免疫应答主要分为哪几个阶段？1)识别阶段 2)活化与增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官与外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟得场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答得场所。

如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。

T细胞、B细胞与NK细胞得主要功能分别就是什么？1)T细胞: 介导细胞免疫,辅助体液免疫。

2)B细胞: 产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。

根据作用方式及其特点得不同,机体存在两类免疫简述各自得概念与特征？1)先天性免疫或固有性免疫,就是个体出生就是就具有得天然免疫,可通过遗传获得,就是机体在长期进化过程中逐渐建立起来得主要针对入侵病原体得天然防御功能。

其主要特征就是反应迅速,针对外来异物得范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。

2)适应性免疫,就是个体出生后,接触到生活环境中得多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来得后天免疫,也称获得性免疫。

其主要特征就是针对某个特定得异物抗原而产生免疫应答,开始得应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原得效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。

简述抗原抗体反应得原理。

答:抗原与抗体能够特异性结合就是基于抗原表位与抗体超变区分子间得结构互补性与亲与性,这种特性就是由抗原、抗体分子空间构型所决定得,它们之间得结合就是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面得结合简述抗原抗体反应得类型。

答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生得凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生得沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致得细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致得中与反应;⑤免疫标记得抗原抗体反应等。

什么就是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离得抗体或抗原,形成得沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。

影响抗原抗体反应得环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?答:环境条件包括:电解质,酸碱度与温度。

稳定条件:①电解质:常用O.85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体得稀释液及反应液;②酸碱度:pH过高或过低都将影响抗原与抗体得理化性质,抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行;③温度:一般以15, 40℃为宜,最佳反应温度为37℃。

简述单克隆抗体制备技术得主要步骤。

单克隆抗体就是应用B细胞杂交瘤技术进行制备得,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞得选择与制备、细胞融合、杂交瘤细胞得筛选与克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体得纯化与鉴定。

试述免疫血清应如何进行纯化。

免疫血清得纯化主要就是指提纯免疫血清中得IgG并去除无关得杂抗体。

提纯IgG类抗体得方法有:硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法与亲与层析法,采用亲与层析法提取IgG时,可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。

另外,还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。

方法就是将不含特异性抗原得杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂,以吸附免疫血清中得杂抗体,或将杂抗原交联于sephamse 4B上,通过亲与层析去除杂抗体。

叙述杂交瘤技术得基本原理。

杂交瘤技术就是在细胞融合技术得基础上,将具有分泌特异性抗体能力得致敏B细胞与具有无限繁殖能力得骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞得特性,即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖,经过克隆化后成为单个细胞克隆,分泌得抗体即为单克隆抗体。

简述间接血凝试验得基本原理。

间接血凝试验就是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人得0型红细胞或绵羊、家兔得红细胞制成抗原致敏得红细胞,与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在得条件下,经过一定时间可出现肉眼可见得红细胞凝集现象,又称被动血凝试验简述抗人球蛋白试验得原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上得应用。

Coombs试验又称抗人球蛋白试验,其原理就是不完全抗体多半就是7S得IgG类抗体,能与相应得抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应,利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合得特异抗体,可使红细胞凝集。

Coombs试验有二种类型:(1)直接Coombs试验:用于检测红细胞结合得不完全抗体。

(2)间接Coombs试验:用于检测血清中游离得不完全抗体。

抗球蛋白试验主要应用于那些方面？①输血:对于“危险”受体(指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合得妊娠而可能产生免疫性血型抗体得人)得配血试验必须包括各种不完全抗体得检查,以抗球蛋白法最为可靠。

②血型抗原抗体得检查:主要检查Rh—者,其体内就是否有抗-D抗体,应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性得供体血液作常规检查。

最可靠与灵敏得方法就是将待检D 阴性得红细胞与高效价得不完全抗-D 血清混合,然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。

③对新生儿溶血性贫血性疾病得诊断:母体产生得最常见得免疫性抗体为Rh 抗体与ABO 抗体,一般为7S 得IgG,可通过胎盘屏障,作用于胎儿红细胞,引起新生儿溶血性疾病,可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。

④对溶血性贫血得研究:获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞得抗体存在。

⑤对细菌或立克次体得不完全抗体得检查。

Coombs 试验还可采用专一性特异性得抗球蛋白得血清,如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等,分析结合于红细胞上得不完全抗体免疫球蛋白得亚类。

什么就是协同凝集试验？主要用于何种检测？协同凝集试验与间接凝集反应得原理相类似,但所用得载体为金黄色葡萄球菌。

这种细菌得细胞壁中含有A蛋白(SPA),SPA 能与特异性抗体IgG 得Fc段结合(IgG3除外)。

抗体得F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌得表面,仍保持与相应抗原特异性结合得特性。

当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时,就成为抗体致敏得载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。

