答案
3.动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、细胞的全能性 _细__胞__膜__的__流__动__性__
用 纤维素酶、果胶 酶去除细胞 用 胰蛋白 酶使细胞分散
细胞融合方法
壁后诱导原生质体融合
后，诱导细胞融合
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离心、电场诱导、振动、聚乙二 与植物体细胞杂交相比，
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答案
归纳
总结
制备单克隆抗体过程中的两次筛选
项目
第一次筛选
第二次筛选
诱导融合后得到多种杂交细 从小鼠体内提取的B淋巴细胞有很多 筛选原因
胞，另外还有未融合的细胞 种，形成的杂交瘤细胞也有很多种
用特定的选择性培养基筛选： 用多孔培养皿培养，在每个孔只有一
未融合的细胞和同种细胞融合 个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培 筛选方法
第二章 细胞工程
第三节 动物细胞工程的应用(Ⅱ)
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学习导航 1.结合教材P65～66，概述动物细胞融合的原理、方法、过程，并与 植物体细胞杂交进行比较。 2.结合教材P66图2－17，概述单克隆抗体的制备方法、过程和应用。 重难点击 单克隆抗体的制备和应用。
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课堂导入 方式一 1970年，有两位科学家做了人—鼠细胞融合的实验，以证明细 胞膜的流动性。思考该如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还 有什么用途呢？植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能像 电影上一样形成杂种动物个体吗？
(1)图中诱导动物细胞融合常用的诱导因素有_聚__乙__二__醇__(P_E__G_)_、__灭__活__的__病__毒_、
_电__场__诱__导__(_写__出__两__种__即__可__)_( 至少写出两种 )，细胞融合后 ，再用特定的
_选__择__性__培养基进行筛选，得到杂交细胞。一分耕耘一分收获
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小贴士
(1)融合过程中一共有五种细胞(一般只考虑了细胞两两融合)，未融 合的有两种，已融合的有三种，符合要求的只有杂交瘤细胞。 (2)两次筛选：第一次利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次 是筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。
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2.杂交瘤细胞的特点：无限增殖 ，产生单克隆抗体。 3.单克隆抗体的优点： 纯度高 ， 特异性强 ，产量大，容易标准化生产。 4.单克隆抗体的应用 (1)治疗恶性肿瘤，目前进入临床试验的单克隆抗体中有30% 以上用于治疗 各种肿瘤。 (2)单克隆抗体还可以用于治疗由于 免疫系统 的紊乱导致的各种疾病。 (3)单克隆抗体用于 器官移植 的治疗等等。
也完全相同 B.只有植物体细胞杂交可跨越种属间的生殖隔离，突破了有性杂交方法
的局限，使远缘杂交成为可能 C.利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为生产单克隆抗体
开辟了新途径 D.目前科学家终于实现了两个植物物种间的体细胞杂交，得到了同时具
有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性状全部得以体现
量元素、动物血清、动物血浆。
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解析 答案
(3)若只考虑人成纤维细胞与小鼠细胞两两融合形成的杂交细胞，假如每 种杂交细胞只保留了人的1条染色体，从染色体组成的角度考虑，杂交细 胞可能有_2_4_种。
解析 人体细胞中含有24种染色体，分别是22种常染色体和2种性染色体 (即X染色体和Y染色体)。
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内容索引 一、动物细胞融合 二、单克隆抗体 当堂检测
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一、动物细胞融合
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基础梳理
1.概念：是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞 的过程，也叫细胞杂交。 2.原理： 细胞膜的流动性 。 3.诱导融合的方法：物理法( 电场诱导融合 法)、化学法(_聚__乙__二__醇__诱__导__ 融合法)和生物法( 病毒诱导融合 法)。其中广泛应用的是 物理 法。
诱导手段 醇等诱导
还可用 灭活的病毒 诱导
结果 用途
形成_杂__种__植__株_
形成 杂种细胞 ，以生产细 胞产品
克服远缘杂交不亲和的障碍，扩 制备 单克隆抗体 、病毒疫
展杂交亲本范围，培育新品种 苗、干扰素等
意义
突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
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拓展应用
1.如图表示将人成纤维细胞与小鼠细胞进行融合，获得部分杂交细胞的过 程(注：杂交细胞中人类的染色体会随机丢失，各种杂种细胞保留人类染 色体的种类和数量是不同的)。请回答下列问题：
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问题探究
结合下面制备单克隆抗体的流程，探究下列问题： 1.单克隆抗体的制备过程 (1)思考制备单克隆抗体时，不直接 用经过免疫的B淋巴细胞(浆细胞)获 得单克隆抗体的原因是什么？
答案 用于获得杂交瘤细胞的B淋巴细胞为浆细胞，是高度分化的动物 细胞，培养时很难恢复分裂能力，不能进行无限增殖，难以获得单克隆 抗体。
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答案 不可以，还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细胞间的
融合，不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，
因此需要筛选。
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答案
(2)动物细胞融合完成的标志是什么？
答案 动物细胞融合完成的标志是来自不同细胞的两个或多个细胞核
