生药学实验指导汤俊罗毅刘一品编武汉大学药学院2014.9目录实验须知生药学实验规则实验报告的书写与格式实验部分实验一显微标本的制作与植物细胞的显微结构―――――――――――――――――――――――5实验二细胞壁及细胞后含物的检识――――――――――――――――――――――――――――8实验三次生分生组织、基本组织和保护组织特征及相关生药显微鉴别―――――――――――――9实验四分泌组织、机械组织、输导组织特征及相关生药显微鉴别―――――――――――――――10实验五根组织特征及根类生药鉴别―――――――――――――――――――――――――――－11实验六茎、根茎和叶组织特征及相关生药显微鉴别―――――――――――――――――――――13实验七常用生药的一般性状描述―――――――――――――――――――――――――――――15实验八几种生药的性状与显微鉴别及微量升华实验―――――――――――――――――――――17实验九生药学设计性实验：未知生药粉末的鉴别――――――――――――――――――――――20实验十生药学综合实验：生药质量标准的制订―――――――――――――――――――――――21附录1. 常用试剂的配制和使用―――――――――――――――――――――――――――――――――242. 生药的显微化学反应――――――――――――――――――――――――――――――――――243. 若干中药微量升华物特征比较――――――――――――――――――――――――――――――264. 植物细胞壁的特化―――――――――――――――――――――――――――――――――――265. 绘图方法与要求――――――――――――――――――――――――――――――――――――276. 2010年版中国药典I部附录药材和饮片检验通则――――――――――――――――――――――31实验须知生药学实验规则（一）实验目的通过实验加深理解，复习巩固课堂所学理论，学会鉴定生药的真伪、优劣的方法，通过基本理论的学习和基本技术的训练，掌握生药的经验鉴别方法和现代科学的鉴别方法，培养实际的工作能力和严肃认真的科学态度。

（二）实验主要内容1原植（动）物组织的形态、显微观察，学习鉴定生药的植（动）物来源；2学习性状鉴定的经验鉴别方法，主要用眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等手段，鉴别生药的形、色、气、味、质地、断面等特征，判断生药真伪和优劣；3显微鉴定是指将生药制成不同的显微制片，用显微镜观察其组织构造、细胞形态以及内含物的特征，判断生药真伪的鉴定方法；4理化鉴定是指利用生药所含的某种或某类化学成分，通过物理或化学性质来鉴定生药的真伪、优劣的一种鉴定方法。

（三）实验注意事项1进实验室前，必须预习实验内容，明确实验目的，了解实验的基本原理、内容和方法。

准备好各种自备的实验用品，如：铅笔（H、各一支）、橡皮擦、直尺、报告纸等。

2实验中应保持安静，严禁抽烟、饮食，不许大声喧哗，不得擅自离开操作台。

3实验要严肃认真，精力要集中，观察仔细，真实记录。

4实验开始前，教师进行讲解和提问时，应注意听取，并做好必要的记录。

5实验过程中，应当随时将观察所得现象、测量和称量的数据及结果等写在报告纸上，应当养成能随时作出准确、清楚、整齐的记录而不需要誊抄的良好习惯，测量和称量数据，禁止用另外纸片记录。

6实验中应爱护显微镜和一切工具，不得随意浪费实验材料和药品；实验室桌面应随时保持整洁，非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。

