吉尔森GX-274ASPEC四通道自动固相萃取仪中文使用手册启动软件,输入用户名和密码,进入页面后点击Method BuilderUser Name:用户名,Administrator默认Password:密码,输入gilson,点击ok进入程序后,编写程序主要分四个部分:1.Configuration:定义构造(仪器配置)2.Bed Layout:定义样品区、收集区、溶剂区及洗针区托盘及管架3.Method:定义一种方法(从任务中建造这种方法)4.Applications:建造一个操作目录:选择构造、托盘和加入方法,后执行Configuration进入Method Builder,点击右上方“Scan”自动扫描系统连接的组件,在系统连接正常时,软件会扫描出每个组件并且显示在下图中的白色区域,设置每个组件的参数。
这里以手动选择组件来注解每个步骤。
以GX-274自动固相萃取系统为例,需要设置以下几个组件及相应参数Liquid Handlers:液体处理系统,自动进样及馏分收集Pumps:溶剂泵Accessories:系统附件(根据需要设置)Communication:系统信号连接(根据需要设置)Injector:进样组件(根据需要设置)1.Liquid Handlers“GX-274ASPEC without Pumps”将组件拖动到中间Workspace白色区域。
Setup:185mm Probe:取液针高度Z Clamp Height(mm):Range:185Z臂高度Z Safe Height(mm):Range:185:Z臂安全高度2.Pumps四通道固相萃取中,选择溶剂泵的顺序为“Virtual Pumping System”--406Pump Dual--406Pump Dual 即先选择一个虚拟泵系统,再选择两个406双通道注射泵“Virtual Pumping System”拖动到WorkSpace区域中“406Pump Dual”选择406双通道注射泵四通道系统中,选择两个注射泵Size(μL):100000注射管规格,一般默认设置10mLBed Layout前面操作完成后点击页面上方的Bed Layout按钮,出现如下页面,设置托盘管架区域通常下面区域从左到右依次设置样品区,收集区,上面区域左边四个为溶剂区(活化、洗涤,洗脱),右边小的部分为洗针区,包括洗针的内部和外部。
Zone Management显示每个工作区域名称和数量,Add Zone下方是试管排列顺序,可根据使用情况选择排列方式,四通道系统中,管架应设置为从左到右(或从右到左)的顺序。
(1)样品区选择样品区:假定左边第一个区域为样品区,鼠标左键双击方框内白色区域,页面出现如下,选择管架类型,如Code21,点击OK。
如下定义样品:点击Add Zone,输入样品名称如sample,设置参数后点击OKName:输入样品名称,如sampleStarting Number:试管起始编号,默认1排列管架:上一步操作完成后,在Zone Management中出现sample,鼠标点击sample使之处于反色显示状态,在Add Zone下方的序列方式中选择从左到右(或从右到左)编号方式,拖动鼠标选定Code21区域。
选择后Zone Management中Sample的Wells为选定的试管数量。
(2)萃取区选择萃取区:方法同样品区。
双击白色区域,选择管架类型,如Holder371,OK在Holder371白色区域下方双击鼠标左键,出现DEC371Mobile Rack,点击OKOK后如下在Holder371白色区域上方双击鼠标左键,出现Collect371,点击OK完成定义DEC(萃取柱):点击Add Zone,对话框中输入Name:DEC371,设定起始编号(同add sample)在Zone Management中出现DEC371,鼠标点击DEC371使之处于反色显示状态,在Add Zone下方的序列方式中选择从左到右(或从右到左)编号方式,拖动鼠标选定DEC371区域。
选定后Zone Management下的DEC371的Wells为选定的萃取柱数量。
定义Collect(收集):方法同上,Name:Collect371根据需要可再添加一个萃取管架,如DEC373,Collect373(3)溶剂区选择溶剂区:上方四个白色区域代表四个溶剂瓶,从左到右依次编辑。
双击白色区域,出现选择溶剂瓶大小页面,选择一种规格,点击OK 。
白色区域将显示八个小圆圈,代表八个溶剂孔,在四通道中只用四个。
定义溶剂:点击Add Zone,输入溶剂名称,如Sol1。
个圆圈,选择顺序为第2,4,6,8个,选定后Zone Management下Sol1中Wells数量为4。
按以上方法设定Sol2,Sol3,Sol4(4).洗针槽:包括洗针的内部和外部两排针孔,右上方小的白色方框代表洗针槽位置。
双击白色区域,出现Select Rack对话框,选择洗针的规格,如Rinse Station GX点击OK两排针中上面为Outside Rinse(洗针外部),下面为Inside Rinse(洗针内部)。
在Zone Management中点击Outside Rinse使之反色显示。
拖动鼠标选择上面四个孔。
