盐水介质交叉配血
盐水介质交叉配血
【实验原理】
交叉配血试验亦称血液相容性试验，受 血者与供血者的交叉配血反应体系中，若血清 存在针对红细胞膜上ABO血型或其他血型抗 原的IgM抗体时，可直接在离心力作用和盐水 介质条件下，抗原抗体结合而发生肉眼可见的 凝集，亦可在补体参与下进一步引起溶血效应。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 2、应用盐水介质交叉配血试验时，出现两血 不相容，应当首先重新进行、溶血标本不得用于交叉配血试验。
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【注意事项】 4、冬季实验室温度较低时出现红细胞凝集时， 应当排除受血者存在自身冷凝集素。为排除冷 冷凝集素的干扰，可以把主次侧试管放置在 37℃水浴箱内升温一定时间，轻轻摇动试管， 取出试管后立即吸取试管内红细胞悬液放置显 微镜下观察结果；亦可将反应并离心后的主次 侧试管用预温至37 ℃生理盐水洗涤3次，重 新离心后观察结果。
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【器材、试剂与标本】 1、器材 记号笔、试管、试管架、滴管、 载玻片、离心机、显微镜、玻片； 2、试剂 生理盐水； 3、标本 2-4ml抗凝或不抗凝供血者及受 血者血液标本。
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【操作步骤】 1、离心供血者、受血者血液标本，使红细胞与 血清分离。用生理盐水洗涤供血者及受血者红细 胞3次，配成3-5%的生理盐水红细胞悬液。 2、取洁净小试管2支，分别标记为主、次侧 管；
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【实验原理】 由于人类ABO血型抗体是以IgM型为主， 这种抗体可以结合多个盐水介质中悬浮的红细 胞，导致红细胞凝集；也可以激活补体，导致 红细胞膜损伤，出现溶血。此试验主要检查受 血者或献血者血清中是否存在破坏对方红细胞 的不规则完全性（IgM型）或补体依赖性红细 胞抗体；并可以验证ABO血型鉴定是否正确， 确保受血者和献血者血液相容，防止发生急性 输血性溶血反应。
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【操作步骤】
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【实验结果】
1、主侧和（或）次侧管红细胞无凝集或无溶血，表 示受血者和供血者两血盐水介质配血相容，供血者 血液可以输注。
2、若主侧和（或）次侧管或单独1管出现红细胞凝
集和（或）溶血则表明两血不相容，献血者血液不 可供受血者输注。
谢谢！
盐水介质交叉配血
试验原理 将供血者、受血者红细胞和血浆（清）分 别按照交叉配血的试验要求加入到含有抗人球 蛋白试剂的微柱凝胶柱主侧和次侧管的反应室 中，置37℃孵育器中孵育一定时间，如果血浆 （清） 中存在有针对红细胞抗原的IgG或IgM 型血型抗体，经孵育和离心后红细胞将发生凝 集，并形成红细胞凝集团块。
凝胶柱中的凝胶具有分子筛的作用，从 而阻止凝集的红细胞下沉，而留在微柱 的表面。如血清中不含有针对红细胞抗 原的抗体，经过孵育、离心后，红细胞 仍以单个分散细胞形式存在，经离心力 作用顺利通过凝胶分子筛，下沉到微柱 管的底部而形成红细胞扣。
2.由于抗球蛋白试剂在装配试剂过程中已经加入 到凝胶微柱内，进行离心时血清蛋白成分和红 细胞因其各自的重力加速度不同而以不同的速 度通过凝胶微柱，从而消除了血清中未结合的 球蛋白与抗球蛋白试剂结合的可能性，因此使 用凝胶微柱进行交叉配血试验时，红细胞可不 洗涤；且对于阴性的交叉配血试验结果也不再 需要加入IgG型血型抗体致敏的阳性对照细胞 验证阴性结果的有效性。
盐水介质交叉配血
【注意事项】 5、进行盐水介质交叉配血试验时，红细胞悬 液加入血清后，采用立即离心法，即刻观察试 验结果。不宜在室温下放置，以免影响试验结 果。
