软件方面从数据采集，数据分析至报告格 式及打印。
首先我们应该了解，脱机区别于联机是不 能对仪器进行控制，不能运行诊断。
工作站运行界面：单针进样
工作站运行界面：多针进样
数据采集中主要是分析方法和运行控制， 这是我们操作中常用的。方法的的概念，方法 是一个参和集，它包括分析一个样品所需要的 所有参数：数据采集参数、数据分析参数及命 令或宏指令等内容。方法的组成：1、方法信息； 2、仪器/采集参数；3、数据分析参数；4、运 行时选项表。
压力的上下限也要合理设置。压力上限不要高 于柱子能够承受的压力最大值，一般比正常分 析压力高20bar左右；而压力下限的数值一般比 正常分析压力低20bar左右；4、时间表：此处 可以编辑梯度洗脱程序，规定溶剂比例变化方 式。要注意程序时间与停止时间和后运行时间 之间的协调关系。单元泵的参数设置界面与，则两个泵头可分别控制两种溶剂， 类似四元比例阀，但并不完全一样，只能同时 混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高， 而且由于为高压混合，产生的气泡也更少，所 以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵， 流速稳定性相对较差，低压混合容易产生气泡， 在实验中常会遇到这样的问题，多元
地执行用户的进样程序要求，如多种样品自动 混合，自动进样等高级功能的自由设置，但是， 由于进样针的扩散，所以进样量越小，受到扩 散的影响也越大，所以自动混合的准确度还是 难以达到容量瓶的混合方式。这在做标准由线 时得注意的问题，如为定量则不推荐小样量的 混合方式。
程序进样方式设置如下图：
第一步：设置进样 器
这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常 重要，一定要使用适当出口连接管，出口管线 要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不 得私自将废液管截短，以防气泡进入流通池。 但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液 相色谱仪正确的操作方法和定期的维护保养的 是很重要的。
柱温箱，使用安捷伦柱温箱可以保证柱的稳 定性，从而保证了保留时间的重现性。恒定的 柱温特别是日温差大的时候更为必要。
检测器，安捷伦1200系列检测器有，可 变波长检测器G1314B、二极管阵列检测器 G1315B、二极管阵列检测器SL型G1315C、示 差折光检测器G1362A、荧光检测器G1321A。 本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就 不多说了。对VWD型检测器应了解它的工作原 理，氘灯的使用维护及更换。需要注意的是， 使用中不要频繁的开关氘灯，否则影响氘灯 的寿命。
活塞杆是不能超声的部件，泵头密封垫要成对 更换，实验室中至少应备有一付4号泵头密封 垫，部件号为：5663-6589（用于反相色谱）； 0905-1420（用于正相色谱）。同时实验室应备 有5-10个PTFE过滤芯，以备日常所需。判断方 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，流速 5ml/min，系统压力大于10bar就应更换过滤白 头了。
真空脱气机脱气原理
泵 安捷伦1200系列泵有： 单元泵：G1310A、 四元泵：G1311A、 二元泵：G1312A、 二元泵SL型：G1212B。
单独一个泵腔无法满足溶剂传输系统的要 求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。
单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并 联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵 由于两个泵的相位不同，可以补偿流量脉冲， 但由于单向阀的数量增多，所以容易造成泄漏， 增加了维护使用的难度。串连柱塞泵左泵腔的 活塞运动速度为右泵腔活塞的2倍，因此，相同 时间内，左泵提供的流量为右泵的两倍，左泵 提供的溶剂一半直接供给系统，另一半被右泵 吸入，稍后供给液相系统，减少了单向阀的用 量，可以使用压缩因子补偿。
Agilent1200 高效液相色谱仪工作站 学习总结
开首语
本人在2008年1月8日至1月11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。
硬件篇
安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。 安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。
这就是随你所欲啦。关泵为PUMP OFF，关闭 整个系统为STANDBY，这里要说明的是PUMP OFF和STANDBY是有区别的，前者为泵的关闭， 后者为停泵至待机状态的。如果选BACK命令， 则关闭工作站。
这是关机方法中的一个小技巧，这当然不 可用在分析方法上，分析方法中前后宏命令最 好慎用，
设置关灯后洗柱：第一步
设置关灯后洗柱：第二步
设置关灯后洗柱：第三步
设置关灯后洗柱：第四步
没编好，在方法编辑过程中，进入仪器参数设 置-检测参数VWD设置，在右下角选“更多信 息”，点击进入后点选“特殊设置”，对“当 灯关闭时可进行分析（E）”进行勾选，再在 “运行前命令/宏”中输入LAMP OFF，这样，就 可以实现先关灯后再运行洗柱的方法了。然后 在“运行后命令/宏”中设置完成后关泵或关闭 工作站，
