物理性质的可探测性 化学性质的相同性 生物代谢中无异常变化
2、 特点：
1.灵敏度高 化学分析法：一般10-6g 光谱法：10-10—10-12g 示踪法：10-14—10-18g
例 32P： A(Bq) 3.7 ×104
质量（g） 3.5×10-12 很容易测量3.7Bq(=222dpm LSC的rb<10dpm)
动物试验准备
收集放射性废弃物的装置。 防止饲料和类便的相互污染。 大剂量操作，注意人身安全。 因特殊试验，喂饮时应小心。 妥善处理放射性饲料、排泄物、尸体等。
2．示踪剂引入方法：
●植物：
（1）气体示踪剂引入方法 A、 植物营养室。 B、叶室（多用14Co2的引入等）。
(2）液体示踪剂引入方法：
A、喷雾法 B、注射法 C、点滴法 D、涂抹法
第三章 放射性示踪技术
利用放射性物质(元素或化合物)追 踪被研究物质的行为、状态、分布、 吸收、累积、转化、数量等，以达到 科学研究之目的的技术方法。
放射性同位素示踪法几个重要概念
1、 同位素示踪法（isotope tracers） 2、 示踪剂（Tracer） 3、 被示踪物（Tracer） 4、 示踪平衡（Tracer equilibrium） 5 .放射性强度,活度（Radioactivity）A
6、 比强度（Specific activity）a 7、计数率（Count rate）r 8、 本底计数率（Background rate）rb 9、 净计数率（Net count rate）rn 10、计数效率（Counting efficienty）E
一、 放射性示踪法原理和特点
1、 原理：
注意：大量稀释时应加载体或反载体。
六．放射性衰变的校正
在下述二种情况需校正：
●从出厂→开始使用 ●试验过程中，结束：
经过t1、t2……
校正方法：
1、由T推算: 1T 2T 3T… 2、由At = Ao·e-λt查表
3、由Ao/At = eλt = e0.693t/T 令K = e0.693t/T（由此得K值表）
152d 250d
0.018 0.155 1.71 0.27 0.17 0.254 0.315
五．放射性制剂的开瓶/分装
1．详查说明书
2．开瓶分装：即mci/ml→μci/ml(稀释)
a) 由公式：a1v1→a0v0
a：比强
v：质量或体积
b) 金属物质稀释：
如：65Zn：Hcl过量 溶解后应用NaOH中和pH值。
常 用 核 素 ： 32P 、 14C 、 3H 、 45Ca 、 35S、 65Zn、33P等十余种。 2. 标记位置：注意标记化合物
3．用量估算：
原则：保证精确度：最低r>3—5rb， 无辐射效应
影响因子：①稀释度 ②吸收率 ③分布的不均匀性 ④仪器效率，测量时间
4、 适当的“前体”：（特别是化合物） 14C、3H—氨基酸→蛋白质 3H—TdR(胸腺嘧啶核苷)→DNA 14C—腺嘌呤→RNA （DNA、RNA也可
由于仪器的效果不一样等，数据也会有变化。
植物：
土培：200 - 400μCi/Kg土 水培：〈200μCi/L. 危害剂量：>500μCi/Kg土（禾本科）
10、放射性废弃物处理
三、农业上常用放射性核素制备
天然
核反应堆
放射性核素
核裂变产物
中子源
分离 浓缩
标记化合物（供示踪用） 辐射源（供辐照用）
例：63Li+10n→He+3H （反应堆） 32S（n、p）32P
35cl(n、p)35S
45Se(n、p)45Ca
四、示踪剂选择：
1．影响因子：T1/2 射线的种类 E…
E、纸粘法 F、土培、水培、沙培法
（3）固体示踪剂引入方法：
A、 溶解成液体，如上法引入。
B、 土培、水培、沙培法（地下部 分）。
C、大田施肥。
●动物：
A、注射法：皮下、肌肉、腹腔、静脉注射。 B、口腔引入法；食物、水、胃管、投丸。 C、吸入法：通过呼吸道、易挥发示踪剂。 D、涂布法。 E、 喷涂法。 F、扦入法：将60Co、182Ta、226Ra金属丝扦入 生物体。
间作 单作
CK 董p134
3．引入量的估算（逆推法）
由本底：r1>3-5rb E：由仪器计数效率：r1÷E=r2 X%：生物体内稀释度：r2÷X%=r3 Y%：在生物体内不均匀性：r3÷Y%=r4 Z%：同位素利用率：r4÷Z%=r5 衰变因素：r5=A/K 查K值表 A；引入量
注：不同试验对象有不同的影响因子。
示踪技术分类
同位素（放和非）
非同位素（放和非）
1.放射性核素…（1923. Hevesy 大豆-铅）(药物动力, 酶促…..) 2.稳定性核素… 3.免疫酶… 4.生物素-亲合素系统 5.免疫荧光… 6.重金属…(铁蛋白… 胶体金…) 7.半抗原标记… 8.稀土元素…(镧系荧光免疫… 元素:銪Eu 铽Tb 钐Sm 鏑 Dy/15种) 9.化学发光免疫…
2.测量方法简便：活体、鲜样、干样测 量…
3.合乎生理条件
4.可分辨出原有的核素和新加入的核素
5.可准确定位
二 、放射性同位素示踪法的工作程序
1、试验设计
2、示踪剂准备 3、供试材料的准备 4、示踪剂引入试验体系和管理 5、试样采集和预处理 6、测样的制备 7、试样的放射性测量 8、数据处理 9、结果分析及报告
则K = Ao/At(K值法) At = AO/K
放射性衰变表
t/T
e-λt
70
1.00
0.5000
t：一个变量
K 1.9451 1.9724 2.0000
七、放 射性制剂引入生物体
1．一般原则：
a )试验对象生长正常一致。 b) 设置足够的重复。 c) 防污染的管理措施。 d) 满足生物生长的水、气、光、温等。 个别生物需进行试验前驯化、以适应试验条 件。
用32P正磷酸盐作前体） 35S—甲硫氨酸（半胱氨酸）培养动物细胞 （哺乳）。
5、生物学研究中常放射性核素
核素 同位素
T1/2
β- E能（Mev）
3H 1H、2H、3H
14C
8C—18C
32P
29P—34P
33P
35S
31S—37S
45Ca 40Ca- 48Ca_
65Zn 64Zn - 70Zn
12.4y 5720y 14.3d 24.8d 87.1d