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【思考题】 1、盐水介质交叉配血试验的优缺点有哪些？ 2、影响盐水介质交叉配血试验的因素及可能 的消除方法是什么？
微柱凝胶介质交叉配血试验
谢谢！
3.试验结果易判定且可靠、直观 4.试验结果易于保存，也可以使用数码照 相留取实验结果存档备用。 5.凝胶介质交叉配血试验的操作容易标准 化，因此能减少不同人员在操作上的差 异，保证试验的准确性；也可以使用全 自动化仪器进行交叉配血试验。
6.不能使用溶血标本进行交叉配血试验。
7.凝胶卡使用前要仔细检查凝胶中有无气 泡、凝胶表面液体是否干涸，凝胶卡外 观正常时才能使用。
标本、试剂与器材 1、标本 采用2人ABO同型的EDTA抗凝 血各3ml。 2、试剂 用于交叉配血试验的抗人球蛋白 微柱凝胶试验卡，红细胞稀释液。 3、器材 移液器、试管架、37℃专用孵育 器（微柱凝胶试验卡）、专用离心机 （微柱凝胶试验卡）
操作步骤 1.离心受血者、供血者血液标本，使血浆 和红细胞分离，用生理盐水洗涤受血者 红细胞3次，再用凝胶卡配套的红细胞稀 释液配成1%红细胞悬液。
【临床意义】 交叉配血试验是输血前检验的必备试验 之一，用于综合性检测供、受者血液的不相容 性，防止发生溶血性输血不良反应。
盐水介质交叉配血
【方法学评价】 盐水介质交叉配血试验仅能检查IgM类 完全性抗体参与的凝集或溶血反应，不适于 IgG的检测，因此临床上不宜单独采用本法进 行配血试验。
盐水介质交叉配血
盐水介质交叉配血
【操作步骤】 3、在主侧管中加入受血者血浆或血清2滴及供 血者红细胞悬液1滴，次侧管中加入供血者血浆 或血清2滴及受血者红细胞悬液1滴，立即混匀； 4、将2支试管放入离心机，以1000×g离心 15s；
盐水介质交叉配血
【操作步骤】 5、取出试管，首先肉眼观察上清液有无溶血现 象，再轻轻摇动试管，直至红细胞成为均匀的混 悬液，观察有无红细胞凝集。 6、取1张载玻片，用滴管分别从主侧管和次侧 管内吸取红细胞悬液各1滴，均匀滴放在载玻片 上，用显微镜观察并记录结果。
试验结果 1.阴性结果 若主侧和次侧管内红细胞均完全沉 降与凝胶管底部，表明受血者与供血者血液相 容，供血者血液可以输给受血者。 2.阳性结果 若主侧和次侧管或单独一侧试管内红 细胞凝集快位于凝胶表面或凝胶中，和（或） 出现溶血，提示受血者与供血者血液不相容。
注意事项 1.凝胶介质交叉配血试验采用凝胶微柱技 术，通过凝胶分子筛作用可以提高交叉 配血试验的特异性和灵敏度。可同时检 出IgG型和IgM型红细胞血型抗体，因 此在临床输血检验中，可以不做盐水介 质交叉配血试验。
2.取出交叉配血试验的微住凝胶抗人球卡 并标记好主侧和次侧孔，撕去铝箔纸， 垂直放置卡槽内。
3.主侧孔内加入供血者1%红细胞悬液 50ul和受血者血浆25ul，次侧加入受血 者1%红细胞悬液50ul和供血者血浆 25ul（先加红细胞悬液后加血浆）。
4.将加样后的微住凝胶卡卡置于专用孵育 器37℃孵育15分钟。 5.取出试剂卡，将孵育好的试剂卡置于专 用离心机离心10分钟。 6.取出试剂卡，肉眼观察结果。
【实验原理】 生理盐水介质交叉配血试验包括主次侧， 主侧检查受血者中是否存在破坏供血者红细胞 的IgM类红细胞抗体或补体依赖性意外抗体， 次侧检查供血者血清中是否存在破坏受血者红 细胞的完全性红细胞抗体或补体依赖性意外抗 体。
盐水介质交叉配血
【实验原理】 生理盐水介质交叉配血试验包括主次侧， 主侧检查受血者中是否存在破坏供血者红细胞 的IgM类红细胞抗体或补体依赖性意外抗体， 次侧检查供血者血清中是否存在破坏受血者红 细胞的完全性红细胞抗体或补体依赖性意外抗 体。
【注意事项】 1、盐水介质交叉配血试验是临床输血前最基 本的相容试验，此试验灵敏度不高，特异性不 强，仅能检测完全性（IgM型）红细胞血型抗 体，不能检测不完全性（IgG型）抗体。在临 床实际工作中，盐水介质交叉配血完成后，必 须增加另外一种可以检测不完全抗体的配血方 法，以保证输血安全。
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