硝酸还原酶活性的测定
2.材料不新鲜,导致酶活力降低。
3.实验操作不当所致。 4.抽真空时间不够,反应不充分。
5.抽真空后没马上进行暗反应。
6.OD值读数误差。
四、试验操作技能
1.在加液研磨实验材料时分次的添加冲洗研钵和研磨棒。 2.经离心后的样品上清须转移至试管中再进行吸取。 3.在测定样品OD值时所采用的对照试剂不同,标准曲线与Y轴的 交点也不同。 4.称量纸折叠至四边上翘,以防药品腐蚀天平。 5.试管夹夹在试管中上部,从试管 底部套入、取出,拇指不要按在试管 夹的短柄上。 6.在滴定时加液要慢, 边加边震荡使之充分反应。
前方图文并茂请注意!
硝酸还原酶活性的测定
小组成员:麻弘媛 发言人:苏鑫
张翠敏
穆昕阳
苏鑫
李金婷
一、实验原理与过程
实验原理
1
2
3
实验流程 1 0.2 0.8 4.0 2 0.4 0.6 4.0 3 0.6 0.4 4.0 4 0.8 0.2 4.0 5 1 0 4.0
标准曲线制作 试剂
亚硝酸钠标准 液ml
五、操作中存在的不足
1.待测样品研磨不充分导致的实验误差。 2.操作人员不同导致加入药品量的细微不同导致的实验误差。 3.不同人员对于颜色的辨别度不同导致的实验误差。
4.药品配制后放置时间过长部分变质导致的实验误差。
5.水浴加热时间不准确导致的实验误差。
六、提高准确度的方法
用2、3号管溶液OD平均值减去 1号管溶液的 OD值,得到的值在标 准曲线上查出相应的NaNO2含量(μg)。
结果与计算
把在标准曲线上查得的NaNO2含量代入下式,计算硝酸还原酶活 性:
将上述结果带入公式测得硝酸还原酶活性为2.60856。
三、查阅文献与结果分析
实验数据存在较大误差,其原因总结如下: 1. 可能培养方式为水培,氮吸收与土培可能不同,一般来说, 氮吸收量越多,说明酶活力越强。
恶意放狗:麻弘媛 ヾ(o◕∀◕)ノヾ
谢谢观赏
室温显色20mi
结果分析
540nm波长下测定OD值
二、实验现象与结果
现象:
用打孔器处理叶片后得到大小均一的叶片,叶片暗反应后看到1号 对照瓶内叶片边缘发黄,而2和3号瓶内相对较绿;测吸光值时可以 看到实验组比标准曲线组颜色浅的多。
此图为标准曲线显色反应
实验数据: 540nm下的OD值:
1.将样品剪碎充分研磨,尤其是叶片部分。 2.由同一人加入同系列药品。 3.让对颜色敏感的人辨别颜色的变化。
4.易变质药品现用现配,其他药品用完后盖好盖子。
5.水浴加热时利用秒表定好时间。
七、小组团队合作分工
一:李金婷 二:张翠敏,张翠敏 三:苏鑫 四——七:麻弘媛
汇总:麻弘媛
蒸馏水ml
1%对氨基苯 磺酸ml 0.2%ɑ-萘胺ml 亚硝酸纳含量 μg
4.0
1
4.0
2
4.0
3
4.0
4
4.0
5
酶反应和酶活性的测定
取油菜叶洗干擦干
用打孔机打孔
分成三份/1g 分别放入50ml三角瓶
30℃暗室保温3上清加入对2ml氨基苯磺酸和2mlɑ-萘胺