南京林业大学实验报告
实验四
酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别（一）实验目的
1、观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式；
2、学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法；
3、掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

（二）实验原理
酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物。

无性繁殖主要是出芽生殖。

本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。

美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色。

三）实验器材
1、菌种：酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）培养约2d的麦芽汁斜面培养物；
2、染色液和试剂：0.1% 吕氏碱性美蓝染液；
3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、擦镜纸、显微镜等。

(四）实验方法（美蓝浸片）
在载玻片中央加一滴0.1％吕氏碱性美蓝染色液，用接种环挑取少量酵母菌苔放入上述液滴里，混合均匀；
用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上；
将制片放置约3min，先低倍镜后高倍镜观察酵母形态和出芽情况，并根据颜色区别死活细胞。

（五）注意事项
1、加染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时，菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察；
2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察。

酵母菌死活细胞区别图（10×40倍下观察）
死细胞（呈蓝色或淡蓝色）活细胞（无色）
（六）心得体会：
在制片的时候，先将盖玻片一边与菌液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上，并且要避免产生气泡。

在用美篮染色的时候，注意染色液和菌液不宜过多或过少，并且应该尽量等量而且要混匀。