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植物瞬时表达系统的研究进展

种植与养殖
植物作为生物反应器为人类提供了一个更加安全和廉价的生产体系。

与所有的生物反应器相比,植物是最廉价的“工厂”。

植物所需要的仅是阳光和土壤及水分。

另外,植物细胞中绝对不会含有潜在的动物或人类病原。

自从1983年Fraley等[1]首次报道将细菌基因导入植物细胞获得成功表达以来,至今已有多种蛋白质在不同植物中成功表达[2-4]。

研究表明植物生物反应器具有广阔的应用前景。

1植物生物反应器的表达系统
植物生物反应器主要有两大表达系统,既稳定表达系统和瞬时表达系统。

稳定表达系统是利用稳定遗传转化方法表达和生产重组蛋白质,特点是操作简便,重组蛋白质产物置于种子或块茎中易于保存。

如将抗癌基因p53克隆到表达载体,农杆菌遗传转化并在受染植物中表达[5]。

由于外源性目的基因整合入植物基因组中,因此外源基因可以在后代中稳定表达。

以植物病毒为载体的瞬时表达系统具有快速的优势。

不需要稳定遗传转化,从病毒侵染到高量表达仅需要7-14天。

这种表达系统是应用植物病毒在植物中复制、转录和传播。

其技术具有简单、快速和产量高等优点。

2植物瞬时表达系统的研究进展
2.1病毒表达载体
常用的植物病毒载体包括多烟草花叶病毒(TMV)、豇豆花叶病毒(CPMV)、马铃薯X病毒(PVX)等。

Lim等[6]通过TMV和ORSV的启动子分别控制外源性基因和ORSV衣壳基因的表达,提高了重组蛋白质的表达量。

Gleba等研究表明,外源蛋白表达量最高
植物瞬时表达系统的研究进展
(吉林师范大学生命科学学院136000)
【摘要】利用植物作为生物反应器是一个新兴的研究领域。

本文概述了植物生物反应器的两
个主要的表达体系、病毒载体介导的植物瞬时表达系统在表达外源方面的优势,以及植物瞬时
表达侵染技术的研究进展,并阐述了植物生物反应器的发展趋势。

【关键词】植物生物反应器;转基因植物;重组蛋白质
杨丽萍
Research Progress of Plant transient expression system
Yang Liping
[Abstract]The use of plant as a bioreactor is a new research field.In this paper,the two main expres⁃
sion systems of plant bioreactor,the advantages of virus vector-mediated transient expression system
in expressing exogenous genes,and the research progress of plant transient expression infection tech⁃
nology were reviewed.The development trend of plant bioreactor was also described.
[Keywords]plant bioreactor;transgenic plant;recombinant protein
(School of Life Sciences,Jilin normal University,Siping,Jilin136000)
*基金项目
基金项目::吉林省教育厅“十三五”科研规划项目,名称:《基因沉默抑制子HC-Pro在植物基因组中的表观遗传调控作用》,编号:JJKH20191013KJ。

作者简介
作者简介::杨丽萍(1974.-),女,汉族,吉林省吉林市人,植物学博士,吉林师范大学,副教授,从事植物学、遗传学教学和研究。

现代农业研究
种植与养殖
可达植物总可溶性蛋白10%[7]。

来源于TMV的病毒病毒载体30B具有表达量高的优点,Yang等利用该载体在植物瞬时表达GFP,表达量达到总可溶性蛋白4.8% [8]。

目前,CPMV表达载体已广泛用于动物保护性疫苗的生产。

2.2植物受体材料的选择
到目前为止,所涉及的宿主植物主要有:烟草、马铃薯、番茄、芥菜、苜蓿、黑眼豆和水稻等。

烟草作为受体材料,因其适合培养,又能够被多种病毒侵染,被人们所青睐。

选用马铃薯、西红柿的目的是要进行动物饲喂试验。

此外,一些可以直接食用的植物业可以用作受体材料。

2.3植物瞬时表达的侵染技术
植物瞬时表达系统主要的侵染技术有叶片注射法和真空侵染法。

2007年,Liu等利用叶片注射法在烟草(N.tabacum)中成功地表达了药用蛋白[9]。

2008年,Yang 等利用根部吸收携带病毒载体和外源基因的农杆菌,在烟草中瞬时表达了绿色荧光蛋白GFP[8]。

2011年,Fan等研究利用豌豆发芽种子的真空侵染,成功表达了外源蛋白。

2013,杨丽萍等利用种子吸收法在番茄中瞬时表达了外源基因。

2017年,周波等利用根部真空侵染法在烟草中成功表达了药用蛋白。

3展望
植物生物反应器具有广阔的应用前景,可以用于生产有医疗价值的抗体、疫苗等蛋白质。

选择哪一种侵染技术进行蛋白表达和生产,选用哪一种植物作为宿主,以及如何解决规模化生产的问题等,还有待进一步研究。

这些问题的解决,为植物生物反应器的发展和应用奠定扎实的研究基础,将为外源重组蛋白质的生产和应用开辟更广阔的道路。

参考文献
参考文献::
[1]Fraley RT,Rogers SG,Horsch RB,et al.Expression of bacte-
rial genes in plant cells[J].Proc Natl Acad Sci USA,1983,80
(15):4803-4807.
[2]Ehsani P,Meunier A,Nato F,et al.Expression of anti human
IL-4and IL-6scFvs in transgenic tobacco plants[J].Plant
Mol Biol,2003,52(1):17-29.
[3]Desai UA,Sur G,Dauner TS,et al.Expression and affinity
purification of recombinant proteins from plants[J].Protein
Expre Purifi,2002,25(1):195-202.
[4]李轶女,胡英考,等.转基因植物基因工程疫苗.生物技术通
报,2002,2(4):11-15.
[5]李晓东,曹宛虹,刘玲,等.抗癌基因p53导入番茄的初步
研究[J].园艺学报,2001,28(4):356-358.
[6]Lim AA,Tachibana S,Watanabe Y,et al.Expression and pu-rification of a neuropeptide nocistatin using two related plant
viral vectors[J].Gene,2002,289(1-2):69-79.
[7]Gleba Y,Klimyyuk V,Marillonnet S,et al.Magnifection-a
new platform for Expressing recombinant vaccines in plant.
Vaccine,2005,23:2042-2048.
[8]杨丽萍,金太成,徐洪伟,李华,周晓馥.植物中瞬时表达外
源基因的新型侵染技术.遗传,2013,35(1):111-117. [9]周波,王悦,许亚男,刘雨晴,孟大伟,金太成,杨丽萍.真
菌免疫调节蛋白FIP在烟草中的瞬时表达,分子植物育
种,2017,15(9):3497-3501.■
现代农业研究。

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