犬的人工授精技术
海洋畜牧兽医学院 徐继岳 xujiyue1982@
发展史
1780年意大利生物学者斯帕兰兹尼（Abbe Spallanzani)用19g精液给母犬输精经过62天 产出3只仔犬，这是用犬进行人工受精的开 端，同时也正是由于这一成功的实验才揭开 了家畜人工受精历史的序幕。 1782年罗西(Rossi)重复这种实验也得到4只 仔犬。但是在以后的近100年间虽然其它家 畜的人工受精技术得到迅速的发展，而犬的 人工受精却很少有人问津。
原因： 可能有以下两个方面：其一是公犬一次 射出的精子数比其它家畜少，最多够配2至 3只母犬；其二是各品种协会对人工受精繁 殖出来的犬血统不予承认（除非事前取得 协会繁殖委员会特准）。 直到本世纪随着实验用的比格犬的大规 模繁殖需要，才使犬的人工受精技术得到 了实际应用。
总结采用人工受精方法繁殖犬的情况不外以 下四种： （1）由于生理上或心理上的原因使公母犬 不能直接交配。 （2）由于公母犬双方所在的地理距离过远 而不能直接交配。 （3）希望从某一杰出的公犬获得较多的后 代。 （4）防止性病的传染。
犬的性成熟早于体成熟， 一般小型犬成熟较早， 大型犬成熟较晚。作为 繁殖用犬，公犬须两周 岁、母犬须20个月才适 合初配。
母犬的生殖系统
（1）输卵管：短而细，长5～8cm， 输卵管与子宫角的界限非常明显。 （2）子宫：子宫角直而细长，子宫 体和子宫颈均较短。中等体形的成年 母犬，子宫角背腹稍扁，长12— 15cm，直径0.5一lcm。左右子宫角 在骨盆联合前方自子宫体分出，位于 腹腔内。妊娠后，子宫角中部弯曲并 向前下方沉降，可抵达肋弓内侧。子 宫体长2—3cm。子宫颈长1.5—2cm， 后1／2突人阴道内，子宫颈管近乎 垂直。 （3）阴道：阴道较长，在阴道前部， 由于隆起的背侧纵褶几乎遮盖了子宫 外口，以致导管不易插入子宫。
3、 阴道分泌物涂片镜检法 、
母犬的阴道分泌物多是阴道上皮细胞，对发 情期母犬外阴血性分泌物进行阴道涂片镜检， 观察涂片中角化细胞数量，统计角化细胞占 整个上皮细胞的百分率。当角化细胞数量占 整个涂片细胞的80%以上时算起，第2 d即可 确定为最佳配种时间。
分泌物检查采集
发情前期：在发情前期 的初期的涂片上，上皮 细胞主要是副基细胞和 小中间细胞，随后，副 基细胞和小中间细胞逐 渐减少，大中间细胞及 角化上皮细胞的比例逐 渐增加，偶见白细 胞。
操作方法
1、消毒探头 2、用纱布，棉花或卫生纸清洁探头.尤其是电极,清除电极上的粘液，粪 便，尿液或毛。 3、发清除外阴的黏液以及毛发 4、把被测的犬放在容易测量的地方,使犬感到舒适,放松! 5、平缓插入外阴。插入大约一半长的探针，直到稍稍感到阻力-说明到 宫颈口的位置.要根据具体品种和大小，选择插入的长度，宫颈口有最高 浓度的粘液测量结果最准确。 6、插入探头最初在近似的角度45度 7、然后平缓插入. 8、然后旋转2-3半圈或完整的旋转1圈，使电极充分接触阴道粘液。不 同地方测量结果都不一样，(不同时间分泌的黏液的测量都不一样)宫颈 口测量结果最准确。因为宫颈口有比较新鲜(刚分泌)的黏液. 9、多测量几次,确保测量结果的准确! 10、平缓取出探头!
