（2）评价疗效
网织红细胞反应： 网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别 或巨幼细胞贫血分别 给予铁剂、维生素B 或叶酸治疗2~3d后，网织 给予铁剂、维生素 12或叶酸治疗 后 红细胞计数值开始上升， 达到最高(10% 红细胞计数值开始上升，7~10d达到最高 达到最高 左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、 左右 ；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、 血红蛋白开始升高。 血红蛋白开始升高。 骨髓移植、 治疗后： 骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢复造 治疗后 血功能， 升高， 血功能，RMI升高，网织红细胞计数值上升。 升高 网织红细胞计数值上升。
六、参考值
成人： 成人：0.005-0.015（0.5%-1.5%） （ ） 新生儿： 新生儿：0.02-0.06（2%-6%） （ ） 儿童： 儿童：0.005-0.075（0.5%-7.5%） （ ） 成人绝对值（ 成人绝对值（24-84） ×109/L ）
七、临床意义
（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型 ）评价骨髓增生能力， 再障时 明显降低。绝对值低于 × 再障时，明显降低。绝对值低于5×109/L可 可 做为急性再障的辅助诊断指标。 做为急性再障的辅助诊断指标。 失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明 失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明 溶血性贫血 显高于正常。 显高于正常。 营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持 营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持 正常、轻度升高或降低。 正常、轻度升高或降低。
（3）放、化疗监测 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制， 机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制， 早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织 降低， 早期 和 降低 红细胞的降低。而停止放、化疗， 红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功 能恢复后，又见上述指标依次上升。 能恢复后，又见上述指标依次上升。可指 导临床医师适时调整治疗方案， 导临床医师适时调整治疗方案，避免造成 严重的骨髓抑制。 严重的骨髓抑制。
网织红生成指数（ 网织红生成指数（Reticulocyte production index,RPI） ） • RPI=病人网织红细胞（%）/2 * 病人HCT/正常 病人网织红细胞（ 病人HCT/ HCT/正常
人HCT（男0.45，女0.40） HCT（ 0.45， 0.40）
• 临床应用： 临床应用： • ＞3提示溶血性贫血或急性失血性贫血； 提示溶血性贫血或急性失血性贫血；
五、注意事项
1.用酒精染液时 ， 应待玻璃片上的酒精挥发干燥 用酒精染液时， 用酒精染液时 才能加血液，染色时应用推片角不停搅动， 后，才能加血液，染色时应用推片角不停搅动， 使染料和血液混合，防止凝固。 使染料和血液混合，防止凝固。 2. 染色时间一定要充足 混合后不能立即推片， 2.染色时间一定要充足 ， 混合后不能立即推片 ， 染色时间一定要充足， 室温低时染色时间应适当延长，应覆以另一玻 室温低时染色时间应适当延长， 片防止蒸发。 片防止蒸发。 3.染液与血液比例以 ： 1为宜， 贫血适当加血量 。 染液与血液比例以1： 为宜 贫血适当加血量。 为宜， 染液与血液比例以 4.涂片厚薄均匀适宜，弓形移动，多个区域计数 涂片厚薄均匀适宜， 涂片厚薄均匀适宜 弓形移动， 5.试剂应定期重配，以免变质沉淀。 试剂应定期重配， 试剂应定期重配 以免变质沉淀。 6.与变性珠蛋白小体鉴别 与变性珠蛋白小体鉴别
