发光 基因
提取目的基因 （发光基因） 形成重组DNA分子
重组DNA导入受体细胞 （原生质体） 原生质体培养
检测植物发光与否
四、多途径植物克隆实践:P24
1．“白菜—甘蓝”是用植物细胞工程的方法培育出来的，培 育过程不涉及 A．基因的选择表达 B．同源染色体分离 B C．制备原生质体 D．形成愈伤组织 2．马铃薯是无性繁殖的作物，体内容易积累病毒，会导致其 品质变差。目前对它进行脱毒处理最好的办法是（ A ） A．采用茎尖组织培养技术获得植株 B．采用基因工程技术培育抗虫植株 C．采用诱变育种培育抗性植物 D．采用杂交育种培育抗性植物 D 3.下列不能作为植物组织培养的材料是： A、秋海棠的叶 C、成熟的花粉 B、马铃薯的块茎 D、木质部中的导管细胞
第二节 植物的克隆
手指玫瑰
资料： 早在1958年， 科学家Steward 等人就从胡萝卜 块根诱导的培养 细胞获得了再生 植株（克隆）。 植物克隆的技术基础：植物组织培养
为什么胡萝卜根的培养细胞能培养 成一个完整的胡萝卜植株？
一、植物克隆的理论基础： 植物细胞的全能性
下列有关细胞全能性的含义，正确的是： 1、概念：
2.细胞培养:
指由单个细胞发育成完整植株的过程的过 程。
3、原生质体培养
如何去除细胞 壁?
植物 细胞
为什么要加较高渗 防止原生质体被破坏 透压的甘露醇呢?
0.5~0.6mol/L的甘露醇 (较高渗透压) 球型的
纤维素酶 和果胶酶
原生质体
植 株
原生质体：植 物细胞除去壁 后的部分
4、植物细胞工程
如何培育发 光树呢？
•营养成分： 水、矿质元素、蔗糖、氨基酸、维生素等
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
• 植物生长调节剂： 细胞分裂素、生长素等 • 琼脂： 0.7%—1%，起凝固作用 • 适宜PH值 （2）切取消毒过的组织块 （外植体）
离体的活的植物器官、组织、细胞
（3）培养，获得愈伤组织
脱分化
再分化
胚性细胞 愈伤组织：一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生 组织。 （细胞排列疏松、无规则） 脱分化：已经高度分化的植物细胞，经过诱导重新恢复了分裂能 力，产生愈伤组织的过程，又称去分化。 （4）诱导愈伤组织，再分化形成新植株
C
A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 植物体的每个生活细胞都具有遗传上 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 的全能性，具有发育成完整植株的潜能。 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、生长、衰老、 为什么 ? 死亡的全过程 2、原因：
2、培养的条件：

前提：离体状态 条件：（1）营养物质 （2）植物生长调节剂 （3）适宜的外界环境条件（如：无菌环境、 一定的温度、空气、适合的PH、适时光照等）
三、植物克隆主要技术
植物细胞培养
植物器官培养
原生质体培养 植物细胞工程
1.器官培养： 指将愈伤组织给予适当的培养条件，经过激素诱 导再分化出根、茎、叶、花、果等器官的培养。
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的 全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全 部基因。
不同细胞的全能性相同吗？ 阅读P22-23 3、植物细胞全能性的体现
（1） 受精卵的全能性最高
受精卵 ＞
生殖细胞 ＞ 体细胞
（2） 植物细胞的全能性﹥动物细胞
二、植物组织培养程序
1. 培养程序： （1）配制培养基 半固体的、灭菌的
20
下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：
离体的植物细胞、 （1）①表示 组织、器官 ，它能被培养成为④的根本 原因是 ①具有植物细胞全能性 。 （2）②表示 愈伤组织 ，它与①相比分化程度 低 全能性 高 。 （3）若①是花药，则④是单倍体植株 ，继续对其使 用 秋水仙素 处理可获得 纯合 正常植株，该 过程称为 单倍体育种 。
在再分化阶段所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y 。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的 变化情况如下图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽 、根、愈伤组织的关系：
未分化细胞群经分裂形成愈伤组织 1.当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时， 。 2.当X与Y的浓度比大于1时， 未分化细胞群分化形成芽 。 3.当X与Y的浓度比小于1时， 未分化细胞群分化形成根 。 则植物激素X的名称是 细胞分裂素 。
，
（4）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片的颜 色是 绿色 ，这说明根尖细胞 含有与叶绿体形成相关的基因 。
下图表示水稻(体细胞有24条染色体)的花药通过 无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗 的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb。据此回答 下列问题：
适当营养物质和植物生长调节剂 (1)在植物组织培养过程中要配制含有_____________的培养基。
6．在离体的植物器官、组织或细胞分化形成愈伤 组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ C ） A．消毒灭菌 B．适宜的温度 C．充足的光照 D．适宜的养料和激素
7．下列属于植物组织培养的是（ A ） A．花粉培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条 C．根尖分生区发育成成熟区 D．未受精的卵发育成植株
4．植物体细胞杂交尚未解决的问题有（ C ） A．去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体 B．将杂种细胞培育成植株 C．让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的 优良性状 D．尚未培育出属间杂种植物 5．甲植物体细胞的基因型为Aa，乙植物体细胞的 基因型为Bb，去壁后用PEG将这两种植物细胞融 合，则得到的杂种体细胞的基因型可能为（ A ） A．AaBb B．AAaa C．BBbb D．AABB
(2)要促进花粉细胞分裂和生长，获得新的植株，这需要通过平衡 植物激素配比调控。如，适量的激动素或细胞分裂素配比 _________________________可诱导芽 适量的生长素及适当减除其他某些激素 诱导生根。 的分化；________________________________ (3)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具根、茎和 叶的植物体。这一过程的一定时间必须给予光照，其原因是 叶绿体 利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。 __________