7实验报告必须在实验室内完成，不得抄袭；实验完毕时，按时交实验报告。

8每次实验完毕后，把实验用仪器、用具等收拾干净放在指定的位置。

切片要从载物台取下，归还切片盒内，桌上一切用具应拭洗干净，并归还原处。

学生轮流值日，值日生负责最后清扫实验室地面、清理桌面、擦净黑板及指定的其他工作。

离开实验室前一定要检查水源、电源、门窗等是否关好。

实验报告的书写与格式（一）实验报告的书写要求1．按照每次实验报告的要求，在纸上绘图或写成报告。

2．实验报告要求条理清楚、重点突出、结论准确。

3．绘图的实验报告，要求书面布局合理、图形真实、结构清晰。

绘图时，估计每次实验中需绘图数目的多少，在纸上适当分配绘图位置，图的排列要求整齐清洁。

4．绘图要求线条流畅、粗细均匀、明暗一致。

5．所绘组织简图各部分的表示应遵循通用的代表符号。

6．绘完图后，用细直、均匀的平行直线从图的右边引出，对齐，注明各结构名称，可以直接用文字，也可以用数码代注，或在图下说明。

7．每一幅图都应在其下方注明药材的名称、部位以及放大倍数。

8．绘图时应力求真实，字体端正，不得抄袭书本或他人作业。

（二）实验报告格式1. 实验名称2. 实验目的3. 实验过程及数据、现象记录4. 实验数据分析、误差分析、现象分析（如有）5. 回答思考题实验一显微标本的制作与植物细胞的显微结构一、目的要求：1．了解显微镜的构造，掌握使用显微镜的方法；2．学习并掌握显微标本的制作（临时装片）方法及植物细胞的基本构造；3．学习显微绘图的方法。

二、实验仪器与材料：1．仪器显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、酒精灯2．试药蒸馏水、水合氯醛、稀甘油、乙醇3．材料洋葱、党参、夹竹桃叶、大黄粉末三、内容与方法：（一）显微镜的构造机械部分1．镜座：显微镜的基底部分，常为马蹄形，用以固定支持全镜。

镜柱：连于镜座的直立支持部分。

镜臂：装于镜柱上，镜柱与镜臂之间有一倾斜关节，可使镜臂转动，中部稍弯曲，为握取部分，上端与镜筒附着器相连。

调节轮：是调节镜筒升降的齿轮，分大小两种，装在镜附着器两旁较大的一对为大调节轮，顺时针（向内）方向转动。

镜筒下降。

逆时针（向外）方向转动。

镜筒上升，旋转一周，可使镜筒升降10的距离。

小调节轮装在大调节轮的下方，旋转一周，只使镜筒升降0.1的距离。

（注意：小调节轮构造精细。

不宜转动过多，操作时先用大调节轮调至看到标本后，再用小调节轮调至正确的焦点）。

转换器：装在镜筒的下方，具有安装接物镜的孔，转动转换器，可以更换接物镜。

载物台：放置标本的方形或圆形平台。

中央有一透光孔。

台上有压片夹或机械推进器，用以固定和调节玻片的位置。

2．光学部分：镜筒：为中空的圆筒，以镜筒附着器与镜壁相连，其上端的孔放入接目镜，下端装有转换器。

接目镜：装在镜筒的上端，点上刻有5×、10×、15×等字样，表示放大倍数。

观察时镜中所见的范围，称为视野。

接物镜：装在转换器上，通常有三种，低倍镜（5×、8×、10×、15×），高倍镜（40×、45×、60×等）。

油镜（100×）。

放大倍数等于接目镜和接物镜放大倍数的乘积。

聚光器：位于载物台下方，用以聚集来自反光镜的光线，使照射于标本物体上，聚光器常可上下移动，器中装有虹光圈操纵杆，可使虹彩光圈口径缩小或扩大，以调节光线，光线强时，降低聚光器或缩小光圈，光线弱时上升聚光器或放大光圈。