可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原得检测。

何谓间接凝集反应？将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关大小适当得颗粒表面,使之成为致敏载体颗粒,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适宜电解质存在条件下,出现特异性得凝集现象,称为间接凝集反应间接凝集反应如何进行分类？各试验得原理就是什么根据致敏载体用得就是抗原或抗体分为正向间接凝集试验与反向间接凝集试验;根据载体种类,分为间接血凝试验与胶乳间接凝集试验;根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验与协同凝集试验。

间接凝集试验就是用抗原致敏载体检测标本中得相应抗体。

将可溶性抗原与载体颗粒结合,再与标本中得抗体反应,通过抗体桥联,形成肉眼可见得凝集颗粒或凝集块,为阳性反应。

反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中得相应抗原。

用特异性抗体致敏颗粒,与样品中得待检抗原反应,通过抗原桥联,形成肉眼可见得凝集为阳性。

临床上用于检测HbsAg、AFP 等。

间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏得颗粒载体及相应得抗体,用于检测标本中与致敏抗原相同得抗原。

将标本与抗体试剂相反应,然后加入致敏抗原,若出现凝集现象,说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象,则说明待检标本中含有相应抗原,凝集反应被抑制。

同理,用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂,检测标本中得抗体,称为反向间接凝集试验。

协同凝集试验与间接凝集反应得原理相似,但所用载体为金黄色葡萄球菌,该菌细胞壁上得SPA 能与特异性抗体得IgG 得Fc 段结合(IgG3除外),抗体得F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌得表面,仍能与相应抗原特异性结合。

当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时,就成为抗体致敏得载体颗粒,若与相应抗原接触,即出现反向间接凝集反应。

间接血凝试验就是以红细胞作为载体得间接凝集试验,用已知得抗原或抗体致敏红细胞,然后与样品中得抗体或抗原在适宜条件下反应,出现红细胞凝集者为阳性。

根据红细胞凝集得程度判断阳性反应得强弱。

胶乳凝集试验就是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体得间接凝集试验。

HAT培养基筛选杂交瘤细胞得机制就是什么？答:1、淋巴细胞:不能生长,5到7天死亡;DNA得主要合成途径被A阻断2、骨髓瘤细胞:不能生长,5到7天死亡;HGPRT缺乏,DNA合成得旁路途经受阻3、骨髓瘤细胞与脾细胞融合形成杂交瘤细胞,可长期生长繁殖。

利用淋巴细胞得HGRT将Ｈ合成为嘌呤碱并最终与Ｔ一起合成ＤＮＡ从淋巴细胞获得产生某种抗体得遗传信息,从骨髓瘤细胞获得不断繁殖得能力简述免疫系统得三个生理功能。

答:免疫系统得三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御:就是机体排斥外来抗原性异物得一种免疫保护功能。

该功能正常时,机体可抵御病原微生物及其毒性产物得感染与损害,即抗感染免疫;异常情况下,反应过高会引起超敏反应,反应过低或缺失可发生免疫缺陷。

免疫自稳:就是机体免疫系统维持内环境稳定得一种生理功能。

该功能正常时,机体可及时清除体内损伤、衰老、变性得细胞与免疫复合物等异物,而对自身成分保持免疫耐受;该功能失调时,可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。

免疫监视:就是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞与病毒感染细胞得一种生理功能。

该功能失调时,有可能导致肿瘤发生,或因病毒不能清除而出现持续感染。

决定抗原抗体最佳配比得方法有几种?(1)抗原稀释法:将可溶性抗原作一系列倍比稀释,然后向各管中加入一定浓度得适量抗血清,37℃反应后,产生得沉淀量随抗原量变化而不同,以沉淀物最多得管为最适比例管。

(2)抗体稀释法:就是将恒定量抗原与不同倍比稀释得抗体反应,出现沉淀物最多得管为抗体最适比例管。

(3)棋盘格法:亦称方阵法。

抗原抗体同时稀释,可一次完成抗原与抗体得滴定,并找出抗原、抗体得最适比。

就是前二法得结合简述单向免疫扩散试验得基本原理与技术要点。

(1)原理:待测抗原从局部含有定量抗体得凝胶内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适得部位,形成白色沉淀环,沉淀环得大小与抗原得浓度呈正相关。

(2)技术要点:将抗体与热融化琼脂(约50％)混合,倾注成平板。

待凝固后在琼脂板上打孔,孔中加入已稀释得抗原液,与不同浓度得抗原标准品,置37~12温箱,24～48h后观察孔周围沉淀环。

量取沉淀环直径,通过抗原标准品,计算待测抗原得浓度。

在双向免疫扩散试验中,如何判定结果?双向免疫扩散中,出现沉淀线,表明存在相应得抗原、抗体,不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。

沉淀线得形成就是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体含量高;靠近抗体孔,提示抗原含量较多免疫电泳技术得优点就是什么?免疫电泳有哪些用途?1)优点:免疫电泳技术就是将免疫扩散与电泳相结合得一种免疫学分析技术,既有抗原抗体反应得高度特异性,又有电泳分离技术得快速、灵敏与高分辨力,广泛应用于牛物医学领域。