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2 厌氧菌的鉴定
利用细菌生长产生的酶，用单一基质酶促 反应原理，与测试卡中的少量基质反应， 充入厌氧菌的鉴定卡，在非厌氧条件下培 养小时，结果输入计算机，作出鉴定。
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3 酵母菌鉴定
酵母菌鉴定的测试卡与上述不同，菌液充 入试验卡，先在30℃培养4小时，然后放入 读数仪/培育室中读数，鉴定。如需要，计 算机将提示再重复培养，测试一次。
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MIS系统的标准库 （MIS Standard Libraries）
该标准库包括有需氧菌、厌氧菌、酵母菌，很多领
域内有特性的微生物均保存在标准库中。所以MIS系 统的标准库可以应用于以下专业的微生物鉴定工作。
医学及临床微生物
环境微生物
植物微生物
工业微生物
食品微生物
兽医
饮用水和废水
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另外，细胞在不同的环境条件中，为维持细胞膜 的流动性其脂肪酸的成分有所改变。所以培养基 的选择和培养温度一定要按规定进行。
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• 红外光谱仪鉴定微生物
（Infrared Spectroscopy）
原理
细菌或其他微生物的红外光谱包含了化合 物组分的资料信息，如细胞壁组分（酯类， 多糖，多肽），核酸，蛋白质。菌种不同 其红外光谱不同，利用这种‘光谱指纹’ （spectral fingerprints）与计算机软件 库中的标准谱进行比较可以对微生物进行 鉴定。
现代微生物鉴定技术
中国药品生物制品检定所抗生素室 马越
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一 API鉴定系统 二 自动微生物系统 三 分子生物学在细菌分类中的应用
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一 API鉴定系统
由于传统的细菌鉴定方法费时、耗力， 因此出现多种类型的的成套鉴定系统及编 码鉴定系统方法，使细菌鉴定简易化、微 量化和快速化。API鉴定系统是在世界范围 内应用最广、种类最多的系统。
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仪器的优点
1 功能多 可以对革兰阳性，阴性，厌氧菌，酵母 菌等作出鉴定
2 速度快 获得纯培养后，充入试卡，果准确 可避免人主观判断的误差。
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其他不足
1 酵母菌的鉴定不能仅凭生化反应，要兼 顾形态学特征。
2 在少数情况下，AMS系统不能作出鉴定， 在排除操作错误以后，可能是该机现有资 料库中没有相应的模式。
生化图谱数码的编码法将生化反应 所得阳性和阴性结果，转换成数码，再 与索引中数码相比较完成鉴定。
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原则：
所有的（20或32个）反应从阳性到阴性的 信息浓缩成一组数字。每3个反应为一组， 组内按其位置第一位阳性为1，第二位阳性 为2，第三位阳性为4，阴性为0。最终组成 一个7位或10位数字。
二 自动微生物系统 （AutoMicrobic System AMS）
美国BD公司 BioMerieux ViteK 气相色谱(Gas Chromatography) 鉴定微生物 红外光谱仪（Infrared Spectroscopy） 鉴定
微生物
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• BioMerieux ViteK
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生化反应图谱索引手册的应用
鉴定%≥99.9 极好的鉴定 %99.8-99.0 很好的鉴定 %98.9-90.0 好的鉴定 %98.9-80.0 可以接受的鉴定 %79.9以下 低分辨率(不可信)
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API 系统的操作
接种物的制备 试验条的接种 读取结果
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Infrared Spectroscopy的特点
1 快速 2 鉴定所需标本量少 3 自动分析 4 鉴定准确 5 可鉴定到菌株水平 6 对所有微生物可以进行鉴定
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BioMerieux ViteK
工作原理
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1 革兰阴性、阳性菌的鉴定
主要依据概率是最大拟燃模型法（Probabilistic maximum likelihood model），通过计算机控制， 读数仪每小时对孵育室中的测试卡自动扫描一次， 进行光学检测，将所得数据送入计算机。因细菌 的生长繁殖使测试小池的透光量减少，计算出百 分变化值，以判定是否有细菌生长。 计算机对 测试菌各反应池结果的处理求出该菌的绝对拟燃 值（Absolute likelihood）与内存模型菌比较进 行鉴定。
4）用于研究细菌对糖的发酵、氧化和同化能力以及细菌 所具有的酶谱（Enzymes profile）
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数值鉴定的基本原理
数值鉴定是通过出现频率的计算进行 的，即每个分类单位的总出现频率与每个 菌群中所有菌的总出现频率总和相比较而 得。
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数值鉴定的应用
MIS系统
仅能鉴定那些标准库中包括或与其相关的 菌种。
另外，培养条件和样本制备必须根据要求 进行。
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注意：
脂肪酸谱与DNA同源性有关，而DNA用于确定种 的分类。所以，在有些科里，如肠杆菌科中有些 菌种间关系密切，根据生化反应的分类学使该系 统的鉴定会有二、三种选择的情况，此时，尚需 用其他方法鉴定。
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分类
1）快速鉴定系统 如: Rapideo Z 沙门菌、志贺菌等 2小时 生化反应项 目5
2）特定菌属（群）的鉴定系统 如：API Staph，API Strep 可鉴定28个和35个种， 生化反应项目20
3）ATB （Automatic Testing Bacteriology）系统 API方法电脑化，可自动读取鉴定结果，使用时需将 鉴定板与自动化仪器结合起来。
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• 气相色谱鉴定微生物
原理
根据细菌脂肪酸的构成谱（fatty acid composition profiles）来鉴定细菌。提取未知微生物的脂肪酸， 气相色谱仪自动定量测定脂肪酸一确定脂肪酸的 构成谱，并与计算机数据库中的参考微生物进行 比较，鉴定。该系统可鉴定到属、种、亚种及生 化变异型。常用气相色谱鉴定微生物系统有 Sherlock Microbial Identification System（MIS）。