有些显微镜没有聚光器，只有虹彩光圈或以光圈板代替虹彩光圈的。

反光镜：为一圆形双面镜，有活动关节，能够转动，用以收集来自不同方向的光线，射于聚光器上，在光线强时使用平面镜，光线弱或用主倍镜时使用凹面镜。

（二）显微镜的使用低倍镜的使用：1．从镜箱中取出显微镜时，以右手执镜壁，左手托镜座，镜筒直立向上，将显微镜平置于桌上座位的左前方，距桌旁二寸左右。

2．旋转转换器，将低倍接物镜对准载物台圆孔，用左眼（右眼也张开）在接目镜上观察，将反光镜转向光镜，并调节光圈，达到视野光线清晰明郎，成为均匀的白光。

3．用肉眼在玻片标本上找到检视物，然后将玻片标本置于载物台上，使检视物对准透光孔，用压片夹将玻片固定。

4．从侧面观察物镜与玻片之间的距离，顺时针方向转动大调节轮，使低倍镜几乎到达玻片（切勿使接触，以免损坏镜头及玻片）。

然后在接目镜上观察，再慢慢逆时针方向转动大调节轮至看到放大的物象，若所观察部分不在视野中心，则移动玻片，使之适中，转动小调节轮，直至物象最明晰为止。

5．在视野中看到的是检视物的倒象，因此在移动玻片时要向相反的方向移动。

高倍镜的使用：1．在低倍镜找到物像后，将需要放大部位移至视野中央。

2．从侧面观察。

转向转换器。

转换高倍镜（若物镜太长，则提主镜筒再转换。

以免损坏镜头或压破玻片）。

这时如果已能看到模糊的物象，则微微转动小调节轮，便可看见清晰的物象。

（三）使用显微镜的注意事项1．携镜时，必须右手握紧镜壁，左手托住镜座，切不可一只手提取。

2．放置显微镜时要轻，勿离桌边太近，镜体的倾斜度不得超过30°，以防止倾倒坠地。

3．勿使污物，水、药品等沾污镜的各部分。

保持显微镜的清洁，不得用手或纱布擦镜头，须用擦镜纸细心抹擦。

4．观察新鲜材料时，要盖盖玻片；加热的玻片，须放冷后才观察。

5．用高倍镜时，用毕后，先转开物镜，然后撤除玻片。

6．显微镜用毕后，撤下玻片。

转动转换器，使两物镜呈现“八”字形，然后下降镜筒，使物镜与载物台相接，竖直反光镜，然后放入镜箱。

（四）显微标本片的制作1. 徒手切片法：为生药显微鉴定的常用制片方法之一。

本法操作简便，节省时间，只须一刀片即可切成薄片，不染色或经简单染色，用水封片后观察，具体方法如下。

取新鲜材料或预先固定好的或软化的材料一段，长约2；坚硬的材料可用水煮、50％乙醇：甘油(1：1)浸泡，软化后再切片。

若材料过软时，则可置70％—95％乙醇中浸泡20-30。

切片时，以左手的拇指和食指夹住材料，中指顶住材料的底部，左臂贴身，左手固定不动，将材料上端露出食指约2~3，不宜过长，用右手的拇指和食指挟持刀片的两侧，使刀片呈水平方向（与材料横切面平行）移动右臂使刀口向内自左前方，向右后方拉削，便可切成薄片，切勿来回拉锯，要一次切下，中途不能停顿，切时可先在材料切面或刀刃上润湿，切下的薄片用湿毛笔刷下放入有水的培养皿中备用，选取最薄的切片放在载玻片上观察，也可用0.1％番红溶液给细胞核及木质化、栓质化的细胞壁染色后，再观察。

刀片用后立即擦干水分或再涂上液体石蜡，下次备用。

试以党参进行如上实验。

2．表面制片法本法适用于观察叶片、花萼、花瓣、雄蕊以及浆果、草质茎及根茎等的表皮显微特征。

较薄的材料可整体封藏，其他材料可撕取或削取表皮制作。

若为干的材料．如较薄的叶（如薄荷叶）、花类生药可用冷水浸泡至能伸展、恢复原样后，用刀片在表面轻轻浅划一刀，用小镊子从切口处撕取表皮，切去带表皮下部组织的那部分表皮。

若为较软的浆果类，可直接削取表皮；如较硬的则需要软化处理。

最后用水合氯醛试液透化，加甘油封藏。

试以夹竹桃叶或薄荷叶进行如上实验。

3．粉末制片法本法用于制备粉末状生药、以生药粉末制备的中成药及其原料药材粉末的显微鉴定制片法，是生药显微鉴别中最常用的制片方法之一。