RP-HPLC测定制萎扶胃丸中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量
目的采用反相高效液相色谱法测定制萎扶胃丸中隐丹参酮和丹参酮ⅡA 的含量。
方法采用十八烷基键合硅胶柱分离隐丹参酮和丹参酮ⅡA,以乙腈-0.2%磷酸(60∶40)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长262 nm。
结果隐丹参酮和丹参酮ⅡA分别在0.081 4～0.407 2 µg(r＝0.9997)、0.163 6～0.818 µg(r＝0.999 5)范围内呈线性关系,平均回收率分别为99.70%(RSD＝1.37%)、99.22%(RSD＝0.94%)。
结论本法简便、快速,可用于该产品的质量控制。
Abstract：Objective To establish the method for determining the content of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA in Zhiwei Fuwei Wan. Methods The determination of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA was performed on Symmetry C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphate (60∶40) at flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 262 nm. Results The linear ranges of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA were 0.081 4－0.407 2 µg (r＝0.999 7) and 0.163 6－0.81 8 µg (r＝0.999 5) respectively, the average recoveries were 99.70% (RSD＝1.37%) and 99.22% (RSD＝0.94%) respectively. Conclusion The method is simple and rapid for the quality control of the product.
Key words：Zhiwei Fuwei Wan；cryptotanshinone；Tanshinone ⅡA；RP-HPLC
制萎扶胃丸是本院院内制剂,由乌梅、山楂、白芍、麦芽、神曲、丹参等14味中药组成,具有健胃、滋补气阴、消导除湿、活络定痛之功效,主用于慢性萎缩性胃炎、慢性浅表性胃炎及多种消化不良、食欲减退等病症的治疗。
本试验采用反相高效通讯作者：焦正花,E-mail：939410984@液相色谱法(RP-HPLC)[1]对本品中隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量测定进行研究,以控制制萎扶胃丸的质量。
１仪器与试药
美国Waters 1525高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,Bree色谱工作站；天津HS6150型超声波清洗器,METTLER AE240电子天平。
含量。
结果见表3。
表3 克疣纳米乳中冰片和薄荷脑含量测定结果(mg/mL,n＝3)批号冰片薄荷脑20111220 5.626 3 5.725 320111223 5.622 2 5.648 420111225 5.589 7 5.681 23 讨论
薄荷脑、冰片是克疣纳米乳的有效组份,故选为评价克疣纳米乳质量的检测指标。
结果表明,本试验采取内标法测定薄荷脑、冰片的含量,方法简单、稳定、专属性强。
本试验制备的克疣纳米乳为O/W型,处方中的脂溶性成分为内相,在定性鉴别、含量测定时应先破乳。
本试验选用了盐酸法、氯化钠法、无水硫酸钠法等常用的破乳方法,最终选用无水硫酸钠法破乳,并对无水硫酸钠用量及破乳温度进行
考察。
确定破乳条件为：加入与克疣纳米乳同等重量的无水硫酸钠,80 ℃水浴回流30 min,放冷至室温后用乙酸乙酯萃取。
参考文献：[1] 李彦超,李宜鲜,姚令文.GC法同时测定通络祛痛膏中樟脑、薄荷脑和冰片的含量[J].药物分析杂志,2012,32(4)：672-675.[2] 杨敏,刘吉金.气相色谱法测定蜜炼川贝枇杷膏中薄荷脑和苯甲醛的含量[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(8)：23-25.[3] 邢俊波,曹红,刘成红.毛细管气相色谱法测定伤湿祛痛膏中樟脑和薄荷脑的含量[J].药物分析杂志,2009,29(1)：107-109.[4] 李亚平,王辉,周璐,等.金玄痔科熏洗散超临界萃取物指纹图谱研究[J].中国中医药信息杂志,2011,18(3)：51-54.(收稿日期：2013-01-10,编辑：陈静)
隐丹参酮对照品(批号852-9903)、丹参酮ⅡA对照品(批号110766-200518)由中国药品生物制品检定所提供；制萎扶胃丸,本院药学部制剂室生产,批号20080917、20081021、20081127。
乙腈(色谱纯),磷酸(分析纯),水为超纯水。
2 方法与结果2.1 色谱条件
色谱柱：Symmetry C18柱(5 µm,4.6 mm×250 mm)；流动相：乙腈-0.2%磷酸(60∶40)；流速：1.0 mL/min；柱温：室温25 ℃；检测波长：262 nm。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取隐丹参酮对照品10.18 mg,置25 mL棕色容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成每1 mL含0.407 2 mg溶液。
精密称取丹参酮ⅡA对照品20.45 mg,置25 mL棕色容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,制成每1 mL含0.818 mg溶液。
2.3 供试品溶液的制备
取供试品约2 g,精密称定,置50 mL棕色容量瓶中,加甲醇适量,超声(功率150 W,频率40 kHz)处理30 min,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液离心,用0.45 µm滤膜过滤即得。
2.4 阴性对照试验
按样品处方比例制备不含丹参药材的样品,依照样品含量测定项下方法制成阴性对照溶液。
吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10 µL,按上述色谱条件进行测定,结果阴性样品无干扰。
色谱图见图1。