w as m ethano l-w ater(3B2),the flo w ra te w as1.0mL#m i n-1and t he wave l eng th ofH PLC and UV detection was235n m and333nm.[R esults]The li near it y w as obta i ned i n the rang of6.132 ~14.308L g#mL-1o fN ifedi p i ne(r=0.9999).The ave rage recovery w as99.98%,the re lati ve standa rd deviation of i n-ter-day and i n tra-day was0.70%and1.25%,respectively.[Conc l usi on]T he estab lished HPLC m ethod can be ap-pli ed for the deter m ina ti on o f con tent o f N ifed i p i ne i n the tab lets,wh i ch are helpful for c linical m ed i cation.K ey w ords:N if ed i pine T ablets;H PLC;UV硝苯地平片为用于治疗心血管疾病最常用的钙拮抗剂。
硝苯地平片的含量测定在中国药典中推荐的是紫外分光光度法(UV法),测定波长为333n m[1]。
硝苯地平在320~355 n m波长范围呈较大的宽幅吸收,测定含量时波长跨度大,而在235n m波长处有较大的吸收,其吸收度值(A)为333n m 波长处的4.4倍;另外由于硝苯地平的化学性质不稳定,见光可产生硝苯地平A和硝苯地平B两种分解产物,二者在333 n m波长处均有吸收,相同浓度的硝苯地平及硝苯地平A、B 的吸收度值分别为0.5401、0.0245和0.2421[2,3]。
可见,硝苯地平B的吸收较大。
因此,用UV法测定硝苯地平的含量可导致测定结果偏高。
为客观、准确地反映硝苯地平片剂的实际含量,本实验采用改良的高效液相色谱法(HPLC法)进行测定。
结果表明:该法可将主成分与已知及未知的杂质分离,测定结果稳定可靠。
1材料和方法1.1材料1.1.1实验药品:硝苯地平(江西腾达药业有限公司,批号:30770,含量100.9%);硝苯地平A和硝苯地平B(江西腾达药业有限公司,批号:10339-0001和10340-0001)。
甲醇为色谱纯。
对照品均为中国药品检验所提供。
1.1.2仪器:高效液相色谱仪,日本岛津SP8800,由Spe-dra100紫外检测器、Eppendo rf恒温箱、EL I TE-TEST脱气机及CASPER工作站组成。
高效液相色谱柱为H ypersil BDS*收稿日期:2008-03-14;修回日期:2008-07-10作者简介:高岩(1970-),女,辽宁大连人,主管药师。
第4期高岩,等:HPLC法测定硝苯地平片的含量C185L m4.6@150mm。
日本岛津UV-2401PC紫外分光光度计。
1.2方法1.2.1色谱条件:采用外标法;色谱柱温:室温;流动相:甲醇-水(3B2);流速:1.0mL#m i n-1;进样量:10L L;检测波长:235n m。
1.2.2标准曲线制备:(1)对照品储备液的制备精密称定105e干燥至恒重的硝苯地平对照品10.22m g,置100mL棕色容量瓶中,加甲醇适量,超声溶解,加甲醇至刻度,摇匀。
精密量取对照品储备液3、4、5、6、7mL,分别置50mL棕色容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀。
制得浓度分别为6.132、8.176、10.220、12.264、14.308L g#mL-1的溶液,按上述色谱条件分析。
制得浓度分别为6.132、8.176、10.220、12.264、14.308L g#mL-1的溶液,按上述色谱条件分析。
(2)回收率及精密度的测定精密称取硝苯地平对照品,照标准曲线制备项下方法操作,配置成5种不同浓度溶液,日内进行测定,并计算回收率及精密度(n=3)。
1.2.3样品测定:取本品20片,精密称定,研细,精密称定相当于硝苯地平10mg,置100mL棕色容量瓶中,加甲醇适量超声溶解,用甲醇稀释到刻度,摇匀,滤过,弃取初滤液得供试品溶液。
