Hb A2 variants
Z 3 : Hb A2, Hb O-Arab Z 2 : Hb C, Hb Constant Spring, Setif HbA2 variant
Z 1 : Hb dA2 Hb aA2, Hasharon Hb A2 variant, Winnipeg Hb A2 variant……
血红蛋白的电泳条带正常范围
Hb A: a2b2
> 96.5 % 主要组成部分
Hb A2: a2d2
< 3.5 %
微量组成部分
Hb F: a2g2 Hb A1: a2b2
< 2 % (traces) 新生婴儿体内的血红蛋白主 要成分
5 to 8 %
Forms obtained by glycation
非正常血红蛋白的检测: 结构异常, 一个或数个氨基酸变异或缺失, 都将会导 致血红蛋白分子的电性发生改变
血红蛋白分子病（Hb Variants）
血红蛋白疾病的区域分布图
Thalassemias
全世界范围内经结构分析证实的异常血红蛋白 日益增多，至90年代初期已达600多种，但仅 不到1／3的异常血红蛋白伴有临床症状。
a-地中海贫血 b-地中海贫血 异常血红蛋白病
地中海贫血检查的临床意义
• 贫血的鉴别诊断__自身免疫性溶血性 贫血与地中海贫血
• 地中海贫血的分型 • 黄疸的鉴别诊断__肝炎与地中海贫血
α－地中海贫血
1．静止型 α－地中海贫血 2．标准型或轻型 3．血红蛋白 H病 4．血红蛋白 Bart’s
常反复出现黄疸Hb。F父=a母2g双2 方常有 －地中海贫血。
ab
d g
b-Thalassemia
Increased HbA2 (4-6%)
中国南方地中海贫血主要分
布区人群中的基因携带率
地区
基因携带率（%）
α-地贫
β-地贫
广西
14.95
1.52
广东*
8.30**
3.36
江西
2.60
0.18
四川
1.92
Hb A2
AFSC 电泳监控条带
HbA HbF HbS
HbA2
HbC
52,7% 21,4% 18,8%
1,3% 5,8%
Hb A
Hb F
HbS
HbC
HbA2
“S”型血红蛋白 Sickle Cells disease
常见区域:
地中海区域国家, 非洲赤道区域国家 (40%), 美洲非裔人群 (10%), 印度西部
2.18
台湾
4.20
1.10
香港
5.00**
3.40
*为广州地区资料；** α地贫1检出率
血红蛋白疾病的研究：
疾病的区域性特征较强。 在检测中发现异常:
(小红细胞症, 血红蛋白过少, Heinz corps,...) 出现无法解释的异常溶血现象.... 对全部家族成员进行血红蛋白的检测.
血红蛋白疾病的检测方法
α－地中海贫血
血红蛋白 Bart’s胎儿水肿综合征
临床表现：该病为 α—地中海贫血中最严重者，胎 儿常于妊娠后期死亡或早产。胎儿生下时，全身水肿， 皮肤苍白，黄疸，肝脾肿大，常于产后数小时内死亡。 父母双方均有 HbH病或标准型 α—地中海贫血。
实验室检查：有溶血性贫血的特征，骨髓红系增生活 跃。红细胞形态靶形红细胞明显增多，外周血可见有核 红细胞。Hb电泳： HbBart成分＞8％，抗碱 Hb增加
筛查方法
MCV （MCH）？
Hb分析 ？
基因诊断 ？
Hb分析筛查CS
HPLC
敏感性
76.2%
(Liao et al. Hemoglobin 2010 34:175)
76.2%
Hb分析筛查CS
Capillary electrophoresis (Sebia Capillarys 2)
Electrophoresis : 醋酸纤维素薄膜电泳／琼脂 糖凝胶电泳)
HPLC : 高效液相色谱法 Capillarys : 高效毛细管电泳法
血红蛋白检测是测量正常血红蛋白的量或异常血红蛋白 当医生怀疑患者有血红蛋白病或贫血查因时 将血红蛋白置于电场中，由于带电量不同，各组分分离开形
Bart’s Hb
Alk
Ac
α －地中海贫血
HbH Hb a HbA
HbC-S α -地贫
a-Thalassemia
其他特征
出生时少量的 (~2%) Hb Bart’s
Hb H 0
Hb A2 正常
Hb F 正常
贫血 0
出身时Hb Bart’s (~5%)
0
正常或减少
正常
0
不稳定血红蛋 白溶血性贫血
胎儿水肿综合征
Chromosome 16


a2
a2
a1
a1
Chromosome 11
HS
HS
1-6
1-6


gG
gG
gA
gA
d
d
b
b
α－地中海贫血
血红蛋白 H病
临床表现：有轻、中度贫血，2／3以上病例有 肝脾肿大，常反复出现黄疸。父母双方常有 α－地中 海贫血。
实验室检查：有溶血性贫血的特征，骨髓中红 细胞系统增生极度活跃. HbH明显增高(2.5％～40％) ，HBA2及 HbF含量正常。Hb电泳可出现 Hb H区带。 红细胞渗透脆性试验降低，红细胞包含体阳性。
2
血红蛋白的化学特性及酶活性
与氧气的结合: 通过将氧气分子固定在二价铁原子上，血红蛋白是将氧
气从肺部运输到人体组织中。 CO2 的运输:
与CO 的结合: 碳氧血红蛋白的形成 (Carboxyhemoglobin formation)。
血红蛋白的氧化作用: 形成高铁血红蛋白
酶活性:蛋白疾病的研究：
在我国南方如何防治地中海贫血是关系到提高我国人 口素质和实现优生优育中的一个重要课题.
