1. 完成实验报告；
4、送交动物尸体 5、检查水电门窗安全
2. 将动物尸体送到实验室门口动物尸体篓； 3. 清洗并检查自己桌面上的器材（弯盘、镊子等是否齐全）；
4. 做好显微镜使用登记，盖好防尘罩；
5. 将用过的载玻片刷洗干净后放入回收盆中; 6. 盖玻片、吸水纸等扔到垃圾桶中。 （弃入水槽中会引起下水道堵塞）
细胞生物学与遗传学教研室
第二次实验
Ⅰ 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
Ⅱ 细胞内握酸、碱性蛋白以及DNA和RNA在细胞内的 分布情况； 2.了解酸、碱性蛋白以及DNA和RNA显色反应的 原理和方法。
[实验原理]
1. 由于不同蛋白质分子所带酸性基团和碱性 基团数量不同，生理条件下，整个蛋白质
晾 干
0.1%酸性固绿 5min 0.1%碱性固绿 45min
[注意事项]
• 两人一组，每组制3张血涂片
• 其中只有2张血涂片需经过三氯醋酸处
理（为什么？）
[结果观察]
酸性蛋白
碱性蛋白
DNA和RNA的显示
[作业]
1. 请回答细胞化学法在本次实验中的应用。 2. 通过本次实验学到哪些基本操作技能？ 3. 请描述本次实验的显微观察结果。
带负电荷多则为酸性蛋白，带正电荷多则
为碱性蛋白。可用不同pH值的固绿染色，
即可显示细胞内酸性蛋白或碱性蛋白。 核酸的存在会影响实验结果 用三氯醋酸处理
2. 甲基绿和派洛宁是互不混淆、互不影响的 两种染色剂，由于其自身分子结构的特点， 它们可与两种聚合程度不同的核酸竞争性 结合，从而同时显示细胞内DNA和RNA的分 布部位。
[小结]
• • • 评价本次实验的得失 本次实验需要巩固的概念 细胞化学法 本次实验需要掌握的实验技能
1. 血涂片制作方法
2. 染色的规范操作方法 3. 洗涤方法（流水冲洗）
4. 正确的镜检方法（显微观察技术）
值日生工作：
1、检查显微镜 2、清点检查器材
3、清洁公共实验区、打扫卫生
镜检后作业与工作
[实验用品]
95%乙醇 三氯醋酸 甲基绿-派洛宁 0.1%酸性固绿 0.1%碱性固绿
[操作流程]
暴露 胸腔 制 血涂片
(3张)
取心脏血
氯仿麻醉
固 定
90 ℃ 三氯醋酸 20min
晾干
2张
洗 涤
95%乙醇，5-10min
1张
>1 min
洗 涤
染 色
镜检 洗涤 晾 干 甲基绿-派洛宁 10min 洗涤