精密量取供试品溶液5mL置50mL棕色容量瓶中,加流动相至刻度,摇匀。
用H PLC法测定,以外标法计算含量。
精密量取对照品储备液和供试品溶液各8mL,分别置25mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,照分光光度法于333n m波长测定吸收度,计算含量。
1.2.4重现性分析:在避光条件下,取对照品储备液,分别于日内和日间稀释后进行H PLC法分析(n=3)。
2结果2.1线性根据对照品储备液不同量的H PLC分析结果,以硝苯地平峰面积为A,相对应的浓度为C,得到线性范围在6.132~ 14.308L g#mL-1的硝苯地平的线性回归方程A=12825C+ 4132,r=0.9999。
2.2回收率及精密度HPLC法测定硝苯地平含量的回收率及精密度分析,见表1。
2.3硝苯地平、硝苯地平A及B样品分别进行HPLC法与UV法测定测定结果见表2。
表1HPLC法测定硝苯地平含量的回收率及精密度分析标示浓度L g#mL-1实测浓度L g#mL-1回收率(%)平均值(%)R S D(%)7.5307.51599.810.0410.05100.1212.5512.58100.2799.980.3015.0614.9999.5518.0718.10100.18表2H PLC法及UV法测定硝苯地平含量的分析名称H PLC法测定次数平均值(%)RSD(%)杂质量(%)UV法测定次数平均值(%)R S D(%)硝苯地平497.30.620.5397.80.69硝苯地平A4107.20.600.63107.60.92硝苯地平B496.90.511.0397.80.332.4H PLC法测定硝苯地平的重现性分析日内R S D=0.70%;日间R S D=1.25%。
本品日内比较稳定,重现性较好;日间相对于日内略差。
2.5选择H PLC法测定波长的确定A235nm和A333nm进行测定的结果如表3。
表3HPLC法及UV法A235nm A333nm测定硝苯地平含量的分析名称UV法(30L g#mL-1)A235nmA333nmH PLC法(10.22L g#mL-1)As235nmAs333nm硝苯地平2.42660.540113556636119硝苯地平A0.93610.024514143037674硝苯地平B1.14980.242112781734055347大连医科大学学报第30卷3讨论本实验中流动相采用中国药典测定有关物质所用的甲醇-水(3B2)比例,可使硝苯地平峰的保留时间为6~10 m i n,理论塔板数以硝苯地平峰计应不低于4000,其对称因子为1.05,与杂质峰的分离度不小于2.0。
在避光条件下,UV法测定含量的结果略高于H PLC法,说明前者含量为硝苯地平和已知及未知杂质总含量;而后者为硝苯地平的含量。
浓度为10.220L g#mL-1硝苯地平对照品溶液,分别于235n m和333n m波长测定,前者峰面积(As)为后者的3.8倍。
从表3同样可以看出相同浓度的三种不同物质,用UV 法测定,前者的吸收度值(A)远远大于后者。
因此,本研究中,在H PLC法中采用235n m波长进行检测,提高了硝苯地平检测的灵敏度,为分析不同片剂中硝苯地平的含量建立了稳定可靠的方法。
另外,为开展血中硝苯地平浓度的测定及指导临床合理用药提供了实验依据。
参考文献:[1]中国药典.二部[S].2000.836.[2]Br iti sh P harmacopoe ia.edÓ{S}.2000.2123.[3]付居标,乔丽.硝苯地平的HPLC测定[J].山东医药工业,2001,20(5):10-11.(上接第345页)质紊乱,特别是低钾血症时出现的室性早搏,需立即处理;(5)其他器质性心脏病,如急性心肌炎和心肌病等。
动态心电图检查无创伤,不受身体状况限制,能够及时发现器质性室性心律失常,使临床采取紧急处理措施,为防治室性心律失常等引起的猝死提供了帮助。
本组检测出窦性心动过缓、窦房阻滞22例,占1.6%,房室传导阻滞63例,占4.6%,而老年人窦性心动过缓、窦房传导阻滞19例,占2.2%,房室传导阻滞58例,占6.6%,病窦是老年人疾病,随着动态心电图广泛应用于临床,发现一些老年人心率很慢,最慢心率大多发生在夜间睡眠时,如果心率<30次/m i n,应当引起临床医生注意。