将病原体中能诱导保护性免疫应答 的目的抗原编码基因克隆后，插入适当 的原核或真核表达载体质粒；
再将重组质粒导入细菌、酵母菌或
哺乳动物细胞中高效表达目的基因；
分离、提取、纯化目的蛋白而制成。
下一步工作计划
四、亚单位疫苗
基因工程疫苗发展的重点
① 不能或难以培养的病原体； ② 有潜在致癌性或免疫病理作用的病原体； ③ 传统疫苗效果差或不良反应大的病原体； ④ 能简化免疫程序、降低成本的多价疫苗。
人工主动免疫 人工被动免疫
输入物质
诱导时间
抗原（疫苗）
慢（1～4周）
抗体或致敏淋巴细胞
快（立刻发挥作用）
维持时间
用 途
长（数月~数年） 短（2~3周）
主要用于预防 治疗或应急预防
疫苗：用于人工主动免疫的生物制品。
一、概述
疫苗：刺激机体免疫系统对某种病 原微生物处于高度戒备状态-“时刻准备 着！”
一、概述
五、活载体疫苗
载体：腺病毒、牛痘病毒、金丝雀
痘病毒、伤寒沙门菌减毒株、卡介苗、
乳杆菌等。
病原体：乙型肝炎病毒、狂犬病病
毒、痢疾杆菌等。
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗 三、减毒活疫苗 四、亚单位疫苗 五、活载体疫苗 六、核酸疫苗 七、植物疫苗 八、治疗性疫苗
四、核酸疫苗
1990年，Wolff等首次发现，给小鼠 肌肉注射裸露质粒DNA后，质粒携带的 基因可被肌细胞摄取并在其中表达，还 可诱生特异性免疫应答。
毒株均为原始毒力很强的毒株，其研发、
检定和将来的生产都必须需在P3级条件下
进行，不能适应规模化生产。 2、尚无有效的动物模型，SARS流行 爆发具有不确定性，各种疫苗的安全性和 有效性的临床前验证较困难。
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗 三、减毒活疫苗 四、亚单位疫苗 五、活载体疫苗 六、核酸疫苗 七、植物疫苗 八、治疗性疫苗
确、稳定、不易发生毒力返祖的优点。
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗 三、减毒活疫苗 四、亚单位疫苗 五、活载体疫苗 六、核酸疫苗 七、植物疫苗 八、治疗性疫苗
四、亚单位疫苗
对于某些抗原性弱、易发生免疫逃 避的病原体，常规疫苗往往难以获得有 效的免疫应答及保护性。 一些免疫保护机制不清，可能诱导 免疫病理反应，有潜在致肿瘤作用的病 毒，以及不易培养的病原体，则难以用 传统方法生产疫苗。
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗
三、减毒活疫苗
四、亚单位疫苗
五、活载体疫苗
六、核酸疫苗
七、植物疫苗
八、治疗性疫苗
二、灭活疫苗
ห้องสมุดไป่ตู้
灭活疫苗（inactivated vaccine）：又
称死疫苗，是用化学或物理的方法，将
具有感染性的完整的病原微生物杀死，
使其失去传染性而保留抗原性而成。
二、灭活疫苗
百日咳、乙型脑炎、流行性脑脊髓 膜炎、狂犬病、伤寒、钩体病、甲型肝 炎、鼠疫、流感、脊髓灰质炎（salk） 等疫苗。
三、减毒活疫苗
减毒活疫苗（live-attenuated vaccine）：
用人工诱变或从自然界筛选出的毒力高
度降低或无毒的活的病原微生物制成的 疫苗。可模拟自然发生隐性感染，诱发 理想的免疫应答而又不产生临床症状。
三、减毒活疫苗
结核病、脊髓灰质炎（Sabin）、麻 疹、乙型脑炎、甲型肝炎、风疹疫苗、 腮腺炎等疫苗。
●
● ●
四、亚单位疫苗
优点：除去了病原体中与诱发保护 性免疫无关或有害成分，只保留有效的 免疫原成分，因而免疫作用明显增强而 稳定，可靠性提高，对机体引起的不良 反应小。 缺点：需要选用佐剂；不能诱发细 胞免疫和黏膜免疫。
四、亚单位疫苗
基因重组亚单位疫苗
(genetic engineering subunit vaccine)
四、亚单位疫苗
亚单位疫苗（subunit vaccine）：不 含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中
和抗体的微生物蛋白或表面抗原而制成
的疫苗。
四、亚单位疫苗
●
白喉类毒素、破伤风类毒素
●
流感嗜血杆菌荚膜多糖、脑膜炎球 流感病毒血凝素和神经氨酸酶
乙型肝炎HBsAg（基因工程疫苗） 人乳头瘤病毒
菌荚膜多糖
三、减毒活疫苗
●
优点：能诱发全面、稳定、持久
的体液、细胞和粘膜免疫应答；一般只
须接种一次；可采用口服、喷鼻或气雾
途径免疫。
●
缺点：有效期短和热稳定性差，
运输、保存条件要求较高；回复突变危
险；使用范围相对窄。
三、减毒活疫苗
基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine）：采用分子生物学技术，去除 与毒力或毒力相关基因片段，使病原微 生物毒力减低或丧失。用缺失突变毒株 制成的疫苗。 与自然突变株（多为点突变毒株） 相比，基因缺失活疫苗具有突变性状明
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗 三、减毒活疫苗 四、亚单位疫苗 五、活载体疫苗 六、核酸疫苗 七、植物疫苗 八、治疗性疫苗
五、活载体疫苗
活载体疫苗（live vector vaccine）： 又称重组载体疫苗（recombinant vector
vaccine），是将有效的目的抗原的编码
基因导入活载体（无或弱毒的细菌或病 毒株）中，构建重组菌株；目的基因可 随重组菌株在宿主体内的增殖而大量表 达，从而诱发相应的免疫保护作用。
疫苗种类
微生物疫苗
一、概述 二、灭活疫苗
三、减毒活疫苗
四、亚单位疫苗
五、活载体疫苗
六、核酸疫苗
七、植物疫苗
八、治疗性疫苗
一、概述
1、疫苗的概念 人工免疫：有计划、有目的地给人 体接种抗原，或输入抗体或免疫细胞， 使机体获得某种特异性抵抗力，从而达 到预防或治疗某种疾病的目的。
一、概述
人工主动免疫和人工被动免疫的比较
二、灭活疫苗
●
优点：易于制备；免疫原性稳定
性高；储存及运输方便；易于制备多价
疫苗；疫苗安全性高。
●
缺点：免疫力维持时间短，需要
多次重复接种；主要诱发体液免疫，不 能产生细胞免疫或黏膜免疫应答；接种 剂量较大，不良反应；需要严格灭活。
二、灭活疫苗
SARS疫苗研究
1、国内全病毒灭活疫苗所用的SARS
人类急需的疫苗：HIV、HBV、HCV
生物武器和生物恐怖：炭疽杆菌、鼠
疫杆菌、天花病毒
一、概述
2、理想疫苗的标准
● ● ●
安全：无致病性和接种后异常反应 有效：可诱导产生可靠的保护性免疫 实用：易于接种、保存和运输，价廉
一、概述
3、疫苗的发展历史 ①古典疫苗时期：牛痘苗、狂犬病 疫苗 ②培养疫苗时期：脊髓灰质炎疫苗、 卡介苗 ③基因工程疫苗时期：乙型肝炎基 因工程疫苗