目前婚前和孕前的检查、干预是防止这种遗传病发生 的有效手段. 其中血红蛋白(Hb)电泳是研究和分离异常 血红蛋白的有效方法, 亦是诊断血红蛋白分子病不可 缺少的手段之一.
Hb电泳检查的临床意义
Z 7 : Hb F, denaturated Hb S, Hb Porto-Allegre…….. Z 6 : Hb D-Punjab, Hb Philadelphia, Hb Korle-Bu, Hb Lepore,
Hb Köln,denaturated Hb E….
Z 5 : Hb S, Hb Hasharon, Hb Handsworth, denaturated Hb O-Arab. Z 4 : Hb E, denaturated Hb C, Hb Köln, Hb A2 variants, M-Iwate
定位 ：β 基因在11号染色体上，每条染色体上有1个基因
重型b地贫（ b T/ b T），重型b珠蛋白生成障碍性贫 血(Cooley贫血)
半周岁时出现贫血，肝脾肿大 特殊面容:大头、颧骨突出、塌鼻梁、眼距过宽、脸浮肿
轻型b地贫 （ b T/ b N），轻型b珠蛋白生成障碍性贫 血
一般无任何临床症状
血红蛋白检测的临床意义 PRESENTS
血红蛋白的结构
血红蛋白分子是由4条多肽链(珠蛋白链)和4个可以结合铁和氧气的血红素 组成.
GlOBIN (珠蛋白) - 由多肽链组成的蛋白, 根据其不同的氨基酸序列进行分类 (主要分四类: a, b,g 及 d)。 - 这几类多肽链上的大部分结构都是相似的。
正常条带
A
A2
Anh. Car.
3周新生儿的
电泳条带
Alk.
Ac.
Ac.
A0 A1
8周新生儿的 电泳条带
Alk.
Ac.
A F
faible
A2
Anh. Car.
A0 F+A1
N
A0 A1
N
A F
faible
A2
Anh. Car.
A0 F+A1
N
A0 A1
N
毛细管电泳仪上的正常血红蛋白电泳曲线
Hb A
N
Ac.
A0+E
A0
A1+E1
A1
N
Capillarys/Minicap区带识别表
Z 15 : Hb H
Z 14 : // Z 13 : Hb-J Rovigo, Hb N-Baltimore, J-Kaoshiung
Z 12 : Hb Bart’s, Hb Providence, Hb J-Mexico, Hb J-Baltimore….
Cellulose Ep for Hb variants
Agarose gel Ep for Hb variants
HPLC
毛细管电泳工作原理
温控器
检测器 负极 -
电泳…… 氘光源
高电压 10000 V
正极 +
A/E异源基因型
Hb A Hb E Hb A2
Alk. A
E+A2
Anh. Car.
世界卫生组织估计，全球约有1.5亿人携带血
红蛋白病基因，并已将血红蛋白病列为严重危 害人类健康的6种常见病之一。
地中海贫血病
: 一组遗传性的珠蛋白链的合成不对称.
: a-地中海贫血病 : b-地中海贫血病
ab
ab
d
d
g
g
Normal
a-Thalassemia
Hb A=a2b2
b4=HbH
HbA2=a2d2