第四步：灭菌剂量验证 从另一批样品中选出10分样品用灭菌剂量（VDmax Dose）进行辐照，对辐照后样品进行 无菌试验，如果没有阳性结果出现，则所选灭菌剂量（VDmax Dose）验证通过。
21
原材料
产品族的确定
生物负载 堆积密度
是否基本一致，能 否归为同一产品族
初始污染菌检测
一个产品族
多个产品族 分 开 做
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方法一和VDmax方法的步骤 ➢ 测定微生物负载
➢ 查表得相应的验证剂量 ➢ 通过实验对验证剂量进行验证 ➢ 查表得灭菌剂量
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方法一
第一步：测定初始生物负载 为了做生物负载分析，至少要分别从三批独立的产品中抽出10个样品进行检测。计算出
每一批产品的平均生物负载，用30个样品的平均生物负载作为三批样品的总平均生物负载。 如果三批产品中有一批的平均生物负载比总平均生物负载大两倍或两倍以上，就用此批的 平均值来做剂量验证，否则，用三批的总平均值来做剂量验证。
第二步
总平均生物负载
0.63
三批次产品的生物负载分别是0.6,0.6，0.7，因此产品的总平均生物负载为0.63。 没有一批的平均生物负载大于总平均生物负载的两倍，因此总平均生物负载0.63 用于确定验证剂量。
第三步
验证剂量
2.7kGy
在表6中没有生物负载为0.63对应的验证剂量，所以取与0.63最接近的生物负载为 0.70对应的验证剂量。
第三步
在表5中没有生物负载为59对应的验证剂量，所以取与59最接近 的生物负载为60对应的验证剂量。
第四步
产品接收的最高剂量在设定的剂量范围内（≤8.0 kGy） 第五步
产品接收剂量在设定的剂量范围内（≤8.0 kGy）且接受无菌测试 的结果（≤2个阳性），因此验证通过。
第六步
整个产品的平均生物负载计算如下：59/0.05=1180
产品名称Βιβλιοθήκη 弘健医用膜批号100701
100801
100901
序号
初始污染菌（cfu/件）
1
5
3
3
2
2
5
2
3
3
3
3
4
2
3
3
5
4
4
2
6
3
5
3
7
3
2
5
8
5
3
2
9
2
4
3
10
3
3
3
平均初始污染菌
3.2
3.4
2.9
校正后初始污染菌
3.5
3.8
第二步：进行剂量验证试验 初始生物负载确定后，则可确认验证剂量。通过查ISO 11137-2-2006中的表9得出所需验证 剂量。并按验证剂量对一批产品中的10份样品进行辐照处理。无菌保证水平为10-2。然后 对10份辐照样品进行无菌试验。
第三步：结果解析 如果10份样品中不超过一份样品显示阳性，则接受设定的验证剂量，所选的灭菌剂量被验证。 如果2份样品显示阳性，必须做第二次剂量验证。
取标准包装产品5件，将测试产品选择多次 洗脱进行回收率测定，反复洗脱四次培养记 数，计算回收率。
计算公式：回收率（%）=洗脱1细菌数量 （平均数）/总洗脱细菌数量×100%；
23
回收率测定结果
样品 号 洗脱1
每次洗脱的细菌总数（cfu/件）
回收率（%）
洗脱2 洗脱3
洗脱4
琼脂覆盖
1
5
3
2
6
3
3
ISO 11137-2-2006 医疗保健产品 辐照灭菌 2 灭菌剂量 的建立
ISO 11137-3-2006 医疗保健产品 辐照灭菌 3 剂量测量指 南
9
灭菌确认的分工
辐照机构的鉴定
辐照装置的安装鉴定（IQ）
运行鉴定（OQ）
性能鉴定（PQ）
建立灭菌剂量 建立最大耐受剂量 编制辐照灭菌验证方案 编制辐照灭菌剂量确定报告
产品份额总平均生物负载 59
验证剂量
7.3kGy
剂量验证实验 结果解释
7.7 kGy 2个阳性
整个产品的平均生物负载 1180
备注
第一步
终产品无菌保证水平为10-6 用来做无菌测试的产品太大，因此选择1/20的产品做无菌测试
第二步
三批次产品份额的生物负载分别是50,62，65，因此产品份额的总 平均生物负载为59。没有一批的平均生物负载大于总平均生物负 载的两倍，因此总平均生物负载用于确定验证剂量。
保证设备、关键控制设备及仪表能在规定的各种参数范围内正常运行。 剂量确认
确认产品的灭菌剂量，确保产品达到无菌要求；确认产品的最高耐受剂量， 确保产品在其规定寿命期内符合其特有功能要求。 性能确认 (PQ)
证明灭菌装载的所有部分都达到了灭菌条件 验证的审核
验证的保持
8
辐照灭菌验证标准
