3-1 柱的结构
1、堵棒（或导管）
2、接头
3、接头
4、密封圈
5、螺帽
6、柱密封圈
7、柱管
8、柱填料9 10、过滤片
3-2 柱的分类：
根据所有的担体材料分为三种：
a.硅胶型：机械强度高，易制成小颗粒，理论塔板数高。

b.聚全物型：在广泛的PH值范围内稳定
c.羟基磷灰石型：对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。

根据分离方式分类：
a.硅胶型
1）正相：SIL－－磷脂、NH －－糖、维生素E，CN－－甾类激素。

2）反相：ODS（C18）、（C8 CN TMS Pheny1）低分子量化全物。

3）离子交换：
WAX（弱碱阴离子交换）－－核苷酸、蛋白质
WCX（弱酸阳离子交换）－－蛋白质
SAX（强碱阴离子交换）－－核苷酸
SCX（强酸阳离子交换）－－儿茶酚胶
4）凝胶过滤：
Diol－－蛋白质GF－－
蛋白质
b.聚合物型：
1）反相：ODP－－50－－肽，蛋白质，低分化合物。

2）离子交换：ISC－－氨基酸，胍类化合物，ISA－－糖，IC－－无机离子，PA－－蛋白质，ES－－蛋白质。

3）配位交换：SCR（磺化聚苯乙烯）－－糖。

4）离子排阻：SCR-101H 102H －－有机酸
5）凝胶过滤：ION－－多糖GS－－水溶性分子
6）凝胶渗透色谱（GPC）：GPD
－－合成分子、橡胶。

7）羟基磷灰石型：HPC－－蛋白质、核苷酸
按尺寸分类：
1.制备：30mm 50mm 内径，半制备：20mm内径。

2.分析：标准型柱：4_8mm内径。

快速色谱柱：3mm内径、5cm长、4.6mm内径。

小孔径柱：2.5mm内径，微孔径柱1mm内径。

3-3柱的技术指标
*耐压：不小于40Mpa。

*渗透性：反相－－流动相甲醇1ml/min，压力3Mpa。

正相－－正乙烷1ml/min,压力3Mpa.
*柱效：理论塔板极数>3x103。

*对称柱：葸峰不对称因子AS在0.8~2.0范围内。

*外观：光洁、标牌、尺寸、填充剂、流动相方向、日期等。

ODS柱
ODS（C18）色谱柱是将十八烷基键合在担体的表面，然后填充的柱，在HPLC中应用广。

在HPLC中反相色谱的引用占70%，其中极大部分使用的是ODS（C18）。

本公司所附的柱也是ODS（C18）柱，内径4.6mm,长度150mm。

一般反相色谱系统，流动相为极性溶剂，如水、甲醇、乙腈，非极性固定相，如十八烷基。

反相系统简单，重复性好，柱子能长期稳定工作，能完成分离、分析任务的60-80%，所以分析工作者使用得最多的是反相柱。

柱的使用和维护
由于柱的质量直接影响到样品组分得分离情况，组分的定性，定量分析，所以在操作时必须十分注意。

通常柱子损坏表现为：柱压升高，柱效下降，保留值改变，峰形崎变等。

以反相为列，它要求填料处于甲醇或乙腈中，不使柱子干枯，并注意下列
事项：
* 勿使柱子受较强振动
* 较长时间不用时，应在柱中充满甲醇，并把两头封死，尽量不使干枯。

* 当用水和甲醇（或乙腈）混合液体溶剂时，工作结束后必须用纯甲醇冲洗30分钟至1个小时，使柱子处于甲醇中，因水易繁殖微生物，使柱子堵塞，并降低柱效。

* 当使用KH2PO4等缓冲液时，盐的浓度宜低，否则盐容易析出，柱效降低，柱压升高，使用后必须用水冲洗（绝不能用甲醇冲洗）使缓冲液全部溶于水排出，然后再用
甲醇冲洗。

* 硅基固定相不宜在PH>8时使用，此时容易产生絮状物析出，堵塞柱子。

* 当流动相呈酸性时，使用后必须用水冲洗，因酸使柱效降低，后再用甲醇冲洗。

* 流动相最好经过过滤处理。

* 样品最好也经过过滤处理。

* 样品有时能复盖填料得活性点，使柱压升高，保留时间下降，防止方法是样品经过过滤。

* 样品组分的不可逆吸附，使柱压升高，柱效降低（通常易被吸附的有蛋白质、糖）防止方法是加保护柱
和溶剂反冲，最常用的是四氢呋喃。

* 当流动相从A换到B时，A、B不相溶，必须选择一能同A、B互溶剂C，先换成C再把C换成B，最常用的中间液是异丙醇。

* 由于长期使用，在较大的压力下，担体破裂而流失在柱前端形成一段空隙，使柱效下降，峰形畸变。

维护方法：卸下接头，用甲醇把填料调成糊状，填入柱内，同时将过滤片用超声波清洗机清洗一次。

各种柱特点
Hypersil Silica
作为大多数键合相的基质Hypersil Silica(Hypersil硅胶)在使用过程中极具耐久性及重现性.未经键合的硅胶(SiO2,Silica)色谱柱对于非极性和中性有机物的正相色谱分析非常有效。