选定后ZoneManagement下Outside Rinse中Wells数量为4。
同样,选择下面四个为Inside Rinse注:到此为止,硬件配置工作完成,如配置没有变动,设计方法可以不用重新配置。
MethodBed Layout编辑完成后,点击Method,在左下角Tasks中点击Custom前面的加号,展开菜单右如下选项SPE Condition:柱预处理SPE Dry:吹干SPE Elute:洗脱SPE Evaporate:蒸发,浓缩洗脱出来成分SPE Fractionate:馏分SPE Load:样品添加SPE Wash:柱淋洗此处仅以SPE Condition,SPE Load,SPE Wash和SPE Elute四个步骤注解SPE Condition柱预处理将SPE Condition拖入到白色区域,出现如下页面,有三个选项卡:Source,DEC/Air push,Advanced,Rinse,Instruments。
在Source选项下设置Source Properties以下参数根据实验要求设定,此处象征性描述Source:Tray:托盘。
Source Zone:Sol1先加Sol1对柱预处理。
Source Well:#solvent四通道系统中well用变量,#代表变量,单通道选用数值1,溶剂区用solvent,其他区域用well。
Source Volume(μL):1000吸取溶剂Sol1的体积,根据方法设定。
Extra Volume(μL):0多吸体积,减少交叉污染。
一般:100-200(μL)。
Air Gap(μL):20吸气泡体积。
吸不同的溶剂前吸一个空气隔开带,防止交叉污染,此处为默认值,建议值50。
Flow Rate(mL/min):5吸溶剂速度,默认值5,建议值10。
Air Gap Flow Rate(mL/min):0.3吸空气泡速度,默认值0.3。
Equilibration Time(mL/min):0平衡时间。
DEC/Air Push设置DEC Zone Dec371设定萃取区域。
DEC Well:#well四通道well用变量,#代表变量,Well为变量名称。
Volume increment(uL):0,每次溶剂注入DEC(即柱子)的体积增量,“0”为一次性注入DEC,为默认值,此值要小于Source Volume(μL)的值。
Flow Rate(mL/min):5排液速度,默认值5(可根据具体方法设定)。
Equilibration Time(mL/min):0.3平衡时间拔针内外压力平衡,一般默认值即可。
Dispense Air Gap to DEC:是否将Air Gap排放到DEC,可选。
Advanced设置Advanced Source PropertiesLiquid Level Following:液面跟踪功能,可不选择。
Liquid Level Detection:液面检测功能,可不选择。
Sensitivity:1当Liquid Level Detection启用时的参数,默认值1。
Z Option:Z臂零点位置的选择,Tube bottom管子底部(可选择)。
Z offset(mm):2距溶剂瓶底部2mm。
Lower speed(mm/sec):50针下降时的速度。
默认值为170mm/sec,建议改成17mm/sec。
Rinse speed(mm/sec):50针上升时的速度,建议值100。
Advanced DEC PropertiesZ Option:Z臂零点位置的选择,可选择Tube top。
Z offset(mm):-10距管顶部10mm。
(建议-10~-18mm)。
Lower speed(mm/sec):17针下降时的速度。
默认值为85mm/sec,建议改成17mm/sec。
Rinse speed(mm/sec):17针上升时的速度,建议值100。
Rinse设置Inside Rinse Properties:Zone:可选,Inside Rinse,洗针内壁(默认即可)。
Inside Volume(μL):250洗针内部的溶剂体积。
默认值250,建议用500μL。
Flow Rate(mL/min):10洗针的流速,默认值10Z-Option:Z臂零点位置的选择,Tube top:洗针槽的顶部Z-offset(mm):针的位置,0,距洗针槽的位置。
Outside Rinse Properties:Zone:可选,Outside Rinse,洗针外壁(默认即可)。
Volume(μL):体积,250,默认250μL可加大,建议用500μL。
Flow Rate(mL/min):10流速,默认值10,默认即可。
Z-Option:Z臂零点位置的选择,Tube top:管子顶部,建议选择Tube Bottom。
Z-offset(mm):针的位置,距管的顶部-10mm,(建议用+10mm)。
GX Rinse Pump:GX润洗泵未安装可不选。
GX Rinse Pump Speed:GX润洗泵速度,关闭。
以上操作完成后点击OK,SPE Condition设置完成L o ad加样Source Zone:Sample。
Source Well:#well。
Extra Volume(μL):100μL,可以加大。