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仪器分析操作步骤

《仪器分析》操作技能竞赛——紫外分光光度法测定试样的含量
①仪器
紫外-可见分光光度计(T6型);
石英吸收池(1cm),2个;
容量瓶(100mL),10只;
吸量管(10mL),4支;
烧杯(50mL),5个。

②试剂
标准物质溶液:山梨酸碱性溶液、磺基水杨酸、苯甲酸钠。

标准物质溶液浓度,山梨酸碱性溶液以山梨酸计,磺基水杨酸以磺基水杨酸计(不含结晶水),苯甲酸钠以苯甲酸钠计。

试样:三种标准物质溶液中的一种,浓度小于1500μg/mL。

③实验操作
标准溶液的配制:分别准确移取一定体积的标准溶液于100mL 容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻线,摇匀。

标准系列溶液不少于6个(含空白)。

最大吸收波长的确定:取标准系列中某一个溶液,以蒸馏水为参比,在255±10nm(山梨酸)、234±10nm(磺基水杨酸)、225±10nm(苯甲酸钠)范围内每隔1nm测定一个吸光度值,以吸光度最大处的波长为测量波长。

吸收池配套性检查:石英吸收池装蒸馏水,在最大吸收波长处,进行吸收池配套性检查,记录校正值。

标准曲线绘制:在最大吸收波长处,以蒸馏水为参比,测定吸光度。

然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

试样的定量分析:确定试样的稀释倍数,并配制待测溶液于100mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻线,摇匀。

在最大吸收波长处,以蒸馏水为参比,测定吸光度。

根据待测溶液的吸光度,确定试样的浓度。

平行测定二次。

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