镇痛实验设计
雷雪
1.实验材料
1.1动物与饲料
昆明小鼠,SPF级,18-22g,均购于吉林大学动物部,合格证号:****。
实验动物均分笼饲养,标准颗粒饲料,自由摄食饮水,室温(20士2)℃,相对湿度55%一60%。
1.2药品与试剂
牛黄宁宫片原药,牛黄宁宫片新药(由****提供,批号:****)【配制方法:******】;阿司匹林(****批号****)
1.3实验仪器
YBS-L智能热板仪(生产厂家批号)
1.4药品与试剂的配制
参考文献[1],人与动物药物计量换算关系。
选择人:小鼠二1:12倍比关系进行配制,此复方临床用量为成人**,制成原药组。
新药选用临床剂量的0.5、1、2倍比关系,将药物配制成新低、新中、新高3个生物等效剂量,空白对照组为生理盐水。
2.操作方法
2.1将热板仪温度调节到55±5℃作为热刺激源。
筛选合格小鼠:每次取一只1只小鼠放在热板上,小鼠自放在热板上至出现舔后足所需时间(s)作为该鼠的痛阈值。
凡舔后足时间小于5s或大于30s或跳跃者弃之不用。
将合格小鼠重复测2次正常痛阈值,取平均值作为该小鼠给药前的痛阈值。
将合格小鼠分成6组,每组10只。
2.2各组小鼠给药(0.2ml/10g)
2.3给药30、45、60min后分别测小鼠痛阈值。
如60s仍无反应,将小鼠取出,以免烫伤,其痛阈值按60s计算。
[2]
3.统计学方法
小鼠镇痛实验热板痛阂值潜伏期和大鼠解热实验体温变化为两因素多水平重复测量数据资料,采用双因素测量方差分析评价主效应和交互效应;采用单因素重复测量方差分析进行时间因素单独效应分析;用单向方差分析(one-way ANOVA)进行分组因素单独效应分析,显著性水准为a=0.05。
[3]
4.实验结果
给药前后小鼠痛阈值比较
组别给药前痛
阈值(s)
给药前后痛阈值(痛阈值提高率)
30min 60min 90min 120min SUM F P
空白
组
对照
组
△△
原药
组
△
新高
组
新中
组
新低
组
参考文献
[1]李恒云,李文健,王新民.解热镇痛药的作用评价及应用原则[J].医
学动物防制.2005,21(9):671
[2]刁王功立.非多体抗炎药不良反应及对策仁[J].中国执业药师.2005,
7:16-18
[3]冯丽娟,周本杰.“退热止痛散”活性部位解热镇痛药效评价仁[J].
中药材.2009,32(4):117一119。