霉菌的形态观察
一、【实验目的】
1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法
2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征
二、【实验原理】
1、霉菌
霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 3~10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

2、观察方法
观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

3、载玻片培养观察法（小室培养法）
用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

三、【实验器材】
1、菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ，毛霉（ Mucor
sp. ），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物
2、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）
3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，
50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等
四、【操作步骤】
1、载玻片培养观察法（小室培养法）
（1）、培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一Ｕ形
玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包
扎后于110℃灭菌20~30分钟，烘干备用。

（2）、琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各6~7ml 注入另两个灭菌
平皿中，使之凝固成薄层。

通过无菌操作，用解剖刀将其
切成 1cmx1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻
片上（每片放两块 )。

（3）、接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种
于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。

（3）、培养：通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加 2～3ml 灭菌的20 %的甘油（用于保持平皿内的湿度 ) ，盖上皿盖，27 ℃正置培养一周。

（4）、镜检：根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。

五、【注意事项】
1、载玻片培养观察中，注意无菌操作，接种量要少，同时尽可能将分散的孢子接种
在琼脂块边缘上，否则培养后菌丝过于稠密影响观察。

六、【实验结果及绘图】
菌种曲霉根霉毛霉青霉
形态特征营养菌丝具有
分隔；气生菌
丝的一部分形
成长而粗糙的
分生孢子梗，
顶端膨大成球
状顶囊，表面
辐射出一层或
两层小梗，小
梗上着生成串
的球形分生孢
子。

分生孢子
梗生于足细胞
上，并通过足
细胞与营养菌
丝相连。

菌丝无隔、多
核、分枝状，
有匍匐菌丝和
假根。

在假根
的上方直立地
生长出一至数
根孢囊梗，其
顶端膨大成球
形孢子囊。

囊
的基部有囊
托，中间有球
形或半球形囊
轴。

囊内产大
量孢囊孢子，
有性生殖时由
不同性别的菌
丝或匍匐菌丝
上生出配子
囊，配子囊双
双异宗配合形
成一接合孢
子。

菌丝无隔、多
核、分枝状，
无假根或匍匐
菌丝。

菌丝体
上直接生出单
生、总状分枝
或假轴状分枝
的孢囊梗。

各
分枝顶端着生
球形孢子囊，
无囊托。

菌丝有横
隔，分生孢
子梗亦有横
隔，光滑或
粗糙。

基部
无足细胞，
顶端不形成
膨大的顶
囊，其分生
孢子梗经过
多次分枝，
产生几轮对
称或不对称
的小梗，形
如扫帚，称
为帚状体。

小梗顶端有
孢子。

四种霉菌形态特征表
【绘图】
青霉菌10x10 青霉菌10x10
马铃薯去皮，切成块煮沸20~30min，然后用1层及6层纱布过滤，再加糖及琼脂，溶化后补水至所需量，110℃灭菌20~30min。