观察项目
• （3）连续收集5个样品并测定其排酸量作为实验对照，再 静脉推注1g/L的阿托品0.1ml/kg，连续收集5个样品，测 定其胃酸排出量。 • （4）在收集对照样品后，静脉推注10g/L酚妥拉明 0.1ml/kg，连续收集5个样品，测定其胃酸排出量。 • （5）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激腹腔神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。 • （6）在收集对照样品后，用一次性使用外周神经丛刺激 针刺激迷走神经节，连续收集5个样品，测定其胃酸排出 量。
机能学实验
家兔胃液分泌的 调节
一、实验目的
本实验采用麻醉状态下家兔灌流方法，测定 胃酸排除量，观察各种因素对胃酸分泌的影 响并掌握其作用途径。
实验原理
胃上皮和胃底腺立体模式图
胃底腺 （泌酸腺）
•胃底腺由壁 细胞、主细 胞、颈粘液 细胞、内分 泌细胞和干 细胞组成。
胃液分泌的神经调节机制
副交感神经 （迷走神经）
实验步骤
• （4）食管插管
• 钝性分离气管下方的食管（切勿损伤颈部神经），剪开食 管并插入食管插管至胃，用丝线固定食管插管。
• （5）幽门插管
• 沿剑突下方正中线切开腹部皮肤肌肉（切口长约2cm，打 开腹腔，轻轻拉出十二指肠），在距胃幽门约1.5cm处结 扎十二指肠幽门端的丝线，打一个松结备用。在两线之间 剪开十二指肠，并将幽门插管插入胃内，立即结扎固定， 尽量不要用插管刺激胃壁。
实验步骤
• 1、手术操作
• （1）麻醉与固定
近心端
耳廓
耳
慢！
耳缘பைடு நூலகம்脉
面
廓
背
进针位置
远心端
实验步骤
• （2）气管插管
倒“T”形切 口
实验步骤
• （3）右颈外静脉插管
• 将气管两旁的肌肉拉开，用左手拇指和食指捏住颈部左侧 缘皮肤切口，其余三指从皮肤外向上顶起外翻，可清晰的 看见位于颈部皮下，胸骨乳突肌外缘的颈外静脉。沿血管 走向，用玻璃分针钝性分离颈外静脉二侧的皮下筋膜，仔 细分离3～5cm长，在血管的远心端穿丝线，在靠近锁骨 端用动脉夹夹闭颈外静脉的近心端，待血管内血液充盈后 用手术线结扎颈外静脉的远心端。靠远心端结扎线处用眼 科剪向心方向呈45度角在静脉上剪一“V”型小口（约为管 径的1/3或1/2），用弯型眼科镊挑起血管切口，向心插入 导管2.5cm。用线将血管和插管结扎在一起，此线在导管 固定处打一活结，绕导管二圈打结固定。 缓慢输生理盐 水，以维持体液量。注意插管前应排空管道中气泡，插管 前端须安置三通管供注射药物。
多→促进胃液分泌，与对照样品相比胃酸排出增加。
注意事项
• （1）麻醉剂注射应缓慢，为保证胃液分泌，家兔不宜麻 醉太深。 • （2）食管插管插入胃时插管前端不能尖锐，以免损伤食 管和胃粘膜。 • （3）幽门插管时，应注意切勿损伤胃和十二指肠周围的 神经和血管。 • （4）滴定终点以样品刚好变红，摇之能维持10s以上不退 色为准。每次滴定颜色要一致，滴定结果由同一个同学判 定为宜。 • （5）因家兔的迷走神经很细，容易拉断，分离时要非常 细心。 • （6）手术过程中应注意保持家兔体温和环境温度稳定， 切忌用力牵拉大小网膜和肠胃。
实验步骤
•用手指轻轻触摸 胃，检查胃内是否 有食物残渣，若胃 内有固体物，则要 在胃大弯侧切开胃 体，取出胃内食物 团，并用蘸有温热 生理盐水的棉签将 胃内食物残渣清除 干净，然后缝合胃 切口。 •用少许37℃生理 盐水从食管插管注 入胃内，用手指轻 压胃体，观察幽门 插管出口是否通畅、 流出液有无食物残 渣和血液，如出口 通畅即手术成功。 •分离腹腔神经节和 迷走神经，分离后 分别在各神经节下 方穿不同颜色的线 以备用。 将家兔体位由仰卧 位改为侧卧位，在 手术后20～30min 后开始测定胃酸分 泌情况
观察项目
• （1）用注射器将37℃生理盐水10 ml从食管插管注入胃内， 同时用三角瓶收集幽门插管流出的液体，每10min注入一 次并收集样品。在每个样品中加入酚红1~2滴，用 0.01mol/ L NaOH溶液滴定至刚好变色，按下式即可计算 出每10min胃酸排出量： • 10min胃酸排出量（μmol/10min）=中和胃酸用去NaOH 量（ml）×浓度（mol/L）×10 • （2）基础胃酸分泌量测定：收集并测定3个以上胃酸样品， 待连续3个样品数值接近后，即可进行下列实验。
（ +）
Ach
壁细胞M3受体
胃酸分泌
（ +）
促进释放组胺、 促胃泌素分泌
交感神经 （腹腔神经节）
NE
(-)
胃酸分泌
α受体
实验对象
• 取经12h禁食不禁水的家兔一只，体重 2.0~3.0kg，雌雄不拘。
实验器材和药品
• 兔手术台，哺乳动物手术器械1套，食管插 管，气管插管，幽门插管，静脉插管，三 通管，输液架，输液瓶及输液管，微量滴 管，三角瓶，棉签，缝合针及缝合线，有 色丝线，注射器（20ml）及针头，一次性 使用外周神经丛刺激针，生理盐水，1g/L阿 托品，10g/L酚妥拉明，20%乌拉坦， 0.01mol/ L NaOH溶液，1%酚红。
• 注：每组学生在上述观察项目第（2）至 （7）项中，可选择第（2）项与其他另外 一两项进行实验，然后将各组结果汇总并 进行比较分析。
预期结果与分析
• （1）注射阿托品：M 受体阻断，乙酰胆碱不能与壁细胞 上的 M3 受体特异性结合，胃酸分泌抑制，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （2）注射酚妥拉明：α受体阻断，去甲肾上腺素不能与α 受体特异性结合，抑制胃液分泌作用减弱或消失，胃液 分泌增加，与对照样品相比胃酸排出增加。 • （3）刺激腹腔神经节：交感神经兴奋→去甲肾上腺素释 放增多→抑制胃的兴奋，抑制胃液分泌，与对照样品相 比胃酸排出减少。 • （4）刺激迷走神经：副交感神经兴奋→乙酰胆碱释放增