网织红细胞
计数方法
1、普通光学显微镜法：活 体染色后推片镜检 2、网织细胞计数仪法：荧 光染色后用流式细胞术计数
二、试剂器材
1、试剂 10g/L煌焦油蓝酒精（水）溶液 2、器材 毛细血管采血用具、小试管、 载玻片、推片、显微镜、香柏油、二甲 苯及擦镜纸、Miller窥盘或直径约20 mm Miller 20 （较目镜内径稍小）的圆形硬纸片（正 中央开一边长为3mm的菱形或正方形小 孔，置目镜光阑处，用于缩视野法计数）
八、思考题
一溶血性贫血患者，红细胞计数 2.6x1012/L，血细胞比容0.29，网织红细 胞计数相对值为35%，如何报告网织红 细胞检测结果？
实验三
一、实验原理
网织红细胞计数
网织红细胞胞浆内残存有嗜碱性的RNA 网织红细胞胞浆内残存有嗜碱性的 物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后 RNA中负电荷基团与带正电荷的有色基团结 中负电荷基团与带正电荷的有色基团结 凝聚成颗粒呈浅蓝或蓝黑色的点状、 合，凝聚成颗粒呈浅蓝或蓝黑色的点状、丝状 或网状结构， 可在显微镜下识别。 计数1000 或网状结构 ， 可在显微镜下识别 。 计数 个红细胞中所有的网织红细胞数直接报告其百 分比， 红细胞计数结果报告其绝对值。 分比，或×红细胞计数结果报告其绝对值。
三、操作步骤
1. 染色：于载玻片的一端加煌焦油蓝酒精溶液1滴， 染色：于载玻片的一端加煌焦油蓝酒精溶液 滴 任其自然凉干后备用，取末梢血或抗凝血一滴，于 任其自然凉干后备用，取末梢血或抗凝血一滴， 已干燥的染料上，用推片角混匀后， 已干燥的染料上，用推片角混匀后，将两玻片盖合 玻片法） 试管法取染液2滴入试管 加血2滴 滴入试管， （ 玻片法 ） ； 试管法取染液 滴入试管 ， 加血 滴 混匀，封闭好， 分钟以上时间， 混匀，封闭好，待15分钟以上时间， 分钟以上时间 2. 推片：取混合液 小滴于载玻片的一端，推制成薄 推片：取混合液1小滴于载玻片的一端 小滴于载玻片的一端， 而均匀的血膜， 而均匀的血膜， 3. 低倍镜浏览 ， 选取红细胞分布均匀网织红细胞染 低倍镜浏览， 色较好的部分（体尾交界处） 色较好的部分（体尾交界处），滴香柏油转换至油 窥盘下计数小方格中的RBC数和大方 镜，在Miller窥盘下计数小方格中的 窥盘下计数小方格中的 数和大方 格中的网织红细胞数（ 或数出整个视野中的RBC 格中的网织红细胞数 （ 或数出整个视野中的 总数和其中的网织红细胞数， 总数和其中的网织红细胞数，换一视野同法计数至 几个视野RBC总数 总数>1000为止）。 为止） 几个视野 总数 为止
Miller窥盘
将Miller窥盘放在显 Miller窥盘放在显 微பைடு நூலகம்目镜中, 微镜目镜中,通过窥盘 中大小方格间的9 中大小方格间的9比1 比例关系计算RBC RBC数和 比例关系计算RBC数和 Ret数 Ret数。
B
1
3
A
四、计算
ler窥盘法： 网织红细胞 （ Retic） 窥盘法：网织红细胞（ 窥盘法 ） 百分率(%)= （大方格内 大方格内Retic总数） 总数） 百分率 总数 /（小方格内 总数× ） （小方格内RBC总数×9）×100% 总数 2.直接计数法：网织红细胞（Retic）百 直接计数法： 直接计数法 网织红细胞（ ） 分率(%)= 多个视野内 多个视野内Retic总数 多 总数/多 分率 总数 个视野内RBC总数×100% 总数× 个视野内 总数
网织红细胞（ ） 网织红细胞（Ret）
是晚幼红细胞脱核后到成熟红细胞间 的过渡细胞， 尚未完全成熟的红细胞， 的过渡细胞，是尚未完全成熟的红细胞， 其胞浆内残存有嗜碱性的RNA物质 。 嗜 物质。 其胞浆内残存有嗜碱性的 物质 碱性物质与染料凝聚成蓝色颗粒， 碱性物质与染料凝聚成蓝色颗粒，颗粒与 颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。 颗粒连缀成线，线连接成网，故而得名。 分型： 丝球型、 网型、 破网型、 点粒型。 分型 ： 丝球型 、 网型 、 破网型 、 点粒型 。 （Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型）