HypersilODS(C18)
HypersilODS(C18)是硅胶基质上键合了C18为官能团的色谱柱填料,是典型的高效液相色谱柱用
填料,适合于分析非极性和中性样品,包括酸性,中性及亲脂性化合物。

HypersilMOS和MOS2(C8)
HypersilMOS和MOS-2(C8)在硅胶的表面键合单层C8烷基链,所得的色谱填料效率高、重现性好,其中MOS-2对硅胶表面作了二次衍生反应即封尾(End-capping)。

MOS和MOS-2的选择性与ODS相似,但保留时间短,这有利于实现快速分析,尤其是对强疏水性分析物。

HypersilPhenyl(C6H5)
Hypersil Phenyl(C6H5)色谱填料适用于反相色谱,对芳香族和中性
化合物的分析具有独特的选择性,其保留行为与HypersilMOS相似,但选择性相反,尤其是对芳香烃和稠环烃.Hypersil Phe-nyl-2是进行过封尾处理的填料.
HypersilSAS(C1)
Hypersil SAS(C1)是采用短烷基链(C1)为官能团的硅胶键合固定相,因而在Hypersil烷基键合相中保留时间最短.HypersilSAS对极性分析物和多官能团化合物具有独特选择性,已成功地应用于离子对色谱的分离。

HypersilCPS(CN)
HypersilCPS(CN)为氰丙基官能团硅胶键合填料,该色谱柱可应用于正相和反相色谱.Hypersil,CPS-2为封尾固定相.正相色谱模式
时,HypersilCPS色谱柱与HypersilSilica和HypersilAPS的选择性相反,并且平衡速度快,不会被少量的水钝化;反相色谱模式时,氰基柱的选择性可补偿烷基I键合相和低疏水性。

HypersilAPS2(NH2)
Hypersil APS-2(NH2)是可以进行多种色谱模式的氨丙基官能团硅胶色谱填料，在弱阴离子交换、正相及反相色谱中均表现出很好的色谱性能。

用Hypersil APS-2作弱离子交换分析阴离子和有机酸时,可以使用普通缓冲液和有机改性剂,而正相色谱模式时,Hypersil APS-2与硅胶(SiO2 Silica)色谱柱的选择性相反.HypersilAPS-2柱尤其适于糖类样品的反相色谱分析。

Hypersil SAX
Hypersil SAX是高度稳定的强阴离子交换的硅胶为基质材料
的色谱填料，专门为使用含水和低pH 值流动相时设计,适合分析小分子的有机酸。

Hypersil SCX
Hypersil SCX是可靠的强阳离子交换的硅胶为基质材料的色谱填料，适合分析小分子的有机碱。

象其它的Hypersil固定相一样，Hypersil SAX和Hypersil SCX也进行了严格的质量监控以确保具有良好的重现性。

Hypersil 100
为了分析保留时间较长的物
质，Hypersil公司专门设计并生产了Hypersil 100,其特征是扩大了硅胶表面积和孔容.随着硅胶表面积的增大,色谱柱的分离能力也随之增大,同时使保留时间相近的谱峰得到分离,尤其是对高浓度的样
品.Hypersil100选择性与Hypersil BDS相似的技术,但更加适合于分析保留时间更长的样品.Hypersil 100键合固定相含碳量高、稳定、耐用,采用均匀的窄孔球型填料,具有效率高、重现性好、操作压力低及柱寿命长等优点。

Hypersil 100色谱柱是分析许多化合物的理想选择,包括有机
酸、维生素和碱性化合物;同时Hypersil 100填料也适合摩尔质量达5000道尔顿的肽和多肽的分析。

Hypersil 100担体范围广泛,包括硅胶、C18、C8、C4、氨基、氰基和苯基。

对于制备性分离，Hypersil 100可直接放大到HyperPrep HS。

HypersilGreenENV
Hypersil Green ENV色谱柱专门用于分析工业和农业残留的极性污染物。

即使在分析物浓度很低的条件
下,Hypersil Green ENV对苯酚、邻苯二甲酸酯及除草剂都有极好的选
择性和重现性。

Hypersil Green PAH
Hypersil Green PAH色谱柱采用高碳量填料专门用来PAH污染物的分离。

填料的粒度有3和5um两种，设计多种柱型以优化分离速度、分离度和灵
敏度。

使用Hypersil Green PAH色谱柱对EPA 610 MIX在4分钟内可达完全分离。

Hypersil Green Carbamate
Hypersil Green Carbamate
色谱柱专门用于氨基甲酸类农药混合物的分离,可采用等度或梯度洗脱,采取柱前衍生化方法,并用荧光检测器检测可提高柱的灵敏性。