泛情期；乏情期的阴道 涂片上主要是小中间细 胞及副基细胞，白细胞 几乎不可见。 排卵时间的确定：母犬 排卵多发生在上皮细胞 角化程度最高的第一天， 白细胞完全崩解消失成 不规则的碎片。阴道黏 膜细胞层增生，表皮细 胞80%-------90%角化， 核不明显。
4 、公犬试情
有少数母犬在发情期发情体征不明显，仅凭肉眼无 法有效确定母犬合适的配种时间。此时宜采用公犬 试情法来确定，以防止漏配。一般在母犬愿意接受 公犬爬跨时的2～3 d后为最佳配种时间。 方法：发情期在母犬圈中放人1
只体质健壮、性欲旺盛、无恶癖的非 种用公犬，发情的母犬表现出愿意接近公犬，弓腰举尾，后肢张开，频 频排尿，有求偶动作等；没有发情的母犬不愿意接近公犬，没有求偶的 动作，反而攻击试图爬跨的公犬。
5、唾液检测法
用干净的棉签在发情犬的口 腔内取少量唾液，将取得唾 液的棉签按一个方向涂在载 玻片上。风干约5分钟，让 唾液干燥结晶。显微镜下观 察。 当结果出现典型的羊齿状或 松针状，主梗硬而粗分支密 而长，为母犬的最佳配种期； 但出现羊齿状和松针状不典 型，主梗有弯曲，分支少而 短则为配种期，可能受孕但 是产子不多，可以停1—2d 后再镜检；若出现气泡状则 不能配种受孕。
2、触摸观察外阴法 、
母犬自发情之日起， 阴门开始充血肿胀， 逐渐肿胀到最大限度， 随后阴户水肿程度开 始减轻并变软，边缘 刚开始收缩时即可配 种。实际工作中，也 可用手打开母犬阴户 观察，当阴道内黏膜 由深红或红色变成浅 红色或桃红色时，以 手触摸感觉阴道内壁 及子宫颈口变柔软时 配种较为合适。
配种方法
配种方法 一般而言，犬在第1次配种后2 d，需再 配种1次，以提高母犬的受孕率，必要的时候 在母犬接收配种期间可对母犬进行第3次配种。 1 、自然交配 2、 人工辅助交配 3、 犬的人工授精
1、 自然交配 、
将待交配的母犬和公犬放在一个开阔、僻静 的地方，使公母犬有充分的时间相互了解和 游戏，待公犬和母犬熟悉了以后，公犬即开 始爬跨母犬，并完成交配。这种配种方法适 用于有配种经验的公犬和母犬，配种时需要 注意选择适当的交配时间、熟悉的交配场所， 避免公母犬咬架和不必要的惊扰，有些犬还 会选择偶像犬作为交配对象。
卵巢变化
卵巢上的卵细胞渐渐发育成卵子，分泌相应 激素。
母犬的发情周期
可分为： 发情前期 发情期 发情后期 发情休止期。
各时期的表现
①母犬的发情前期 一般为7～10日。表现为母犬外阴部充血肿大，从阴道中流出带有血液的黏液。 ②发情期 一般为4～12日。高峰期为发情期开始后的第13日到第17日。表现为外阴部充血 肿胀显著，并分泌出带有黄红色的黏液，出血停止或减少，稍触其臀部，母犬就 会将尾巴左右偏转，允许交配。高峰期是母犬的排卵期，是母犬交配的最佳时期， 这一时期交配，母犬最易受孕。 ③发情后期 表现为外阴部充血肿胀消失，一般维持大约2个月，然后进入发情休止期，如已 怀孕，则进入妊娠期。 ④发情休止期 发情休止期在发情后期至下一个发情期之间，一般约为3个月。
3、犬的人工授精
如果自然交配确实有困难，人工辅助也无法 完成交配，或公母犬相距较远又需配种，或 其他不能本交原因又非进行配种不可时，可 实施人工授精。
操作方法
1、采精 2、检测精子活力 3、稀释 4、保存 5、输精
1、采精方法
