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医学实验动物学动物实验基本技术与模拟肿瘤接种 (1)

《医学实验动物学》 实验课
实验一 大、小鼠给药、采血、
麻醉和解剖
实验目的
1.掌握大小鼠常用给药方法和采血技术 2.掌握大小鼠的麻醉方法和解剖步骤 3.熟悉大小鼠的解剖 结构
一、小鼠的抓取和固定
注意点
抓取小鼠时动作要迅速,要轻 防止被小鼠转过头咬,抓其颈后皮肤要多 如果被咬,应立即挤出血液,清水冲洗
另一人慢慢抽动针管采血 注意: 要将小鼠固定好,防止其头部晃动
六、大小鼠手术麻醉
腹腔麻醉:进针点为右下腹腔,进针角 度为与身体成45度,深度约1cm。
麻醉剂:麻醉药为3.5%水合氯醛,剂量 按小鼠体重0.1ml/10g,20g的小鼠为 0.2ml。
七、大、小鼠心脏采血
右下腹腔麻醉(麻醉药为3.5%水合氯醛,剂 量按0.1ml/10g)
实验步骤 4(组织移植)
用套筒针在切口处刺入皮下直至目标中 心区域,将组织块推入,并迅速拔出。
实验步骤 5
麻醉、解剖裸鼠,与KM鼠比较胸腺的 区别
裸鼠胸腺只剩残基,基本上看不到
解剖观察
实验报告要求:
完成实验指导上第13、16页二份实验报 告
在实验报告的实验结果一项中完成小鼠 解剖图
小鼠的抓取和固定
实验步骤 2(观察胸腺)
观察膈肌形状后,于两侧根部分别切一 小口,将膈肌横向切开,绞断肋骨,直 至锁骨,然后掀起胸骨,暴露整个胸腔。
直视心脏,在心脏的上部,主动脉弓处, 有两片乳白色蝴蝶状的小片,即为胸腺。
实验步骤 3(取肾脏组织)
用圆头镊将肠道拨向对侧,暴露肾脏。 用眼科剪刀取下肾脏,剥去肾包膜,放
五、实验步骤 1 (麻醉解剖小鼠)
按0.1ml/10g体重分别对裸鼠和KM小鼠腹腔 注射3.5%水合氯醛 。
待小鼠麻醉后,腹部朝上固定于小鼠固定板上。 以3%碘酒棉球和75%酒精棉球对KM小鼠进
行皮肤消毒;同时,对裸鼠腋部进行消毒。 用直头剪刀于KM小鼠生殖口上端切一小口,
沿腹部两侧作弧型切开,直至胸膈肌根部。
固定器固定小鼠 消毒尾部,扩张血管,左右两侧的静脉 将尾巴成一个适宜注射的角度,1ml注射器
平行向心方向刺入静脉血管 干棉球压迫止血 注意排除气泡 注射点由尾部远端
五、小鼠眼底静脉丛采血
一人徒手固定小鼠于桌面上,使眼球充 分向外突出
将注射器针头从内眼角位置插入眼球和 眼眶之间,进针约0.5cm(1ml注射器)
解剖观察
操作项目
小鼠:灌胃、尾静脉注射、眼底静 脉丛采血;心脏采血*、麻醉后解剖 观察*。
大鼠:灌胃* 、腹腔注射麻醉、心 脏采血、麻醉后解剖观察。
《医学实验动物学》 实验课
实验二
1.模拟肿瘤(组织块)移植 2.裸鼠与正常小鼠免疫器官的比较
一、实验目的
1.了解裸小鼠和KM小鼠的胸腔结构 了解正常的胸腺结构与不增殖胸腺基的形
•人类的肿瘤能在裸鼠的体内生长,使裸鼠作为一 种疾病模型的载体,广泛地运用于研究人类移植 性肿瘤生长和转移。
三、影响被移植的动物组织或细胞成 活的因素
•组织的相容性 •宿主对移植物的血供 •供体组织物的选择
肾脏组织 ——是哺乳动物中血供较好、活力较强 的组织
注意事项:
实验时请不要戏弄动物、防止被动 物咬伤,防止动物逃逸
实验结束后请把器械清洗干净,整 理齐全
二、大鼠的抓取与固定
三、小鼠灌胃(给药方法之一)
将实验小鼠徒手固定 灌胃针从嘴角处插入口腔内,紧贴咽
后壁插入食道(1ml注射器,深度大 约为3cm) 推动针管给药(生理盐水) 注意不要插入气管,不要抓的太紧以 致小鼠窒息死亡
最大灌胃量:小鼠1ml;大鼠:8ml!
尾静脉
四、小鼠尾静脉注射(给药方法之二)
待其麻醉后,仰卧位固定在解剖板上 胸骨左侧,腋窝平行线下2-3肋骨间,小鼠心
搏动最强处斜行刺入(1ml注射器) 缓慢抽动针管采血 取血量多时采用(同样适用于大鼠)
安全采血量:小鼠1ml;大鼠:8ml!
大鼠心脏采血
八、大体解剖观察及绘图
1.按0.1ml/10g体重,将SD大鼠用3.5% 水合氯醛腹腔注射麻醉。 2.腹部朝上固定于解剖板。 3. 用10cm剪刀从下腹部向上剪开皮肤, 打开腹腔,观察腹腔内脏器,观察大鼠肝 脏时特别注意大鼠无胆囊。 4. 用14cm剪刀打开胸腔,观察胸腔脏器。 5. 根据大体解剖所见,绘图。
态 2.掌握正确的胸腺摘除方式 3.掌握组织块(肿瘤)皮下移植的基本技

二、实验原理
•哺乳动物的胸腺是T淋巴细胞分化成熟的场所, 而T淋巴细胞是参与宿主对异体的组织或细胞排斥 的主要成分,裸鼠胸腺的原基从第三咽囊起不能 发育,因此,裸鼠囊状很小的胸腺残基保持终身。
•胸腺的不增殖导致成熟的T淋巴细胞数大量减少, 其结果是裸鼠机体不能排斥同种异体和异种间的 组织器官移植。
入盛有生理盐水的培养皿中。 用剪刀将肾脏分解为若干2×3mm组织
小块,取边缘整齐、色泽红润为佳。 将一小块肾组织放入套筒针内备用。
实验步骤 4(组织移植)
选取组织的目标区域,常用区域为肋侧 (近腋窝处 )。
实验步骤 4(组织移植)
在离目标区域中心点1-2cm处,用眼科 小剪刀作一2-3mm切口。
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