融合成一个细胞核。
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答案
(3)动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有何不同？
答案 动物细胞融合可用灭活的病毒进行诱导。
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答案
2.细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点？ 答案 有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限。动物细胞融合 则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而 能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。
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解析 答案
课堂小结
两个或多 一
细胞膜的流动性
聚乙二醇诱导融合法
B淋巴细胞
杂交瘤细胞
单克隆抗体 特异性强、灵敏度高 并能大量制备
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当堂检测
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1.下列关于动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，叙述正确的是
A.诱导融合的方法完全相同
B.所用的技术手段完全相同
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解析 答案
归纳提升 生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源
(1)转基因生物：目的基因来自外源生物，绝大多数基因来自两个亲本。 (2)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (3)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。 (4)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。 (5)克隆动物：细胞核中的遗传物质来自供体动物，细胞质中的遗传物 质来自提供卵母细胞的动物个体。
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解析 答案
一题多变 (1)体外培养骨髓瘤细胞，会不会出现接触抑制现象？为什么？ 答案 不会。骨髓瘤细胞是一种癌细胞，细胞表面的糖蛋白减少，失 去了接触抑制作用。 (2)体外培养③时，应提供什么条件？
答案 无菌、无毒的环境；必要的营养物质，如葡萄糖、氨基酸、促 生长因子、无机盐、微量元素等；适宜的温度和pH；提供氧气和二氧 化碳。
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答案
4.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是 A.利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞 B.以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞 C.抗癌物质在克隆细胞中大量合成 D.单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合
解析 单克隆抗体主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”，生物导弹 就是单克隆抗体＋放射性同位素或化学药物或细胞毒素，这其实是借助 单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，靠药物在原位杀死 癌细胞。这种治疗疗效高，副作用小，位置准确。
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方式二 “太空婚礼” 2002年12月30日，两场筹备了10年的“太空婚礼”首 次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”是黄花 烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞 “新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人 同时在“产房”——电融合仪内孕育新生命。 请思考： 新人一的婚礼流程是怎样的？爱情结晶是什么？ 新人二的婚礼流程又是怎样的？爱情结晶会是什么呢？ 要想知道答案，就让我们一起来进入今天的课题吧！
是它能分泌多种特异性抗体
C.③过程如在体外培养，则需要无菌、无毒，
营养充足，温度、pH适宜等环境条件
D.诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇
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4.过程
5.应用范围 (1)研究表明，不同类型的动物细胞之间能进行融合，形成 杂种细胞 ， 如鼠—鸡、鼠—猴杂种细胞等。 (2)动物细胞融合技术的最重要的用途之一是制备 单克隆抗体 。
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问题探究
1.结合下面动物细胞融合的过程，探究下列问题：
(1)融合处理后的细胞是否可以直接用于培养，为什么？
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二、单克隆抗体
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基础梳理
1.制备过程 (1)第一步：向免疫小鼠体内注射特定的 抗原蛋白 ，然后从小鼠体内获 得已免疫的 B淋巴 细胞；培养骨髓瘤细胞，为融合做准备。 (2)第二步：用 电场法、聚乙二醇法、 仙台病毒 法等，诱导两种细胞发 生融合，这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞，还有B淋巴细胞相互融 合的细胞和 骨髓瘤细胞 相互融合的细胞。
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解析 答案
2.单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用。科学家米
尔斯坦和科勒设计了一个用已免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，
下图为其实验流程图。则相关的叙述或说法中，不正确的是
A.a是骨髓瘤细胞，②表示在选择性培养基上