ISO 11137-1-2006 医疗保健产品 辐照灭菌 1 医疗器械 灭菌过程的设计,确认和常规控制。
第四步
剂量验证实验
2.6 kGy
产品接收的最高剂量在设定的剂量范围内（≤3.0 kGy）
第五步
结果解释
2个阳性
产品接收剂量在设定的剂量范围内（≤3.0 kGy）且接受无菌测试的结果（≤2个阳 性），因此验证通过。
第六步
10-6无菌水平对应的 剂量
13.7 kGy
从表6a中查出微生物负载0.63，无菌保证水平10-6对应的灭菌剂量为13.7kGy。
10-6无菌水平对应的剂量 25.2 kGy
从表5a中查出微生物负载1180，无菌保证水平10-6对应的灭菌剂量 19
为25.2kGy。
表15灭菌剂量的设定（方法1，SIP=1.0，生物负载＜1.0）
步骤
数值
备注
第一步
无菌保证水平
10-6
终产品无菌保证水平为10-6
产品份额
1.0
生物负载＜1.0的产品要用整个产品测定生物负载和剂量设定试验
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灭菌剂量确认的方法
ISO 11137-2-2006中规定了如何确定辐照产品的无菌保证水平。（ 医疗器械的灭菌，辐照灭菌，第二部分，灭菌剂量的确认）
方法一：根据微生物负载查表求得辐照剂量（130件产品）
方法二：根据微生物的耐受性设定辐照剂量
VDmax方法：对预设好的剂量（15kGy或25kGy)进行 验证（50件产品）
a 表6中没有生物负载为0.63对应的灭菌剂量，因此选择离0.63最近且较大的微生物负载为1200对应的灭菌剂量。
20
VDmax方法：25kGy或15kGy作为灭菌剂量的 证实
第一步：测定初始生物负载 至少从三批产品中抽出10份产品做生物负载分析。生物负载分析必须按照一个经验证过可 行的方法进行分析。计算出每一批产品的生物负载，用30个样品的平均生物负载作为三批 样品的总平均生物负载量。如果三批产品中有一批的平均生物负载量比总平均生物负载量 大两倍或两倍以上，就用此批的平均值来做剂量确定，否则，用三批的总平均值来做剂量 确定。平均生物负载的最大允许值如下： VDmax 25kGy 1000cfu/件 VDmax 15kGy 1.5cfu/件
剂
若批平均生物负载
﹤总平均生物负载×2，
回
微 结 取总平均生物负载
量 确 定
收
生果
率 检 测
物 负 载
分 析 若批平均生物负载
≥总平均生物负载×2， 取最高批次平均值
表9 查得剂量辐照10件样品
接10受个验样 证10件样品25kGy辐照
无
剂量场分布测试
无菌检测
品不超过 1个阳性
无菌检测
阳 性
22
回收率检测
第六步 从表5a中查出微生物负载为382，无菌保证水平为10-3对应的灭菌剂量为12.9 kGy。
a 表5中没有生物负载为382对应的灭菌剂量，因此选择离382最近且较大的微生物负载为400对应的灭菌剂量。
18
表14灭菌剂量的设定（方法1，SIP＜1.0）
步骤
数值
无菌保证水平
10-6
产品份额
0.05
第五步：建立灭菌剂量 通过查阅ISO 11137-2-2006标准中的表5可以确定达到某一无菌保证水平应采用的灭
菌剂量。
14
方法一实例
需30件产品进行检测
15
需100件产品辐照
需100件产品无菌检测
16
17
表13 灭菌剂量的设定（方法1，SIP=1.0）
步骤
数值
无菌保证水平
10-3
产品份额
1.0
10
如何建立最大耐受剂量？
剂量不均匀度U=Dmax/Dmin； 根据国标规定产品吸收箱中剂量分布的不均匀度不得大 于2.0，而辐照医疗器械产品的不均匀度为1.3-1.6之间， 根据美国FDA的参考文献，在伽马加工过程中，最大耐 受剂量必须是其最小灭菌剂量的1.6倍以上，设定最大 耐受剂量值为最小吸收剂量的1.6倍。
第三步
在表5中没有生物负载为382对应的验证剂量，所以取与382最接近的生物负载为400 对应的验证剂量。
剂量验证实验 10.4 kGy
结果解释
1个阳性
10-3无菌水平对 应的剂量
12.9 kGy
第四步 产品接收的最高剂量在设定的剂量范围内
第五步 产品接收剂量在设定的剂量范围内且接受无菌测试的结果，因此验证通过。
第二步：获得验证剂量 一旦确定了原始生物负载量，就可以运用ISO 11137-2-2006标准中的表5确定达到10-2
灭菌水平的剂量。
第三步：进行剂量验证试验 用参考表格确认的验证剂量辐照100个样品，所用验证剂量的相对误差不得超过±10%，