血清直接胆红素测定
1. 实验原理
在PH3左右、有表面活性剂和间接反应胆红素抑制剂的条件下,样品中的直接胆红素容易被矾酸盐氧化成胆绿素,而间接胆红素不能。
在450nm(胆红素吸收峰)处监测反应。
矾酸盐氧化前后吸光度的下降与样品中胆红素的浓度成正比。
由此可计算出样品中直接胆红素浓度。
2. 标本:
2.1 病人准备:无特殊要求。
最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。
2.2 类型:血清、肝素或EDTA血浆,应避光保存。
3. 标本存放:15~25℃保存可稳定2天;2~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。
4. 标本运输:常温条件下避光保存运输。
5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂:上海欧泰克直接胆红素试剂盒
6.1.1 试剂组成
酒石酸盐缓冲液 100
mmol/L
表面活化剂I 适量
磷酸盐缓冲液 10 mmol/L
矾酸钠盐 4 mmol/L
6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。
试剂有效期为18个月。
试剂2必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。
6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用。
警告!腐蚀剂!不要入口。
避免和眼睛,皮肤或衣服接触。
如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。
接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。
6.2 校准品:使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.SOP文件
7. 仪器:日立7060生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数:参见生化检验日立7060生化分析仪项目
测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤:参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件
检验结果的判断与分析
10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程SOP文件。
11. 计算方法以罗氏复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,无需手工计算,以μmol/L报告。
12. 参考值范围:0--6.8μmol/L
13. 临床意义:胆红素是血红蛋白的降解产物。
游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。
在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。
在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。
溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症。
人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为Gilbert 综合症。
由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使60~70%的婴儿血液出现总胆红素增高。
常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。
直接胆红素
的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。
14. 线性范围:1.7~684μmol/L
15 超出范围结果处理本法线性上限为684μmol/L。
样品测定值超过上限时,应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。
16. 病危报警值的处理无。