作为色谱柱填料的凝胶表 面有许多大小不一的孔穴， 体积非常大（即分子量很 大）的溶质分子由于无法 进入任何孔穴，很快就从 色谱柱中流出；尺寸较小 的溶质分子，由于他们进 入部分尺寸较大的孔穴， 因此在色谱柱中的停留时 间较长，较迟从色谱柱中 流出。这样，溶质分子就 会按尺寸从大到小的顺序 从色谱柱中流出，被分离
反相凝胶渗透色谱（RGPC）就是将未知孔穴尺寸及分布 的试样装填色谱柱，用一系列已知分子尺寸的溶质分别流 经色谱柱，根据不同尺寸分子对应的淋出体积，推算试样 内部的孔穴尺寸及分布。 项目 正相GPC 反相GPC （流动相内） 溶质分子尺寸 未知 已知 （固定相内） 孔穴尺寸和分布 已知 未知


同系列标样种类较多，具有较宽的相对分子量分
布，且每种标样的分子量分布较窄

溶液中，标样分子不能有变化，具有已知的尺寸
大小和形状

本课题组采用的标样分子体系及其对应孔穴直径
将纤维磨成粉末装填 将纤维切碎装填 用完整的纤维装填 1.松散纤维装填 2.块状、球状、条状纤维装填 3.棉条、粗纱、纱线装填 4.棉胎装填 5.织物直接装填 本课题组将棉织物剪成2mm ×2mm左右的碎布， 再用分析研磨机处理，使之成纤维状
针对仪器、方法本身特性和本课题组实际情况，注意： 整理到织物上的化学品必须具有一定的牢度，不被轻易淋 洗下来。若被淋洗下来，会影响试验结果。若洗脱的化学 品不亲水，即油性，则可能沾在仪器上而不易去除，影响 试验结果 可测的最大孔穴为39nm。虽然有更大的分子可用于标定 更大的孔穴，但它们的淋出时间相差在误差范围内，从而 失去意义。 只有一种装柱形式。这是由本课题组的实际情况决定


分离色谱（Partition Chromatography）
离子色谱（Ion Chromatography） 亲和色谱（Affinity Chromatography） 体积排阻色谱（Size Exclusion Chromatography）或 凝胶渗透色谱（Gel Permeation Chromatography）
高效液相色谱（HPLC）是色谱法的一个重要分支，以液体为 流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或
不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色
谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而 实现对试样的分析
按照分离原理的不同，HPLC可以分为以下几种

吸附色谱（Adsorption Chromatography）

本课题组的纤维装填需已制好的纤维样拿到外校由专人装填
填 料 方 法
轻叩干填法
d>20um
高压湿法 (匀浆填装技术)
下流法 上流法
用注射器将试样（即标样：溶有一定量的标样分子的超纯水）注 入进样器，由泵输入的超纯水将标样带入色谱柱。当试样进入示差 折光检测器时，由于它们与作为参比的超纯水折光指数不同，会立 即被检测到，检测器就发出信号给记录仪，从而在记录仪上显示出 淋出峰。组分收集器是由多个已知质量的试管和一个精密天平组成。 它将流出的组分分别收集、称重，用于分析时归一化计算
流动相：水（本课题组采用超纯水） 使用过的标样分子体系
1.不同分子量、麦芽糖、棉子糖、水苏糖）
和一系列多聚糖（分子量在2600~24000）
3.乙二醇、聚乙二醇和葡聚糖（本课题组采用）
标样分子必须满足的条件

标样分子不能在纤维上发生化学吸附或物理吸附