（一）器材 1．改制假阴道 用猪假阴道外壳截去两端，留用长 约15cm左右带气嘴的中间一段。内胎剪成长约2025cm，安装后一端套上猪用乳胶漏斗，连接有刻度 的10ml试管，收集精液用，或者在气温低的季节可 用羊双层集精杯代用。装好热水后在气嘴上连接双 联打气球，以便在采精过程中调节压力。 2．手握采精器具 可用塑料或玻璃漏斗及1支10ml 试管收集精液，也可用羊集精杯代用。 3．输精器具 用羊输精器及开膣器代用。
结果判定
结果解读
●图--1：图像呈密集交叉的羊齿状（蕨类植 ：图像呈密集交叉的羊齿状（ 物叶状）， ），约 ～ 小时 小时， 物叶状），约8～24小时，配种受孕可能性 最大。 最大。 ●图--2：图像呈羊齿状（蕨类植物叶状）与 ：图像呈羊齿状（蕨类植物叶状） 斑点气泡状混合， 斑点气泡状混合，提示为处在排卵期前或后 的约1～ 天 配种有可能受孕。 的约 ～2天，配种有可能受孕。 ●图—3：图像呈斑点状或气泡状，为非排卵 ：图像呈斑点状或气泡状， 期。
母犬发情的主要征候
1、行为变化 、 2、生殖道变化 、 3、卵巢变化 、
行为变化
①食欲减少，烦躁不安，频频排 尿，喜接近公犬； ②发出求偶的吠叫，对周围事物 反应迟钝； ③阴户肿胀、潮红，流出伴有血 液的红色黏液。
生殖道变化
发情期间，犬的阴唇肿胀，临近排卯时肿胀 程度最高，然后渐渐消退。阴道的肌肉组织 由紧张状态渐变为松驰，使阴道松软，变大， 在排卵期变得最大，然后渐渐恢复正常。同 时，阴道壁和子宫内膜组织增生，伴随血液 渗出，阴道流出血样物质，开始时呈暗红色 或鲜红色，而后变淡，至排卵时呈淡淡的粉 红色或无色，随后逐渐消失。
发情期：在发情期的阴 道涂片上，观察到的主 要是角化上皮细胞，根 据角化的程度不同，有 些角化上皮细胞还含有 固缩的核，而另一些角 化的上皮细胞核则完全 消失。在发情期的末期， 角化上皮细胞呈团块状 或片状聚集，除角化上 皮细胞外一般看不到其 他细胞。
发情后期；发情后期阴 道涂片的主要特点为可 观察到大量的白细胞。 在发情期的早期，可看 到小中间细胞及大中间 细胞。而在发情后期的 晚期，白细胞的数量减 少，副基细胞的数量将 增加，且有时还可观察 到细胞碎
这个是放大200倍左右的羊齿蕨，下面的图片 倍左右的羊齿蕨， 这个是放大 倍左右的羊齿蕨 是放大400倍的羊齿蕨细节图。 是放大 倍的羊齿蕨细节图。 倍的羊齿蕨细节图
附:
犬排卵检测仪器
这种仪器决定着大多数雌性动物的怀 孕时期，因此它能够避免多次受孕， 节约宝贵的时间，降低昂贵的兽医费。 这是一个小型轻便的仪器，只需要一 个 9 伏电力的电池。 排卵测定仪是检测动物阴道黏液的电 阻变化。使用方便，只要把试管插入 动物阴道，阅读显示数据就可以，并 不需要任何专业技术。仪器的尾部是 一个大大的容易把握的长柄，使得在 使用时测试者很容易把握它，也有利 于显示数据的阅读。 建议每天都做 1-2 次测试，连续几天， 以保证检测液体监测法 2 、触摸观察外阴法 3 、阴道涂片镜检法 4 、公犬试情法 5、唾液检测法 、
1 、血样液体监测
在母犬发情期间，阴户会分泌出红色血样液体。日常管理过 程中，从发现红色血样物质那天算起，待其颜色由深红色逐 渐转淡，变为无色或粉红色时即可首次配种，最佳时间为颜 色变为稻草黄色时。初产母犬一般在第11～13 d；经产母犬 在第9～11 d，随着母犬年龄的增长，其首次配种的时间逐 渐缩短。