固定液配方
一、戊二醛固定液:市售戊二醛为25%or50%水溶液,一般用磷酸缓冲液或二甲砷酸盐溶液配制成所需浓度的固定液
0.1mol/L 二甲砷酸钠缓冲液A液:二甲砷酸钠•3H2O 4.28g
加双蒸水至100ml
B液:HCL(36-38%) 1.66ml 加双蒸水至100ml
按下表比例混合A、B液以配制0.2M二甲砷酸钠母液(在通风橱配制),加1倍双蒸水即得0.1M二甲砷酸钠缓冲液
Na2HPO4•2H2O 35.6g
Na2HPO4•4H2O 53.63g
Na2HPO4•7H2O 71.64g
100ml
B液:NaH2PO4溶液NaH2PO4 24.0g/ NaH2PO4 •H2O 27.6g/ NaH2PO4 •2H2O 31.21g 加双蒸水至100ml
二、四氧化饿固定液
1、2%四氧化饿水溶液
将0.5 or 1.0g装四氧化饿安踣瓶充分洗净,放入棕色试剂瓶,在排毒柜5内将安踣瓶敲破,立刻加入双蒸水,配制成2%四氧化饿水溶液,盖上盖子,溶解1d.
2、用0.1M磷酸缓冲液配制成四氧化饿固定液0.1M磷酸缓冲液5ml
2%四氧化饿水溶液5ml
三、karnovsky 2%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液
1、10%多聚甲醛水溶液多聚甲醛2g
双蒸水20ml
2、固定液配制
0.2M磷酸缓冲液50ml
25%戊二醛10ml 双蒸水加至100ml
10%多聚甲醛水溶液20ml
染色液配方
一、超薄切片染色液
1、柠檬酸铅(Re ynolds’)溶液硝酸铅 1.33g
柠檬酸三钠 1.76g
切片染色时间5-10min 双蒸水30ml
NOTICE:该溶液易与空气中CO2作用而产生沉淀,故使用与保存时,应尽量减少与空气接触,若稍有白色沉淀即舍弃
2、醋酸双氧铀-50%饱和溶液醋酸双氧铀2g
50%乙醇100ml
切片染色时间15-30min(室温),延迟时间or提高温度可加反差
NOTICE:溶液呈鲜黄色,若变淡则表示失效。
二、负染色液
1、磷钨酸负染色液(PTA)磷钨酸1-2g
双蒸水100ml
2、醋酸双氧铀负染色醋酸双氧铀
双蒸水
3、钼酸铵负染色(AM)钼酸铵2g
双蒸水。