四元泵，其实就是比单元泵多了四元比例阀。 由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元 比例阀外，还要更换主板。需要注意的是，当 使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到 四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面 的通道上。如果经常使用盐溶液，建议定期用 水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐 沉淀。
二元泵的工作原理
进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、 高性能进样器G1367A、 高性能进样器SL型G1367B、 手动进样器G1328B。
自动进样器的特殊功能，洗针功能可以把 样品残留降低到最小限度；多次吸液用于进样 量大于100μl的情况；程序进样可以非常灵活
Agilent 1200HPLC系统堆叠方式
脱气机 安捷伦1200系列在线脱气机有，微量真空
脱气机G1379B、标准真空脱气机G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允许气体分 子通过，液体分子无法通过。A型用的是微渗 管，B型用的是滤膜。流路A型是左进右出，而 B型为下进上出，本科室使用的为A型G1322A。 使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间 的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费 用。
那如何对它进行合理积分以得到比较准确的数 据这是个关键，这可以从积分事件中进行设置。 斜率灵敏度和峰宽的数值改动要慎重，因为选 用不同数值，将影响色谱峰起止点的识别，得 到不同的峰面积，进而影响到所得定量结果的 准确程度。一定要保证处理同一系列数据（各 个标样数据和未知样品数据）时，
这两个参数值是一致的。最小峰面积和最小峰 高的数值大小不会影响所得峰面积，仅仅做为 是否对该色谱峰进行积分的标准。积分事件表 中的积分参数并不是孤立于方法的参数，它们 属于方法的一部分内容，所以保存积分参数时 应先将积分事件保存到方法中，然后再保存方 法，积分参数就会被保存下来。如果自动积分
意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原 方法中设置的参数。还有，仪器参数设置—— 四元泵的参数设置。1、停止时间：是仪器停 止采集数据的时间，并不是泵停止工作的时间。 本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10 分钟后，不再采集数据，但泵仍然继续工作， 向系统提供流动相。使用自动进样器
时一定要设置适当的停止时间，以保证连续进 样的要求；2、后运行时间：是指一次运行结束 后，到第二次进样前的等候时间，该时间用于 系统为第二次进样做好准备。例如：将不感兴 趣的杂质冲洗出色谱柱，或等待系统中的流动 相真正变成下一次进样的初始比例。做梯度洗 脱时，一定要设置该数值；3、压力限：
软件篇
软件部分，这就是1200液相色谱仪的化学 工作站。本所安捷伦1200高效液相色谱仪工作 站软件版本为B.02.01，现在新的版本为B.03-01 的了，但这没有太多的差别，新版本增加的只 是一部分我们很少用到的高级功能。
在这里我就和大家一起讨论一些日常使用 中遇到的细节问题，也许是我们使用过程中所 容易忽略也容易造成操作问题的。
四元泵的工作原理
二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从 0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态 混合器，使流动相混合更加均匀；如果配置
第二步：使用进样器程 序（U）
第三步：更多信息（功能项）
对于手动进样器，必须了解六通阀的工作原理， 应特别注意的是进样量少于定量环的50%或大 于定量环的3-5倍量是比较准确的，不过，大家 用自动进样器已经习惯了，如果再用回手动进 样器会不会有些郁闷？会不会有一种坐惯了宝 马又要回到踩单车的感觉？
我想对方法的编辑大家应该都比较常用和熟悉 的了，在这里我选一些也许大家不太注意的说 一说吧。编辑方法仪器中，方法编辑选项里有 四个可选项，1、方法信息（M）；2、仪器/采 集（I）；3、数据分析（D）；4、运行时选项 表（R）。首先选择所要编辑方法哪一部分内容。 需要注意的是，不选择某一部分内容，并不意 味着方法中不含有该部分内容，而仅仅
混合中出现流动相不稳定的现象，特别是流动 相配比较低的如小于1%，其多元混合效果难以 达到我们的要求，造成保留时间漂移，甚至得 不到我们预期的色谱峰。明白四元泵的低压混 合的道理，实际操作中我们发现问题时，有助 于我们对原因的分析。
必要时泵可以拆御，更换密封垫及滤芯。 对容易出故障部位及处理方法，比如宝石
会报错，会提示仪器没有准备就绪。怎么办呢， 在方法的运行时选项表中有“运行前命令/宏” 和“运行后命令/宏”，我们可不可以在“运行 前命令/宏”中设置把灯关了呢？当然可以，而 且这是关灯后再洗柱方法中所必须的，但我在 前面说过，先关灯，仪器会报错，方法无法运 行。其实很简单，这是因为我们有一个细节